李艷東，周永莉，朱琳，鄭建云

(西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，西安 710077)

胃腺癌組織FKBP14表達(dá)變化及其與患者預(yù)后的關(guān)系

李艷東，周永莉，朱琳，鄭建云

(西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，西安 710077)

目的觀察胃腺癌組織FK506相關(guān)蛋白14(FKBP14)蛋白表達(dá)變化，并探討其臨床意義。方法選擇胃腺癌組織62例份為觀察組，正常胃黏膜組織46例份為對照組。采用免疫組化SP法檢測兩組FKBP14蛋白表達(dá)，分析胃腺癌組織FKBP14蛋白表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)以及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果觀察組、對照組FKBP14蛋白陽性表達(dá)率分別為62.9%(39/62)、26.1%(12/46)，兩組FKBP14蛋白陽性表達(dá)率比較P<0.05。胃腺癌組織FKBP14蛋白表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P均<0.05)，與性別、年齡及分化程度無關(guān)(P均>0.05)。FKBP14陽性、陰性胃腺癌患者5年生存率分別為38.5%(15/39)、78.3%(18/23)，二者比較P<0.05。FKBP14表達(dá)、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響胃腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P均<0.05)。結(jié)論胃腺癌組織FKBP14蛋白表達(dá)陽性率升高。檢測胃腺癌組織FKBP14蛋白有助于判斷患者的病情和預(yù)后。

胃腫瘤；胃腺癌；FK506相關(guān)蛋白14

胃癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，病死率居惡性腫瘤中的第二位[1]。大部分胃癌患者確診時(shí)已處于進(jìn)展期，5年生存率較低[2、3]。早期診斷、早期治療是提高胃癌患者預(yù)后的主要措施。隨著腫瘤生物學(xué)的發(fā)展，尋找有效的生物靶標(biāo)是胃癌治療的新方向。FK506 相關(guān)蛋白 14(FKBP14 )是FKBPs的家族成員。有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)KBP14在卵巢癌[4]、骨肉瘤[5]組織中高表達(dá)，能夠促進(jìn)上述腫瘤細(xì)胞的增殖。但胃癌組織中 FKBP14蛋白表達(dá)變化及其臨床意義未見報(bào)道。本研究觀察了胃腺癌組織中FKBP14蛋白的表達(dá)變化，并分析其與胃腺癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系以及在患者臨床預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2008年1月～2012年1月西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院手術(shù)切除的存檔蠟塊108例，其中胃腺癌組織62例份(觀察組)，正常胃黏膜組織46例份(對照組)。觀察組胃腺癌組織來自62例胃腺癌患者，其中男41例、女21例；年齡35～82歲，平均56歲；臨床分期Ⅰ期14例，Ⅱ期22例，Ⅲ+Ⅳ期26例；分化程度為低分化18例，中分化11例，高分化33例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移36例。所有患者術(shù)前未進(jìn)行放療、化療及其他針對腫瘤的治療。

1.2 FKBP14蛋白檢測及結(jié)果判定 將兩組蠟塊進(jìn)行4 μm連續(xù)切片，采用免疫組化SP法檢測FKBP14蛋白，操作按試劑盒說明書進(jìn)行。FKBP14抗體和免疫組化SP檢測試劑盒均購自英國Abcam公司。用PBS代替一抗做陰性對照，已知陽性組織做陽性對照。染色切片均由2名病理醫(yī)師采用雙盲法獨(dú)立閱片，采用半定量積分法判定結(jié)果[6]。FKBP14在胃腺癌中的表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)，為淺黃色至棕黃色顆粒狀物質(zhì)。陽性細(xì)胞數(shù)≤5%計(jì)0分，<5%～25%計(jì)1分，<25%～50%計(jì)2分，<50%～75%計(jì)3分，>75%計(jì)4分；細(xì)胞染色無色計(jì)0分，淡黃色計(jì)1分，黃色計(jì)2分，棕黃色計(jì)3分；兩項(xiàng)得分相乘為最終得分，最終得分≥5為陽性，否則為陰性。

1.3 預(yù)后觀察方法 所有胃腺癌患者進(jìn)行隨訪，截止時(shí)間為2016年12月，隨訪2～60個(gè)月。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。組間比較采用χ2檢驗(yàn)，生存分析采用Kaplan-Meier法，生存率比較采用Log-rank檢驗(yàn)，多因素生存分析采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組FKBP14蛋白表達(dá)比較 觀察組、對照組FKBP14蛋白陽性表達(dá)率分別為62.9%(39/62)、26.1%(12/46)，兩組FKBP14蛋白陽性表達(dá)率比較P<0.05。

2.2 FKBP14蛋白表達(dá)與胃腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 胃腺癌組織FKBP14蛋白表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P均<0.05)，與性別、年齡及分化程度無關(guān)(P均>0.05)。見表1。

表1 FKBP14蛋白表達(dá)與胃腺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 胃腺癌組織中FKBP14蛋白表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系 Kaplan-Meier生存分析顯示，F(xiàn)KBP14陽性、陰性胃腺癌患者5年生存率分別為38.5%(15/39)、78.3%(18/23)，P<0.05。Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型多因素分析結(jié)果顯示，F(xiàn)KBP14表達(dá)、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響胃腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P均<0.05)。見表2。

表2 胃腺癌患者預(yù)后Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型多因素分析結(jié)果

3 討論

FKBPs包含F(xiàn)KB結(jié)構(gòu)域，這些結(jié)構(gòu)能夠與免疫抑制劑結(jié)合，如FK506和雷帕霉素。FKBPs具有很多生物功能，包括激酶活性、受體信號(hào)傳導(dǎo)、蛋白折疊及細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)?。FKBP14基因定位于人染色體7p14.3，由該基因編碼的蛋白質(zhì)是肽基-脯氨酰順式-反式異構(gòu)酶的FK506結(jié)合蛋白家族的成員。 編碼的蛋白質(zhì)存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的內(nèi)腔中，可以加速蛋白質(zhì)折疊。蛋白質(zhì)編碼變體和非編碼變體都是從該基因轉(zhuǎn)錄的。FKBP14是果蠅中重要的調(diào)節(jié)因子[7]，F(xiàn)KBP14的突變是導(dǎo)致進(jìn)行性脊髓病變、肌病和聽力喪失的Ehlers-Danlos綜合征的病因[8～10]。目前有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)KBPs在腫瘤等疾病中扮演著越來越重要的角色[11，12]，并在一些惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)了 FKBPs的表達(dá)改變，比如FKBP12在惡性血管內(nèi)皮瘤[13]及兒童星形細(xì)胞瘤中高表達(dá)[14]，F(xiàn)KBP52在乳腺癌[15]及肝細(xì)胞癌[16]中高表達(dá)。目前醫(yī)學(xué)界對FKBPs家庭成員FKBP14的研究較少[17]。

基因靶向治療是胃癌治療的新方向。本研究結(jié)果顯示，胃腺癌組織中FKBP14蛋白陽性表達(dá)率明顯高于正常胃黏膜組織，胃腺癌中表達(dá)率為62.9%，而正常胃黏膜僅為26.1%，這與Wang等[18]研究相一致。表明FKBP14參與了胃腺癌的發(fā)病過程。本研究進(jìn)一步分析了胃腺癌組織FKBP14蛋白表達(dá)與胃腺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系，結(jié)果顯示胃腺癌組織FKBP14表達(dá)與患者性別、年齡及分化程度無關(guān)，但與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。表明FKBP14在胃腺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移。

有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)KBP14在骨肉瘤中過表達(dá)與骨肉瘤患者預(yù)后不良相關(guān)[5]。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)KBP14陽性表達(dá)的胃腺癌患者與陰性表達(dá)的胃腺癌患者相比5年生存率明顯降低。FKBP14表達(dá)、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響胃腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，F(xiàn)KBP14陽性表達(dá)、TNM分期較晚、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃腺癌患者生存時(shí)間較短。表明FKBP14陽性表達(dá)與胃腺癌患者預(yù)后密切相關(guān)。有研究表明FKBP14在骨肉瘤中可通過提高PCNA、CDK1及CCNB1促進(jìn)細(xì)胞周期，通過抑制Caspase3、Bax及Caspase7來抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，通過增加SMC4和TMEM33蛋白的表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲[5]。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移及化療抵抗密切相關(guān)[19]，Wang等[18]研究表明，F(xiàn)KBP14可能通過調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物β-catenin、Snail1 及 Twist的表達(dá)促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖。這可能是FKBP14在胃腺癌發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用的機(jī)制。

綜上所述，胃腺癌組織FKBP14蛋白表達(dá)陽性率升高。檢測胃腺癌組織FKBP14蛋白有助于判斷患者的病情和預(yù)后。

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2017-05-08)