宋正規(guī)，張書芬，周子焱，張愛芝，沈堅(jiān)*，傅曉，李和生，邢家凓，滿正印，趙春玲，曹麗麗

1. 寧波大學(xué)海洋學(xué)院，浙江 寧波 315211；2. 寧波市食品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，浙江 寧波 315048

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽

宋正規(guī)1，張書芬2，周子焱2，張愛芝2，沈堅(jiān)2*，傅曉2，李和生1，邢家凓2，滿正印2，趙春玲2，曹麗麗2

1. 寧波大學(xué)海洋學(xué)院，浙江 寧波 315211；2. 寧波市食品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，浙江 寧波 315048

建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的分析方法。選用ProElut C18固相萃取柱對(duì)茶葉提取液進(jìn)行凈化、親水性的Click Xion色譜柱分離，流動(dòng)相A為水（含5 mmol·L-1甲酸銨），流動(dòng)相B為V甲醇︰V水=9︰1（含5 mmol·L-1甲酸銨），甲酸調(diào)節(jié)pH至3.2，梯度洗脫分離，UPLC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式檢測(cè)。該方法適用于茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽檢測(cè)，平均回收率在60.5%～85.8%，RSD在 4.9%～7.7%，高氯酸鹽檢出限為 3 μg·kg-1，氯酸鹽檢出限為 5 μg·kg-1。方法操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高，可以滿足茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的檢測(cè)要求。

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；茶葉；高氯酸鹽；氯酸鹽

高氯酸鹽和氯酸鹽是一類無機(jī)含氯化合物，成年人每天攝入0.072～0.200 μg，可破壞紅細(xì)胞，影響血液運(yùn)輸氧氣，造成礦物質(zhì)流失，內(nèi)環(huán)境紊亂[1]。高氯酸鹽是一種持久性、極易溶于水、流動(dòng)性極強(qiáng)的全球污染物[2]。它可以干擾甲狀腺素的合成與分泌，影響人體正常的新陳代謝，阻礙人體生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)兒童影響尤為嚴(yán)重，體內(nèi)的高氯酸鹽過量，兒童會(huì)出現(xiàn)智商偏低、學(xué)習(xí)障礙、發(fā)育遲緩、多動(dòng)癥、注意力分散，甚至?xí)霈F(xiàn)弱智等癥狀[3]。為此，2005年2月，美國科學(xué)院宣布高氯酸鹽參考劑量為0.7 μg·kg-1·d-1[4]。氯酸鹽是飲用水消毒過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)品，可直接通過飲用進(jìn)入人體，也可經(jīng)過自然界含氯化合物的分解產(chǎn)生氯酸鹽，通過降水，進(jìn)入動(dòng)植物的體內(nèi)，通過食物消化吸收進(jìn)入人體。氯酸鹽具有較強(qiáng)的氧化性，進(jìn)入人體對(duì)內(nèi)環(huán)境造成影響，造成飲用水中對(duì)人體有用的礦物質(zhì)流逝，氯酸鹽也會(huì)阻礙甲狀腺吸收碘[3]。

茶葉作為一種大眾喜愛的傳統(tǒng)飲品，目前全國飲茶人數(shù)達(dá)到4.7億，長(zhǎng)期以來在中國飲品市場(chǎng)中占有重要地位，同時(shí)大量出口國外。2016年，全國茶園面積共計(jì) 293.33萬 hm2，全國干毛茶產(chǎn)量243萬t，產(chǎn)值近1900億元，茶葉出口總量32.5萬t，出口額13.8億美元[4]。但隨著煙花行業(yè)、工業(yè)和航空業(yè)的發(fā)展，大量的氯酸鹽和高氯酸鹽排入環(huán)境中，不易分解，并易于流動(dòng)，是一種持久性污染物，茶葉中氯酸鹽最大殘留標(biāo)準(zhǔn)目前各國尚未做規(guī)定。歐盟有關(guān)組織根據(jù)茶葉中高氯酸鹽的合理含量研究，正在就擬定茶葉中實(shí)施高氯酸鹽 0.75 mg·kg-1限量標(biāo)準(zhǔn)事宜進(jìn)行商討[5-6]，而歐洲食品安全局2015年編訂的《食品中氯酸鹽對(duì)公共健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估》指出應(yīng)按照歐盟396/2005號(hào)法規(guī)附件一中規(guī)定的沒有具體殘留標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的按照 0.01 mg·kg-1默認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。2016年農(nóng)業(yè)部對(duì)江西、安徽兩省的茶葉樣品進(jìn)行安全評(píng)估，結(jié)果顯示，高氯酸鹽平均檢出值為 0.239 mg·kg-1，其中六安市為0.341 mg·kg-1，其余都為 0.100 mg·kg-1[6]。同時(shí)我國也在進(jìn)行積極協(xié)商，目前我國茶葉中高氯酸鹽暴露性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估尚未有報(bào)道，但從水源監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示多地水源受到污染，推斷茶葉中污染狀況不容樂觀，如果該標(biāo)準(zhǔn)一旦實(shí)施，中國茶葉出口業(yè)或?qū)⒃馐苤卮鬀_擊[7-9]。目前，高氯酸鹽和氯酸鹽的檢測(cè)方法主要有分光光度法[10-11]，離子色譜法[12]，離子色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[13-14]。離子色譜法檢測(cè)飲用水中的高氯酸鹽[15]，液相色譜檢測(cè)茶葉中的高氯酸鹽[16]，離子色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法同時(shí)檢測(cè)水中、碳酸飲料中的高氯酸鹽和氯酸鹽已有報(bào)道[17-18]，但運(yùn)用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法同時(shí)檢測(cè)茶葉中的高氯酸鹽和氯酸鹽尚未見報(bào)道，相比離子色譜同時(shí)檢測(cè)高氯酸鹽和氯酸鹽，氯酸鹽檢出限有所提高，檢測(cè)時(shí)間大大縮短。

本研究利用 LC-MS/MS檢測(cè)手段，建立了同時(shí)檢測(cè)茶葉中的高氯酸鹽和氯酸鹽的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法。通過對(duì)凈化、色譜、質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，樣品前處理過程簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度高，方法可用于茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的檢測(cè)和監(jiān)控。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

LC-MS-6470型液相串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀器（美國Agilent公司），Click Xion色譜柱（2.1 mm×100 mm，5 μm，100 ?，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究院研制）；ZORBAX SB-Aq Rapid Resolution HD（2.1 mm×100 mm，1.8 μm，美國 Agilent公司）；Infinity Poroshell 120 Hilic（4.6 mm×150 mm，2.7 μm，美國 Agilent公司），OnGuard ⅡRP固相萃取小柱(500 mg，6 mL，美國Dionex公司)，ProElut CARB固相萃取柱（500 mg，6 mL，迪馬科技），ProElut C18固相萃取柱（500 mg，6 mL，迪馬科技），0.2 μL水系濾膜（美國Agilent公司）。

高氯酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：（1 000 mg·mL-1，美國Inorganic Ventures公司），氯酸鹽標(biāo)準(zhǔn)濃度：（1 000 mg·mL-1，美國 Inorganic Ventures 公司），甲醇（色譜純，德國默克股份兩合公司），甲酸（分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），甲酸銨（分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），硫酸氫鈉（分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），磷酸氫鉀（分析純，權(quán)宇化工），實(shí)驗(yàn)用水均為超純水（法國 Millipore公司超純水器制備），其他試劑及其設(shè)備。

1.2 液相色譜與質(zhì)譜條件

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Click Xion色譜柱，耐受pH 2～8；柱溫：35℃；流動(dòng)相A：水（5 mmol·L-1甲酸銨），流動(dòng)相B：甲醇和水（V甲醇∶V水=9∶1）含 5 mmol·L-1甲酸銨，流速 0.2 mL·min-1。流動(dòng)相梯度洗脫程序：0～2 min，5%A；2～6 min，5%A～60%A；6～6.5 min，60%A～5%A；6.5～8.0 min，5%A；進(jìn)樣量 10 μL。

1.2.2 質(zhì)譜條件

ESI-離子源模式，離子源溫度 250℃，電噴霧電壓：3 000 V,采集時(shí)間200 ms，高氯酸鹽碎裂電壓120 V，碰撞能量分別為：29 V、45 V，監(jiān)測(cè)離子對(duì)：m/z：83/99、67.1/99。氯酸鹽質(zhì)譜碎裂電壓50 V，碰撞能量分別25 V、41 V，監(jiān)測(cè)離子對(duì)：m/z：67.1/83，51.1/83。

1.3 樣品的前處理

稱取茶葉樣品粉末1 g于50 mL聚丙烯離心管中，加入20 mL 0.1%（V/V）乙酸水溶液，渦旋2 min，40℃提取時(shí)間為25 min。以8 000 r·min-1離心5 min，取上清液于離心管中待用，取色譜純甲醇 5 mL和去離子水 5 mL活化ProElut C18固相萃取小柱，吸取2 mL上清液過固相萃取小柱，并棄去流出液，再上樣2 mL，滴入10 mL玻璃離心管中，上機(jī)分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

試驗(yàn)選擇 ESI-離子源模式，常用離子源溫度250℃，電噴霧電壓：3 000 V,采集時(shí)間200 ms。500 ng·mL-1標(biāo)準(zhǔn)高氯酸鹽和氯酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液直接通過兩通進(jìn)入質(zhì)譜，分別給定80 V、40 V碎裂電壓對(duì)高氯酸鹽和氯酸鹽進(jìn)行全掃描，通過全掃描質(zhì)譜圖確定高氯酸鹽和氯酸鹽即目標(biāo)化合物母離子的質(zhì)荷比，質(zhì)荷比為99，質(zhì)荷比為83。小分子化合物碎裂電壓一般都在200 V以下，一般小分子化合物碰撞池加速電壓設(shè)為3 V，根據(jù)高氯酸鹽和氯酸鹽響應(yīng)手動(dòng)調(diào)節(jié)確定高氯酸鹽和氯酸鹽碎裂電壓分別為120 V、50 V。另外發(fā)現(xiàn)氯酸鹽的響應(yīng)信號(hào)低，通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH以增強(qiáng)其響應(yīng)信號(hào)，實(shí)驗(yàn)后續(xù)通過甲酸調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH 3.2增強(qiáng)了響應(yīng)信號(hào)。因碰撞能量低于碎裂電壓，采用四分法逐段調(diào)節(jié)碰撞能量，最終選擇高氯酸鹽最佳定性和定量碰撞能量分別為：29 V、45 V，氯酸鹽最佳定性和定量碰撞能量分別為：25 V、41 V。

2.2 色譜條件的優(yōu)化

2.2.1 色譜柱的選擇

試驗(yàn)比較了 Infinity Poroshell 120 Hilic,ZORBAX SB-Aq Rapid Resolution HD，Click Xion 3種色譜柱對(duì)高氯酸鹽和氯酸鹽的保留效果，流動(dòng)相采用甲醇-水。

Infinity Poroshell 120 Hilic色譜柱在工作條件下，固定相表面首先建立一個(gè)富集水的液體層，極性和親水性物質(zhì)易于溶解，待分析物在流動(dòng)相和該親水層之間分配，對(duì)分離親水性化合物有一定效果，高氯酸鹽和氯酸鹽都為極易溶于水的極性化合物。但結(jié)果顯示，高氯酸鹽和氯酸鹽在Infinity Poroshell 120 Hilic柱上0.7 min出峰，沒有保留，該色譜柱對(duì)高氯酸鹽和氯酸鹽沒有分離效果。

ZORBAX SB-Aq Rapid Resolution HD在液相色譜儀中較為常用，該柱屬親水性分離色譜柱，對(duì)有機(jī)分子和無機(jī)離子有一定分離效果，可分離大部分待分析物質(zhì)。高氯酸鹽和氯酸鹽在ZORBAX SB-Aq Rapid Resolution HD色譜柱上出峰時(shí)間為 1.2 min，對(duì)高氯酸鹽和氯酸鹽有一定的保留效果。

Click Xion色譜柱為兩性柱子，硅膠表面鍵合有半胱氨酸，電荷相反的離子平行鍵合在硅膠表面，兩性離子材料同時(shí)存在正負(fù)電荷中心，親水性好，對(duì)離子吸附分離具有顯著效果。Click Xion色譜柱出峰時(shí)間為1.5 min，對(duì)加標(biāo)相同濃度的樣品進(jìn)行前處理，Click Xion色譜柱分離后目標(biāo)物響應(yīng)最高。實(shí)驗(yàn)選擇 Click Xion色譜柱作為分析色譜柱。

2.2.2 流動(dòng)相的選擇

試驗(yàn)比較了乙腈-水，甲醇-水兩種常用流動(dòng)體系。結(jié)果表明乙腈-水做流動(dòng)相高氯酸鹽和氯酸鹽響應(yīng)較高，但乙腈-水流動(dòng)體系出峰為 0.7 min，出峰較早，且出現(xiàn)明顯分叉和拖尾現(xiàn)象，難以完成茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的分析。甲醇-水流動(dòng)相體系出峰為1.5 min，但峰型出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。為進(jìn)一步優(yōu)化分離效果，調(diào)節(jié)流動(dòng)相體系甲酸銨濃度為5 mmol·L-1，峰型得以改善，但相比乙腈作流動(dòng)相響應(yīng)有所降低，用甲酸調(diào)節(jié)流動(dòng)相 pH為 3.2，響應(yīng)有所增加。因此最終選擇流動(dòng)相 A為水（含 5 mmol·L-1甲酸銨），流動(dòng)相 B 為 V甲醇︰V水=9︰1（含 5 mmol·L-1甲酸銨），pH 3.2，出峰時(shí)間1.5 min。圖1為該方法下5 ng·mL-1高氯酸鹽與氯酸鹽標(biāo)樣MRM掃描圖。

圖1 5 ng·mL-1高氯酸鹽與氯酸鹽標(biāo)樣MRM掃描圖Fig. 1 Mass spectrum of standard solution containing 5 ng·mL-1 of perchlorate and chlorate ion

2.3 固相萃取柱的優(yōu)化

2.3.1 固相萃取柱的選擇

考慮到 ProElut C18對(duì)茶湯中的大部分有機(jī)物質(zhì)吸附能力強(qiáng)，且較為常用，決定選擇ProElut C18固相萃取柱對(duì)茶湯進(jìn)行凈化處理。ProElut CARB固相萃取柱對(duì)茶葉中的葉綠素、葉黃素、胡蘿卜素、黃酮類物質(zhì)、茶多酚等干擾物質(zhì)保留作用顯著，常作為茶葉中萃取除雜過程的吸附劑[19]。OnGuard ⅡRP固相萃取小柱對(duì)于去除茶葉提取液中的大分子和小分子物質(zhì)都有明顯吸附作用[20]。因此試驗(yàn)選擇ProElut C18固相萃取柱，ProElut CARB固相萃取柱，OnGuard ⅡRP 固相萃取小柱進(jìn)行考察。

試驗(yàn)分別用色譜純甲醇5 mL和去離子水5 mL進(jìn)行活化，用高氯酸鹽和氯酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液配制含、均為 200 ng·mL-1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別流過準(zhǔn)備好的固相萃取小柱，標(biāo)樣過柱，棄去前2 mL流出液，對(duì)其在萃取過程回收率進(jìn)行研究（表1）。

表1 3種固相萃取小柱對(duì)高氯酸鹽和氯酸鹽回收率的影響Table 1 The recoveries of perchlorate and chlorate purified by different solid phase extraction columns %

分別用 200 ng·mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì) 3種固相萃取小柱上樣，棄去前2 mL流出液，收集所得溶液與 200 ng·mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液一同上機(jī)。試驗(yàn)結(jié)果顯示 OnGuard ⅡRP、ProElut C18、ProElut CARB相比標(biāo)準(zhǔn)溶液響應(yīng)都有降低，標(biāo)準(zhǔn)液流過ProElut CARB固相萃取柱所得響應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)溶液響應(yīng)相比降低了約16%，氯酸鹽響應(yīng)降低19%，OnGuard ⅡRP固相萃取小柱響應(yīng)降低較小。同時(shí)考慮到3種固相萃取小柱的價(jià)格，ProElut C18固相萃取柱最便宜，成本低，只有ProElut CARB固相萃取柱的一半，OnGuard ⅡRP固相萃取小柱為進(jìn)口小柱，價(jià)格昂貴。綜合考慮，ProElut C18對(duì)高氯酸鹽和氯酸鹽回收率尚好，且價(jià)格較低，試驗(yàn)選用ProElut C18固相萃取柱作為凈化柱。

2.3.2 ProElut C18固相萃取柱凈化體積的優(yōu)化

選擇同種茶葉1 g，分別加標(biāo)200 ng，進(jìn)行提取。所得溶液分別通過 ProElut C18固相萃取小柱，每間隔 0.5 mL分別收集流出液，渦旋，以高氯酸鹽峰面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，流出體積為橫坐標(biāo)，繪制高氯酸鹽流過 ProElut C18固相萃取柱的洗脫曲線圖，由圖2可知，用2 mL提取液穩(wěn)定固相萃取柱后，收集2 mL進(jìn)行測(cè)定，其高氯酸鹽測(cè)定結(jié)果基本穩(wěn)定。

圖2 ProElut C18固相萃取小柱凈化后高氯酸鹽流出曲線Fig. 2 Outflow of perchlorate in tea extract by ProElut C18

2.4 樣品的線性關(guān)系、回收率和相對(duì)偏差

選擇茶葉樣品 3份，用 ProElut C18固相萃取柱進(jìn)行高氯酸鹽和氯酸鹽的方法學(xué)考察。取3種不同茶葉進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn)，分別添加 20、40、100 μg·kg-1按照前處理方法操作，每個(gè)濃度水平進(jìn)行6次平行試驗(yàn)，外標(biāo)法定量。結(jié)果如表2，3種茶葉的平均回收率在60.5%～85.8%之間，RSD在4.9%～7.7%，方法具有較好的精密度。圖 3為空白基質(zhì)、5 ng·mL-1標(biāo)準(zhǔn)混合工作液、空白白茶基質(zhì)加標(biāo)100 μg·kg-1的MRM圖。時(shí)間穩(wěn)定，空白基質(zhì)對(duì)茶葉中高氯酸鹽與氯酸鹽的測(cè)定無干擾作用。

表2 測(cè)定3種茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的平均回收率和相對(duì)偏差Table 2 Spiked recoveries and RSDs of perchlorate and chlorate in 3 kinds of tea

圖3 空白基質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)工作液、空白白茶基質(zhì)加標(biāo)的MRM圖Fig. 3 Mass spectrum of blank tea, standard solutions and blank white tea matrix labeling

前期實(shí)驗(yàn)過程中，在上機(jī)超純水及配制的乙酸提取液中檢測(cè)到微量的高氯酸鹽和氯酸鹽，根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[20-22]，不同地區(qū)地下水受到不同程度的污染，存在干擾，但根據(jù)多次試驗(yàn)最終確定污染來源于樣品瓶和試劑瓶的洗滌殘留，試驗(yàn)更換新的試驗(yàn)容器未檢出高氯酸鹽和氯酸鹽。

2.5 實(shí)驗(yàn)干擾分析

實(shí)驗(yàn)存在m/z99的磷酸氫根和硫酸氫根的同位素離子（和）的干擾，實(shí)驗(yàn)提取了 10 ng·mL-1硫酸氫鈉和磷酸氫鉀的MRM掃描圖，結(jié)果顯示磷酸氫根出峰時(shí)間為 0.8 min，硫酸氫根出峰時(shí)間2.4 min，Click Xion色譜柱實(shí)現(xiàn)、和分離，10 ng·mL-1磷酸氫鈉和硫酸氫鈉相比同濃度高氯酸鹽響應(yīng)較低，同時(shí)驗(yàn)證了在超純水中添加 10 ng·mL-1Ba(OH)2溶液，響應(yīng)未有降低，綜上分析，磷酸氫根和硫酸氫根的同位素離子未對(duì)實(shí)驗(yàn)造成干擾。

3 結(jié)論

本研究建立了同時(shí)分析茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的檢測(cè)方法，優(yōu)化了色譜條件、質(zhì)譜條件和固相萃取技術(shù)，并考察實(shí)際茶葉樣品中高氯酸鹽和氯酸鹽的檢測(cè)效果，其中部分茶葉中檢測(cè)出低含量的高氯酸鹽和氯酸鹽存在。該研究根據(jù)2.4章節(jié)測(cè)定的高氯酸鹽和氯酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線，在不含目標(biāo)化合物的陰性茶葉中添加不同濃度的高氯酸鹽和氯酸鹽混合溶液，測(cè)定后以高氯酸鹽和氯酸鹽信噪比不低于 3（S/N≥3）確定檢出限（LOD），以S/N≥10確定定量限（LOQ），確定了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定茶葉中高氯酸鹽檢出限為3 μg·kg-1，定量限為 10 μg·kg-1，氯酸鹽檢出限為 5 μg·kg-1，定量限為15 μg·kg-1。方法靈敏度高。檢測(cè)效率高、簡(jiǎn)單快捷、無拖尾現(xiàn)象、前處理過程簡(jiǎn)單，可滿足茶葉中高氯酸鹽和氯酸鹽的檢測(cè)要求。

[1]Parma. Scientific opinion on risks for public health related to the presence of chlorate in food [J]. EFSA Journal, 2015,13(6): 4135. DOI: 10.2903/j.efsa.2015.4135.

[2]Veschetti E, Cittadini B, Maresca D. Inorganic by-products in waters disinfected with chlorine dioxide [J].Microchemical Journal, 2005, 79(1): 165-170.

[3]蔡亞岐, 史亞利, 張萍, 等. 高氯酸鹽的環(huán)境污染問題[J].化學(xué)進(jìn)展, 2006, 18(11): 1554-1564.

[4]梅宇, 王智超. 2016全國茶葉產(chǎn)銷形勢(shì)分析報(bào)告[J]. 茶世界, 2016, 12(6): 40-52.

[5]Pisarenko A N, Stanford B D, Quinones O, et al. Rapid analysis of perchlorate, chlorate and bromate ions in concentrated sodium hypochlorite solutions [J]. Analytica Chimica Acta, 2010, 659(1/2): 216-223.

[6]鄧家軍, 張莉, 廖健, 等. 茶葉中高氯酸鹽健康風(fēng)險(xiǎn)研究[J]. 鄉(xiāng)村科技, 2016(36): 42.

[7]Parma. Scientific opinion on the risks to public health related to the presence of perchlorate in food, in particular fruits and vegetables [J]. EFSA Journal, 2014, 12(10): 3869.DOI:10.2903/j.efsa.2014.3869.

[8]金軍, 常瀛月. 超高效液相色譜-電噴霧離子源-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜分析飲用水中的高氯酸鹽[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào),2010, 9(29): 974-977.

[9]肖振華, 王漢青. 南京市溧水區(qū) 2013—2014年農(nóng)村生活飲用水中氯酸鹽超標(biāo)的情況分析[J]. 醫(yī)藥前沿, 2016,12(34): 94-98.

[10]MOTZER W E. Perchlorate: problem, detection, and solutions [J]. Environmental Forensics, 2001, 2: 301-311.

[11]SORIAL G A. The perchlorate dilemma in drinking water [J].Journal of Environmental Engineering, 2004(1): 1-2.

[12]BORGES R, MIGUEL E C, JANICE M R. Physiological and biochemical analysis of chlorate toxicity on rice seedlings[J]. Plant Science, 2004, 166: 1057-1062.

[13]York R G, LEWIS E, BROWN W R, et al. Refining the effects observed in a developmental neurobehavioral study of ammonium perchlorate administered orally in drinking water to rats [J]. International Journal of Toxicology,2005(24): 403-418.

[14]TING D, STEINMAUS C. Perchlorate: Human toxicity [J].Encyclopedia of Environmental Health, 2011, 45(1):364-370.

[15]錢蜀, 謝永洪, 楊坪. 離子色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定地表水中高氯酸鹽[J]. 中國環(huán)境監(jiān)測(cè), 2014, 30(3): 125-130.

[16]馮德建, 鄒燕, 史謝飛. 茶葉中高氯酸鹽的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法研究[J]. 中國測(cè)試, 2016, 42(4): 1-4.

[17]王會(huì)霞. 離子色譜法測(cè)定水中亞氯酸鹽、氯酸鹽和高氯酸鹽[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2015, 20(19): 3250-3254.

[18]高峰, 劉巖, 孔維恒. 離子色譜-質(zhì)譜測(cè)定碳酸飲料中的亞氯酸鹽、氯酸鹽和高氯酸鹽[J]. 食品科學(xué), 2013, 34(22):261-264.

[19]楊麗萍, 紀(jì)英, 赫元萍. 茶葉中除蟲菊酯農(nóng)藥殘留快速測(cè)定法[J]. 化學(xué)分析計(jì)量, 2005, 14(5): 28-40.

[20]劉小芳, 方從容, 劉慧, 等. 離子色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)茶葉中的高氯酸鹽[J]. 色譜, 2016, 10(2): 986-988.

[21]黃雨榴, 李小倩, 方玲, 等. 改進(jìn)離子色譜法測(cè)定水樣中高氯酸鹽、氯酸鹽和亞氯酸鹽[J]. 環(huán)境科學(xué)與技術(shù), 2017,40(5): 126-130.

[22]方齊樂, 陳寶梁. 新型環(huán)境污染物高氯酸鹽的環(huán)境化學(xué)行為、食品安全及健康風(fēng)險(xiǎn)[J]. 科學(xué)通報(bào), 2013, 58(26):2626-2642.

Simultaneous Determination of Perchlorate and Chlorate in Tea by Ultra-peryethylene Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry

SONG Zhenggui1, ZHANG Shufen2, ZHOU Ziyan2, ZHANG Aizhi2, SHEN Jian2*, FU Xiao2，LI Hesheng1, XING Jiali2, MAN Zhengyin2, ZHAO Chunling2, CAO Lili2

1. Ocean College of Ningbo University, NingBo 315211, China; 2. Ningbo Institute For Food Control, Ningbo 315048, China

A method using ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry was developed for the determination of perchlorate and chlorate in tea. Tea extracts were purified by ProElut C18, separated by Click Xion column. The mobile phases were 5 mmol·L-1ammonium formate/water (A) and methanol: 5 mmol·L-1ammonium formate/water =9︰1 (B). The pH was adjusted to 3.2 by formic acid and the samples were then analyzed by UPLC-MS/MS with multiple reaction monitoring mode (MRM). The method was applied to detect perchlorate and chlorate in tea. The average recovery and relative standard deviations were in the range of 60.5%-85.8% and 4.9%-7.7%,respectively. The detecting limits of perchlorate and chlorate were 3 μg·kg-1and 5 μg·kg-1, respectively. The method is simple, quick and high sensitive, which is suitable for the determination of perchlorate and chlorate in tea.

ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, tea, perchlorate, chlorate

TS272.5；O657.63

A

1000-369X(2017)06-597-08

2017-07-19

2017-10-18

浙江省食品藥品監(jiān)管系統(tǒng)科技計(jì)劃項(xiàng)目（SP201617）

宋正規(guī)，男，碩士研究生，主要從事食品安全檢測(cè)研究。*通訊作者：13805841749@163.com