李秀君

（勝利石油管理局臨盤醫(yī)院，山東 臨邑 251507）

通過直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果探析

李秀君

（勝利石油管理局臨盤醫(yī)院，山東 臨邑 251507）

目的：探討使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果。方法：選取近期在勝利石油管理局臨盤醫(yī)院進行血液細菌鑒定的80例敗血癥患者和菌血癥患者作為研究對象。這些患者均存在發(fā)熱、全身性感染的情況。對這些患者的血液樣本進行直接藥敏試驗和常規(guī)藥敏試驗。將這些患者使用常規(guī)藥敏試驗進行血液細菌鑒定的結(jié)果作為標準。觀察這些患者使用直接藥敏試驗鑒定細菌種類的準確率、檢測細菌對抗生素敏感度的準確率及進行細菌鑒定所用的時間。結(jié)果：這些患者使用直接藥敏試驗鑒定革蘭陽性菌的準確率及鑒定革蘭陰性菌的準確率與其使用常規(guī)藥敏試驗鑒定上述細菌的準確率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。這些患者使用直接藥敏試驗檢測對抗生素敏感的革蘭陽性菌、對抗生素敏感的革蘭陰性菌、對抗生素中度敏感的革蘭陽性菌、對抗生素中度敏感的革蘭陰性菌、對抗生素耐藥的革蘭陽性菌及對抗生素耐藥的革蘭陰性菌的準確率與其使用常規(guī)藥敏試驗檢測上述細菌的準確率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。這些患者使用直接藥敏試驗進行細菌鑒定的平均時間短于其使用常規(guī)藥敏試驗進行細菌鑒定的平均時間，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果與使用常規(guī)藥敏實驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果相似。使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定所用的時間更短。

直接藥敏試驗；常規(guī)藥敏試驗；血液；細菌鑒定

敗血癥患者和菌血癥患者的死亡率均較高。在早期對敗血癥患者和菌血癥患者進行血液細菌鑒定可明確其致病菌，有助于臨床醫(yī)生為其選擇合適的藥物進行治療[1]。過去，臨床上常使用常規(guī)藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定。但進行常規(guī)藥敏試驗的時間較長，易延誤患者的治療。相關(guān)的研究結(jié)果證實，使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定可快速、準確地明確病原菌的種類及耐藥情況等。為探討使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果，勝利石油管理局臨盤醫(yī)院對近期收治的80例敗血癥患者和菌血癥患者使用直接藥敏試驗和常規(guī)藥敏試驗進行血液細菌鑒定，并將其使用兩種方法進行細菌鑒定的結(jié)果進行了對比。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對象為2015年2月至2016年2月期間在勝利石油管理局臨盤醫(yī)院進行血液細菌鑒定的80例敗血癥患者和菌血癥患者。這些患者均存在發(fā)熱、全身性感染的情況。在這些患者中，有男性患者52例，女性患者38例；其年齡為12.5～84.6歲，平均年齡為（45.8±5.8）歲。在進行本次采血前48 h內(nèi)這些患者均未使用任何藥物，未接受任何治療。這些患者均未患有凝血障礙、自身免疫系統(tǒng)疾病、血液病。

1.2 方法

在這些患者空腹的狀態(tài)下采集其10 ml的靜脈血。將血液樣本接種在 BACTEC系統(tǒng)內(nèi)，進行細菌培養(yǎng)。對這些患者進行細菌培養(yǎng)的結(jié)果均呈陽性。根據(jù)美國臨床和實驗室標準協(xié)會（NCCLS）推薦的選藥標準，選擇苯唑西林、四環(huán)素、紅霉素及克林霉素作為進行藥敏試驗的藥品。對血液樣本進行直接藥敏試驗。具體的試驗步驟為：將10 ml的血液樣本放置到無菌試管內(nèi)。將樣本以1500 r/min的速度離心處理5 min。收集樣本的上層清液。將上層清液以3000 r/min的速度離心處理15 min，棄去上層清液。將經(jīng)過處理后的樣本洗滌沉淀2次后重懸。取20 μl的懸液進行革蘭染色，在高倍顯微鏡下觀察細菌的形態(tài)[2]。如果細菌的形態(tài)為鏈狀革蘭陽性菌，則使用濃度為5%的羊血+MH瓊脂進行初步藥敏試驗。然后將菌液的濃度調(diào)節(jié)為6.8×108 cfu/L，并將菌液放置在NC21 板內(nèi)接種，進行藥敏試驗和細菌鑒定。如果細菌的形態(tài)為非鏈狀革蘭陽性菌，則直接將1滴或2滴混懸液接種在MH瓊脂平板內(nèi)，使用無菌拭子將其涂抹均勻，使用藥敏試紙片進行藥敏試驗。對這些患者的血液樣本進行常規(guī)藥敏試驗。具體的試驗步驟為：將血液樣本接種在 BACTEC系統(tǒng)內(nèi)，進行細菌培養(yǎng)。從血液培養(yǎng)瓶內(nèi)抽取少量的血液樣本，將血液樣本接種在血板、麥康凱平板及巧克力平板內(nèi)。在二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)過夜培養(yǎng)血液樣本17 h。對菌落進行革蘭染色。使用VITEK2-compact 系統(tǒng)進行細菌鑒定和藥敏試驗。

1.3 觀察指標

將這些患者使用常規(guī)藥敏試驗進行血液細菌鑒定的結(jié)果作為標準，觀察其使用直接藥敏試驗鑒定細菌種類的準確率。記錄這些患者使用不同方法進行血液細菌鑒定所用的時間。根據(jù)NCCLS制定的標準判定對血液樣本進行藥敏試驗的結(jié)果。對抗生素敏感：細菌對本次研究中使用的兩種以上抗生素的敏感度為敏感，或?qū)煞N抗生素敏感且對至少一種抗生素中度敏感。對抗生素耐藥：細菌對本次研究中使用的兩種以上的抗生素耐藥，或?qū)煞N抗生素耐藥且對至少一種抗生素中度敏感。對抗生素中度敏感：細菌對抗生素的敏感度不符合“耐藥”或“敏感”的標準。

1.4 統(tǒng)計學(xué)原理

本次研究的數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行處理，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 這些患者使用兩種方法鑒定細菌種類的結(jié)果

這些患者使用直接藥敏試驗鑒定革蘭陽性菌的準確率及鑒定革蘭陰性菌的準確率與其使用常規(guī)藥敏試驗鑒定上述細菌的準確率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。詳情見表1。

表1 這些患者使用兩種方法鑒定細菌種類的結(jié)果[n（%）]

2.2 這些患者使用兩種方法檢測細菌對抗生素敏感度的結(jié)果

這些患者使用直接藥敏試驗檢測對抗生素敏感的革蘭陽性菌、對抗生素敏感的革蘭陰性菌、對抗生素中度敏感的革蘭陽性菌、對抗生素中度敏感的革蘭陰性菌、對抗生素耐藥的革蘭陽性菌及對抗生素耐藥的革蘭陰性菌的準確率與其使用常規(guī)藥敏試驗檢測上述細菌的準確率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。詳情見表2。

表2 這些患者使用兩種方法檢測細菌對抗生素敏感度的結(jié)果[n（%）]

2.3 這些患者使用兩種檢測方法進行細菌鑒定的時間

這些患者使用直接藥敏試驗進行細菌鑒定的時間為8.24～13.91 h，平均時間為（9.98±1.28）h。這些患者使用常規(guī)藥敏試驗進行細菌鑒定的時間為48.52～72.33 h，平均時間為（62.36±5.18）h。這些患者使用直接藥敏試驗進行細菌鑒定的平均時間短于其使用常規(guī)藥敏試驗進行細菌鑒定的平均時間，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=11.324，P＜0.05）。

3 討論

菌血癥和敗血癥是比較嚴重的感染性疾病。及時對菌血癥患者和敗血癥患者進行血液細菌鑒定有利于臨床醫(yī)生為其選擇合適的治療方案，改善其預(yù)后[3]。

過去，臨床上常使用常規(guī)藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定。但進行常規(guī)藥敏試驗通常需要2～3 d。在等待常規(guī)藥敏試驗結(jié)果時，醫(yī)生僅能憑借臨床經(jīng)驗對患者進行治療。1973年，國外學(xué)者首次將直接藥敏試驗法用于臨床檢驗。近些年，我國多家醫(yī)院均使用直接藥敏試驗進行血液細菌鑒定，均取得了較好的成果。此外，直接藥敏試驗的操作更為簡便，基層醫(yī)院也可使用該方法進行血液細菌鑒定。

本次研究的結(jié)果證實，使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果與使用常規(guī)藥敏實驗對血液樣本進行細菌鑒定的效果相似。使用直接藥敏試驗對血液樣本進行細菌鑒定所用的時間更短。

[1] 郭蘇珊,林健雄,郭金鎮(zhèn),等.BACTECMGIT960用于結(jié)核分枝桿菌直接藥敏試驗的研究[J].中國病原生物學(xué)雜志,2014(10):946-948.

[2] 李珍,李從榮.細菌快速藥敏試驗方法研究進展[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2016,13(8):1142-1144.

[3] 王書俠,張家明,周競,等.血培養(yǎng)陽性標本直接藥敏試驗臨床應(yīng)用價值的評估[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2016,26(10):2270-2272.

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2095-7629-（2017）9-0127-02