魏大江

摘要 采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、溴菌腈等3種殺菌劑對(duì)香樟炭疽病的室內(nèi)抑制效果。結(jié)果表明：在供試的3種殺菌劑中，對(duì)香樟炭疽病菌毒力最強(qiáng)的為戊唑醇EC50值為0.5879mg/L，苯醚甲環(huán)唑次之為6.6115mg/L，溴菌腈毒力最弱為52.8231mg/L。

關(guān)鍵詞 殺菌劑；炭疽菌；毒力測(cè)定

由于環(huán)境的炭疽病已成為香樟主要病害之一。它是常綠植物，是單位主要的綠化樹(shù)種。香樟炭疽病在廣東、廣西、海南、湖南、云南和福建等地常有發(fā)生。本病在苗圃或幼林危害較重，大樹(shù)較輕。發(fā)病植株生長(zhǎng)衰弱，枯枝、枯梢多，幼樹(shù)多從頂枝梢逐漸返枯至樹(shù)干基部，嚴(yán)重的樹(shù)整株死亡。

本病癥狀主要特征是枯梢。葉片、果實(shí)上的病斑圓形，融合后呈不規(guī)則形，暗褐色至黑色，嫩葉皺縮變形，潮濕天氣，在病嫩莖、病葉上常看到淡桃紅色的點(diǎn)狀物，此為病菌的分生孢子盤(pán)。幼嫩枝干上的病斑開(kāi)始時(shí)圓形或橢圓形，大小不一，初為紫褐色，漸變黑褐色，病部稍下陷，以后病斑連結(jié)融合，若繞枝條一圈，枝條上部變黑干枯，重病株病斑沿主干向下蔓延，最后整株死 亡。春夏之交，病部有時(shí)長(zhǎng)出球形黑色小點(diǎn)，此為病菌的子囊殼。

香樟炭疽病的發(fā)生嚴(yán)重影響了香樟的生長(zhǎng)，影響綠化，它的防治始終是人們研究和關(guān)注的重點(diǎn)?；瘜W(xué)防治是控制炭疽病發(fā)生、減少損失的最有效途徑之一。但一些常用藥劑如井岡霉素等的長(zhǎng)期使用，已經(jīng)引起了嚴(yán)重的抗藥性問(wèn)題。通過(guò)菌絲生長(zhǎng)速率法，測(cè)定了戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、溴菌腈等3種殺菌劑對(duì)炭疽菌的室內(nèi)抑制效果，以篩選藥劑為防治炭疽病的防治提供有價(jià)值的理論和實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試病原菌

供試病原菌為香樟炭疽病葉片，這些葉片在較長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)未使用任何殺菌劑。

1.2 供試培養(yǎng)基

本次實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基：瓊脂16 g，馬鈴薯200 g，葡萄糖18 g，水1000 ml， pH無(wú)需調(diào)制。

1.3 供試藥劑

30%戊唑醇可濕性粉劑（山東華陽(yáng)農(nóng)藥化工集團(tuán)有限公司）、20%苯醚甲環(huán)唑水分散顆粒劑（北京中農(nóng)方圓科技發(fā)展有限公司）、70%溴菌腈可濕性粉劑（江蘇托球農(nóng)化有限公司）

30%戊唑醇處理劑量為125，250，500，1000，2000mg/L

20%苯醚甲環(huán)唑處理劑量為250，500，1000，2000，4000mg/L

70%溴菌腈可濕性粉劑處理劑量為62.5，125，250，500，1000mg/L

1.4主要儀器和材料

立式壓力蒸汽滅菌鍋 超凈工作臺(tái) 智能人工氣候箱 三角瓶 移液管 培 養(yǎng)皿 打孔器等

1.5 試驗(yàn)方法

按常規(guī)方法制好培養(yǎng)基備用，采集發(fā)病期的葉片，病健交界處切取0.5cm*0.5cm，用75%酒精消毒15秒，再用無(wú)菌水沖洗3次，干后放置在培養(yǎng)中央，在25℃培養(yǎng)3-5天觀察。等長(zhǎng)出菌落，挑取炭疽病孢子團(tuán)放在培養(yǎng)平板中央，放在恒溫培養(yǎng)箱中，在25℃下培養(yǎng)幾天數(shù)日備用。

每個(gè)三角瓶中分別裝90ml的培養(yǎng)基。封口滅菌。每種殺菌劑設(shè)定5個(gè)質(zhì)量濃度梯度相鄰遞度相差2倍。用無(wú)菌水配制。待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右，將不同濃度藥液分別量取10ml加入到三角瓶中，混勻后分別裝至5個(gè)培養(yǎng)皿中，同時(shí)設(shè)置無(wú)菌水為對(duì)照。

用5mm打孔器消毒后在供試菌種邊緣取下菌塊即菌餅，再用接種鏟將菌塊有菌絲的一面向下與培養(yǎng)基粘合，做上標(biāo)記在25℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天。采用十字交叉測(cè)量菌落生長(zhǎng)直徑。

1.6數(shù)據(jù)處理

抑制生長(zhǎng)率= ×100%

將抵制生長(zhǎng)率轉(zhuǎn)換成抵制機(jī)率值-縱坐標(biāo)，殺菌劑質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換成對(duì)數(shù)值-橫坐標(biāo)求出公式相關(guān)，再求出抵制有效中濃度即EC50值。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種殺菌劑對(duì)香樟炭疽病菌菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)下表

不同殺菌劑對(duì)香樟炭疽病菌菌絲生長(zhǎng)的抵制效果

20%苯醚甲環(huán)唑處理劑量為250，500，1000，2000，4000mg/L分別對(duì)應(yīng)的的生長(zhǎng)抑制率%為78.4，84.9，87. 9，90，92.6。

30%戊唑醇處理劑量為125，250，500，1000，2000mg/L分別對(duì)應(yīng)的的生長(zhǎng)抑制率%為84，85. 9，88. 8，91. 4，94

70%溴菌腈可濕性粉劑處理劑量為62.5，125，250，500，1000mg/L分別對(duì)應(yīng)的的生長(zhǎng)抑制率%為61.4，67. 5，75. 3，80，87.5

從上表可以看出各殺菌劑效果明顯，都有抵制作用。

不同殺菌劑對(duì)香樟炭疽病菌EC50比較

3種殺菌劑分別在5種不同質(zhì)量濃度下抑制情況，與對(duì)照相比都有顯著差異。30%戊唑醇在質(zhì)量濃度為2000mg/L抑菌率為94%，20%苯醚甲環(huán)唑在質(zhì)量濃度4000mg/L抑菌率為92.6%，70%溴菌腈在質(zhì)量濃度1000mg/L抑菌率為87.5%。說(shuō)明三種殺菌劑對(duì)香樟炭疽病菌具有很好的防治效果。

經(jīng)計(jì)算，3種殺菌劑濃度對(duì)數(shù)與生長(zhǎng)抑制率值之間為線性相關(guān)。

20%苯醚甲環(huán)唑的回歸方程為y=0.5242x+4.57，EC50值（mg/L）為6.6115，回歸系數(shù)R2為0.9785

30%戊唑醇的回歸方程為y=0.4708x+5.1086，EC50值（mg/L）為0.5879，回歸系數(shù)R2為0.9769

70%溴菌腈的回歸方程為y=0.7006x+3.793，EC50值（mg/L）為52.8213，回歸系數(shù)R2為0.9868

毒力回歸方程的相關(guān)系數(shù)接近1，即每種殺菌劑不同濃度間的抑菌率相關(guān)性高。從上面毒力回歸結(jié)果可知，30%戊唑醇抑制作用最強(qiáng)，20%苯醚甲環(huán)唑抑制用次之，70%溴菌腈抑制作用最弱。

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果得知：30%戊唑醇抑制作用最強(qiáng)。3種殺菌劑在較高質(zhì)量濃度對(duì)香樟炭疽病菌表現(xiàn)出較好的抑制作用。因此，30%戊唑醇、20%苯醚甲環(huán)唑和70%溴菌腈建議使用濃度分別為2000mg/L、4000mg/L、1000mg/L

以上只是進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定，還需在室外進(jìn)行田間試驗(yàn)，以最終決定使用濃度和實(shí)際藥效。

4 參考文獻(xiàn)

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