李娟

221000徐州市婦幼保健院婦科

高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)在宮頸癌篩查中的價(jià)值

李娟

221000徐州市婦幼保健院婦科

目的：探討、分析高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)在宮頸癌篩查中的價(jià)值。方法：收治行膜式液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)檢測(cè)陽性的患者59例，檢測(cè)其HPV感染情況，通過病理組織活檢分析宮頸癌不同發(fā)展階段的HPV感染陽性率。結(jié)果：隨著患者TCT檢測(cè)結(jié)果的嚴(yán)重性增加，患者HPV檢測(cè)陽性率逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；隨著患者宮頸活檢結(jié)果病理分級(jí)的增高，患者HPV檢測(cè)陽性率逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：對(duì)可疑HPV感染人群進(jìn)行宮頸癌前病變及高危型HPV-DNA的篩查，對(duì)于宮頸癌的早發(fā)現(xiàn)、早預(yù)防、早治療具有重要意義。

高危型；人乳頭瘤病毒；檢測(cè)；宮頸癌；篩查

宮頸癌在我國以及全世界都是一種嚴(yán)重危害廣大女性生命健康的惡性腫瘤，也是婦科常見的惡性腫瘤之一。目前臨床上宮頸癌發(fā)病率占女性惡性腫瘤的第2位。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全球每年新發(fā)生宮頸癌的患者約50萬人，我國每年新發(fā)生宮頸癌的患者約13萬人，占其中的28.8%[1，2]。近幾年來宮頸癌在我國的發(fā)病率有逐年升高的趨勢(shì)，并具有高死亡率和低普查率的現(xiàn)狀[3]。相關(guān)研究顯示，宮頸癌的致病因素主要包括分娩次數(shù)多、性行為過度、病毒及其他微生物感染，如沙眼衣原體。其中病毒感染是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的一個(gè)主要因素。現(xiàn)已證實(shí)，高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素[4]。自19世紀(jì)70年代開始就已經(jīng)發(fā)現(xiàn)宮頸癌和HPV感染的相關(guān)關(guān)系，此后大量分子學(xué)及流行病學(xué)研究均證實(shí)了患者HPV感染和宮頸癌發(fā)生的病因?qū)W聯(lián)系[5]。Bosch等學(xué)者收集超過20個(gè)國家的宮頸癌活檢標(biāo)本用于PCR檢測(cè)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，＞99%的樣本中都檢測(cè)到HPV病毒，這是目前人類研究發(fā)現(xiàn)的導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生的因素中的最高檢測(cè)率，這一檢測(cè)結(jié)果也說明了宮頸癌與HPV感染相關(guān)的普遍性[6，7]。因此，在臨床上對(duì)可疑對(duì)象盡早進(jìn)行HPV篩查，有利于宮頸癌的早發(fā)現(xiàn)、早治療，這對(duì)于降低我國宮頸癌的發(fā)病率和死亡率具有十分重要的意義。本研究收治進(jìn)行膜式液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)檢測(cè)陽性的患者59例，并檢測(cè)59例患者的HPV感染情況，以及通過病理組織活檢分析宮頸癌不同發(fā)展階段的HPV感染陽性率，以探討高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)在宮頸癌篩查中的價(jià)值。

資料與方法

2013年1月-2017年1月收治行TCT檢測(cè)陽性患者59例，年齡31～64歲，平均(41.5±5.6)歲；首次性生活年齡21～34歲，平均(23.5±4.2)歲；孕次2～5次，平均(2.2±0.3)次；產(chǎn)次0～4次，平均(1.5±0.4)次；每周性生活次數(shù)2～5次，平均(3.5±0.3)次；腺癌+鱗癌(SCC+AC)8例，鱗狀上皮內(nèi)高度病變(HSIL)11例，鱗狀上皮內(nèi)低度病變(LSIL)15例，非典型鱗狀上皮內(nèi)病變(ASC-H)10例，非典型腺上皮細(xì)胞+非典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS+AGC)15例。本研究排除行全子宮切除、有盆腔放化療史的患者。宮頸活檢結(jié)果：正常/炎癥17例，CINⅠ級(jí)14例，CINⅡ級(jí)8例，CINⅢ級(jí)14例，宮頸癌6例。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核后批準(zhǔn)；孕產(chǎn)婦及家屬均知情同意。

方法：TCT檢測(cè)：①在患者宮頸外口處(柱狀上皮和鱗狀上皮交界處)取樣，取得的標(biāo)本立即放入液基保存液內(nèi)送往病理科；②使用診刮片在液基保存液內(nèi)攪拌數(shù)十秒后通過膜的負(fù)壓過濾法過濾樣本；③將過濾出的細(xì)胞置于d=20 mm的載玻片上；④以95%酒精固定后進(jìn)行巴氏染色，封片；⑤由病理診斷醫(yī)師在顯微鏡下進(jìn)行診斷，依據(jù)TBS系統(tǒng)給出診斷報(bào)告。依據(jù)病例報(bào)告將59例患者分陽性和陰性，陽性為非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)、LSIL、HSIL，其余結(jié)果陰性[8]。HPV檢測(cè)：使用第二代雜交捕獲技術(shù)(凱杰Digene HC2HPV DNA檢測(cè)系統(tǒng))對(duì)HPV16、 HPV18、 HPV68、 HPV59、HPV58、 HPV52、 HPV51、 HPV45、HPV39、HPV35、HPV31、HPV33 等 13種高危型人乳頭瘤病毒進(jìn)行檢測(cè)。HPV陽性標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本的相對(duì)熒光值(RLU)/陽性定標(biāo)域值(CO)比值≥1.2。宮頸活檢：在陰道鏡下取出患者宮頸內(nèi)的碘試驗(yàn)醋酸白試驗(yàn)陽性部位組織，放入標(biāo)本固定液后立即送病理科，經(jīng)過取材、固定、包埋、脫水、染色、制片等程序后經(jīng)由病理醫(yī)師給出病理診斷。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以(x±s)表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，組間比較使用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

HPV檢測(cè)結(jié)果與TCT檢測(cè)結(jié)果比較：以59例患者TCT病理診斷為標(biāo)準(zhǔn)分SCC+AC組、HSIL組。LSIL組、ASC-H組、ASCUS+AGC組。ASCUS+AGC組、ASC-H組、LSIL組、HSIL組、SCC+AC組患者HPV檢測(cè)陽性數(shù)分別為8例、6例、14例、11例、8例，HPV檢測(cè)陽性率分別為 53.3%(8/15)、60.0%(6/10)、93.3%(14/15)、100.0%(11/11)、100.0%(8/8)， 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)隨著患者TCT檢測(cè)結(jié)果的嚴(yán)重性增加，患者HPV檢測(cè)陽性率逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

HPV檢測(cè)結(jié)果與宮頸活檢結(jié)果比較：以59例患者宮頸活檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)分正常/炎癥組、CINⅠ組、CINⅡ組、CINⅢ組、宮頸癌組。正常/炎癥組、CINⅠ組、CINⅡ組、CINⅢ組、宮頸癌組患者HPV檢測(cè)陽性數(shù)分別為9例、10例、6例、12例、6例，HPV檢測(cè)陽性率分別為 52.9%(9/17)、71.4%(10/14)、75.0%(6/18)、85.7%(12/14)、100.0%(6/6)，隨著患者宮頸活檢結(jié)果病理分級(jí)的增高，患者HPV檢測(cè)陽性率逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

討 論

HPV在本質(zhì)上是一種球形DNA病毒，屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬?，F(xiàn)代研究表明，HPV可以導(dǎo)致人體皮膚黏膜鱗狀上皮發(fā)生非典型增生，并進(jìn)一步向下發(fā)展。其中高危型HPV持續(xù)感染女性陰道、宮頸部位可以逐漸誘發(fā)感染者發(fā)生宮頸癌[9]。高危型HPV進(jìn)入人體后，病毒遺傳基因就會(huì)利用人體內(nèi)環(huán)境整合到宮頸細(xì)胞的基因組中，此時(shí)若人體免疫系統(tǒng)不能及時(shí)將受整合的異常細(xì)胞清除，異常細(xì)胞便會(huì)繼續(xù)存活，像正常細(xì)胞一樣不斷發(fā)生增殖，經(jīng)過一定的潛伏期后發(fā)展成為癌前病變、宮頸癌[10]。幾乎所有的生物學(xué)資料、循證醫(yī)學(xué)、流行病學(xué)研究都表明，高危型HPV與宮頸癌密切相關(guān)，其持續(xù)性感染是宮頸癌前病變及宮頸癌發(fā)病的必要條件之一[11]。

表1 HPV檢測(cè)結(jié)果與TCT檢測(cè)結(jié)果比較

相關(guān)調(diào)查顯示，臨床上約99.7%的宮頸癌患者癌組織內(nèi)均可以檢出不同數(shù)量和類型的HPV16、HPV18、HPV68、HPV59、 HPV58、 HPV52、 HPV51、HPV45、 HPV39、 HPV35、 HPV31、HPV33等高危型HPV-DNA，且患者組織病變是從最初的正常/炎癥向CINI級(jí)、CINII級(jí)、CINIII級(jí)演化，最后發(fā)展為宮頸癌[12]。

本次研究結(jié)果顯示，ASCUS+AGC組、ASC-H組、LSIL組、HSIL組、SCC+AC組患者HPV檢測(cè)陽性數(shù)分別為8例、6例、14例、11例、8例，HPV檢測(cè)陽性率分別為53.3%(8/15)、60.0%(6/10)、 93.3%(14/15)、 100.0%(11/11)、100.0%(8/8)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。說明隨著患者TCT檢測(cè)結(jié)果的嚴(yán)重性增加，患者HPV檢測(cè)陽性率逐漸升高。在宮頸活檢方面，正常/炎癥組、CINI組、CINII組、CINIII組、宮頸癌組患者HPV檢測(cè)陽性數(shù)分別為9例、10例、6例、12例、6例，HPV檢測(cè)陽性率分別為52.9%(9/17)、71.4%(10/14)、 75.0% (6/18)、 85.7% (12/14)、100.0%(6/6)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示患者宮頸活檢結(jié)果病理分級(jí)越高，患者HPV檢測(cè)陽性率越高。由于感染高危型HPV女性由炎癥進(jìn)展到宮頸癌是一個(gè)緩慢的過程，即發(fā)病時(shí)間窗，而在這一發(fā)病時(shí)間窗內(nèi)對(duì)可疑HPV感染人群進(jìn)行宮頸癌前病變及高危型HPV-DNA的篩查，并對(duì)篩查陽性人群進(jìn)行早期觀察，對(duì)于宮頸癌的早發(fā)現(xiàn)、早預(yù)防、早治療具有重要的意義。因此，對(duì)可疑HPV感染人群進(jìn)行HPV檢測(cè)、宮頸細(xì)胞學(xué)篩查以及宮頸活檢，以發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變是醫(yī)務(wù)工作者共同努力的方向。

表2 HPV檢測(cè)結(jié)果與宮頸活檢結(jié)果比較(n)

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The value of high risk human papillomavirus detection in cervical cancer screening

Li Juan
Department of Gynaecology,Xuzhou Maternal and Child Health Care Hospital 221000

Objective:To investigate the value of high-risk human papillomavirus(HPV)test in screening cervical cancer.Methods:59 patients with positive results who were examined by membrane liquid based cytology(TCT)were selected.The HPV infection was detected and the positive rate of HPV infection in different stages of cervical cancer was analyzed by pathological biopsy.Results:The positive rate of HPV detection increased gradually with the severity of TCT test in patients,and the difference was statistically significant(P＜0.05).With the increase of pathological grading of cervical biopsy,the positive rate of HPV test gradually increased,and the difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion:Screening of cervical precancerous lesions and high-risk HPV DNA in suspected HPV infected population is of great significance for early detection,early prevention and early treatment of cervical cancer.

High risk type;HPV;Detection;Cervical cancer;Screening

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.31.60