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        氣相色譜法測定蘇籽中的a—亞麻酸

        2017-12-09 04:54:47胡穎張觀鳳蔣緯
        安徽農(nóng)學通報 2017年22期
        關鍵詞:氣相色譜法亞麻酸

        胡穎+張觀鳳+蔣緯

        摘 要: 該文采用agilent極性19091X-233 HP-1 BondedPolyethlene Glycol(30m× 0.320mm,0.25μm)色譜柱,以外標法測定蘇籽中α-亞麻酸含量。正己烷抽提蘇籽中的α-亞麻酸,測定經(jīng)氫氧化鉀-甲醇皂化甲酯化后形成的α-亞麻酸甲酯的含量,直接得出蘇籽中α-亞麻酸的含量。結(jié)果表明,α-亞麻酸甲酯標品的保留時間為22.785 min,α-亞麻酸甲酯的線性檢測范圍為0.01~10.00mg/mL,r=0.9981,方法回收率為96.1%~102.4%。

        關鍵詞:蘇籽;α-亞麻酸;α-亞麻酸甲酯;氣相色譜法

        中圖分類號 R286.0 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2017)22-0116-03

        Abstract:α-Linolenate was extracted with n-hexane from perilla seed,and methylified with 0.8 mol/L KOH-methnoal solution.Then content of α-methyl linolenate,which could be translated to the content of α-linolenate,was quantified with gas chromatographyusing agilent 19091X-233 HP-1 BondedPolyethlene Glycol(30m × 0.320mm,0.25μm).The retention time for α-methyl linolenate was 22.785 min.This method was appicable in a linear range of 0.01-10.00 mg/mL with the correlation coefficient at 0.9981 and the average recovery for α- linolenate at 96.1% ~102.4%.

        Key words:Perilla seed;a-linolenic;α-methyl linolenate;Gas chromatography

        紫蘇籽,又名蘇籽或穎子,含有豐富的脂肪和蛋白質(zhì),是迄今為止發(fā)現(xiàn)的含有α-亞麻酸最多的植物物種[1-3],油中α-亞麻酸含量占其總脂肪酸的60%左右[4]。α-亞麻酸為十八碳三烯酸,是大腦和神經(jīng)活動所必需的脂肪酸,人體自身不能合成,必須由食物供給,可在體內(nèi)酶的作用下經(jīng)肝臟的代謝生成EPA(血管清道夫)和DHA(腦黃金),具有顯著的藥理作用和營養(yǎng)價值,被稱為“21世紀綠色營養(yǎng)保健食品”[5-6]。此外,α-亞麻酸還具有抗炎癥、抗血栓、抗血凝、抗過敏、抗心率失調(diào)、降血脂、改善血管彈性、調(diào)節(jié)中央神經(jīng)系統(tǒng)等功能,在醫(yī)藥、保健品、食品等領域有著廣闊的應用前景[7]。我們?nèi)粘o嬍持凶钊狈Ρ匦柚舅崾铅?亞麻酸,我國醫(yī)學界和營養(yǎng)界專家紛紛呼吁國家立法,國家食品與營養(yǎng)發(fā)展戰(zhàn)略專家也正積極規(guī)劃,專項推廣補充α-亞麻酸[8]。

        氣象色譜法因其分離時間短和分離效果好等特點,其應用范圍也越來越廣[9]。但氣相色譜法在測定蘇籽中α-亞麻酸含量中相應方法建立的相關報道較少。本研究旨在建立蘇籽中α-亞麻酸的氣相色譜分析方法,為今后蘇籽的進一步研究提供一定的參考價值。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑 生蘇籽:市售;α-亞麻酸甲酯標準品:科研sigmal2626;正己烷(色譜純):科密歐化學試劑有限公司;甲醇(色譜純)、無水硫酸鈉(分析純):成都科龍化工試劑廠;乙醚(分析純):川東化工;氫氧化鉀(分析純):艾科試劑。

        1.2 儀器與設備 SKG1208型粉碎機:佛山艾特凱奇電氣有限公司;New Classic MS型電子天平:梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;SG8200HPT型超聲波清洗儀:上海冠特超聲儀器有限公司;RE52CS型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:上海亞榮生化儀器廠。氣象色譜儀:美國安捷倫科技有限公司。

        1.3 方法與步驟

        1.3.1 色譜條件 色譜柱:Agilent 19091X-233HP-1 BondedPolyethlene Glycol(30m×0.320mm,0.25μm)。載氣為氮氣;檢測器為氫火焰離子化檢測器(FID);進樣口溫度為250℃,檢測器溫度為270℃。氫氣:40mL/min;空氣:400mL/min;分流比:10∶1;進樣量:1μL。恒流進樣,流速:1mL/min,平均線速度:21cm/s。升溫程序:起始溫度90℃,7℃/min到190℃,3℃/min到215℃,保持10min,20℃/min到230℃后運行5min。

        1.3.2 溶液的配制 0.8mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液:電子天平稱取0.448g氫氧化鉀溶于裝有適量甲醇的燒杯中,靜置室溫后將溶液轉(zhuǎn)移到10mL的容量瓶中,用甲醇定容。

        1.3.3 標準品的配制 精確稱取α-亞麻酸甲酯標準品 100.00mg,正己烷定容,分別配制0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10.00mg/mL的α-亞麻酸甲酯標準品溶液,置于-20℃的冰箱中備用。

        1.3.4 蘇籽油脂的甲酯化 氫氧化鉀-甲醇酯化法:用移液管吸取0.1mL脂肪酸置于10mL量瓶中,依次加入1mL乙醚-正己烷混合溶液(乙醚∶正己烷=2∶1)和1mL氫氧化鉀(0.8mol/L)-甲醇溶液,充分振蕩,靜置5min后加蒸餾水至刻度,靜置分層,吸上清液,加入少量無水硫酸鈉干燥過夜后,進行上機檢測。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 色譜的定性與分離 采用1.3.1節(jié)的色譜柱和色譜條件,對蘇籽中的α-亞麻酸有很好的分離效果。采用保留時間對照法確定α-亞麻酸甲酯的位置。由圖1可見,α-亞麻酸甲酯標準品的保留時間為22.785min,具有良好對稱峰型。endprint

        2.2 線性范圍 分別將0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10.0mg/mL的α-亞麻酸甲酯標準品溶液,按上述試驗條件進樣,檢測結(jié)果見表1,標準曲線見圖2所示。由表1可知,在α-亞麻酸甲酯在0.01~10.00mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi),色譜峰面積與質(zhì)量濃度呈良好的線性關系。由圖2可知,α-亞麻酸甲酯在質(zhì)量濃度為0.01~10.00mg/mL時,r=0.9981,相關性良好。

        2.3 精密度 樣品經(jīng)6次連續(xù)進樣測得的結(jié)果分別為 150.4、143.4、144.6、142.5、145.7、145.8mg/g,RSD(相對標準偏差)為2.39%,說明儀器精密度良好。

        2.4 加標回收率 分別加入質(zhì)量濃度為10.00mg/mL的α-亞麻酸甲酯0.1、0.5、1mL于1g蘇籽樣品(α-亞麻酸含量為15.16mg/g)中,按超聲波輔助提取油脂再進行甲酯化處理,最后得到添加質(zhì)量濃度分別為0.10、0.50、1.00 mg/mL的待測樣品,回收率見表2。由表2可知,加標回收率為96.1%~102.4%,回收率平均值為100.1%。說明該法測定蘇籽α-亞麻酸含量準確度較高,方法可行。

        3 結(jié)論

        采用氣相色譜外標法測定蘇籽油中α-亞麻酸含量,α-亞麻酸甲酯的線性檢測范圍為0.01~10.00mg/mL,r=0.9981,方法平均回收率為100.1%。該法快速、準確、可行,適用于蘇籽α-亞麻酸含量的測定。

        蘇籽油中a-亞麻酸含量測定中,各種測定方法之間進行比較的研究較少,尋找準確、簡單、低價、快速測定的方法測定蘇籽內(nèi)a-亞麻酸含量對蘇籽的開發(fā)利用具有一定的意義。氣相色譜法具有分離時間短、分離性好、操作簡單實用、檢測快速準確、成本低且可行性高等特點,適用于蘇籽中α-亞麻酸含量的測定。

        參考文獻

        [1]李峰,徐小洲,付金元,等.紫蘇的化學成分及應用價值[J].中國食品工業(yè),2015(3):70.

        [2]秋西.紫蘇東方香草的故事[J].植物,2016,2(03):80-84.

        [3]宋明明,姜麗,于大永,等.α-亞麻酸植物資源的篩選[J].農(nóng)業(yè)機械,2012(15):40-42.

        [4]胡曉丹,張德權,杜為民,等.紫蘇提取物對紫蘇油抗氧化作用的研究[J].食品工業(yè)科技,2007,08(28):118-120.

        [5]李麗萍,韓濤.富含α-亞麻酸植物資源的開發(fā)與利用[J].食品科學,2007,28(11):614-618.

        [6]劉峰,王正武,王仲妮.α-亞麻酸的分離技術及功能[J].食品與藥品,2007,9(8):60-63.

        [7]繼成.α-亞麻酸,綠色保健食品[J].中國制藥信息,2006,22(10):14-17.

        [8]汪海濤,薄華本,陳業(yè)誠,等.GC法同時測定火麻仁油中油酸、亞油酸和α-亞麻酸的含量[J].廣東化工,2016,43(7):177-179.

        [9]岳巧云,張靜,劉恭源,等.氣相色譜法測定干果中的α-亞麻酸[J].食品科學.2009,30(24):359-361.

        [10]王鴻梅,氣象色譜內(nèi)標法測定蘇籽油中α-亞麻酸的含量[J].華夏醫(yī)藥,2002:20-21. (責編:張宏民)endprint

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