林翠波，林 安，何海新，李 玲

(福建省腫瘤醫(yī)院婦科，福建 福州 350014)

抑癌基因P16和FHIT在宮頸病變組織中的表達及意義

林翠波，林 安，何海新，李 玲

(福建省腫瘤醫(yī)院婦科，福建 福州 350014)

目的探究抑癌基因P16、脆性組氨酸三聯體(FHIT)在宮頸病變組織中的表達及意義。方法選取福建省腫瘤醫(yī)院自2015年5月至2017年5月收治的40名宮頸癌患者作為宮頸癌組，另選擇同時期收治的40名宮頸上皮內瘤病變(CIN)患者和40名健康成年人分別作為CIN組、對照組，采用免疫組化的方法對三組人員的抑癌基因P16、FHIT的表達水平進行測量。結果宮頸癌組與CIN組、對照組比較，抑癌基因P16、FHIT的陽性率均較低，CIN組與對照組比較抑癌基因P16、FHIT的陽性率均較低，差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=5.36～6.12，均Plt;0.05)。宮頸癌組織中臨床分期Ⅰ期P16陽性率明顯高于Ⅱ期、Ⅲ期，Ⅱ期P16陽性率明顯高于Ⅲ期，病理分級中高分化的P16陽性率明顯高于中分化、低分化，中分化P16陽性率明顯高于低分化，宮頸癌組織中無淋巴結轉移的P16陽性率、FHIT陽性率明顯高于有淋巴結轉移的組織，差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=5.23～5.36，均Plt;0.05)。結論抑癌基因P16、FHIT的表達水平與宮頸病變的進展有一定的關系，同時可能與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關。

抑癌基因P16；脆性組氨酸三聯體；表達；宮頸癌變

宮頸癌作為臨床上一類發(fā)病率較高的女性生殖道惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于乳腺癌，對女性患者的生命健康造成了較大的威脅，因此，對于該病發(fā)病原因及作用機制進行有效的探討至關重要[1]。盡管宮頸癌的發(fā)生發(fā)展存在基因改變的復發(fā)性及多因素性，但其中也存在細胞增殖及細胞凋亡調控等因素的作用。有研究報道指出，抑癌基因功能的喪失與表達均會導致宮頸組織發(fā)生一系列的病理性改變，引起細胞的異常增殖與表達，最終引起宮頸癌組織的病變[2]?，F針對福建省腫瘤醫(yī)院收治的宮頸癌患者、宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)患者及健康成年人宮頸組織中抑癌基因P16(p16 gene)、脆性組氨酸三聯體(fragile histidine traid,FHIT)的表達水平進行研究，結果總結報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取福建省腫瘤醫(yī)院自2015年5月至2017年5月收治的40名宮頸癌患者作為宮頸癌組，另選擇同時期收治的40名CIN患者和40名健康成年人分別作為CIN組、對照組。宮頸癌組年齡為45～58歲，平均年齡為(52.36±2.78)歲；CIN組年齡為47～60歲，平均年齡為(53.29±2.45)歲；對照組年齡為49～60歲，平均年齡為(53.78±2.95)歲。三組一般資料比較無明顯差異(均Pgt;0.05)，具有可比性。全部研究對象均簽署了關于本次研究的知情權同意書，試驗符合醫(yī)學倫理學審查。

1.2方法

收集上述三組患者的宮頸組織標本，宮頸癌組織標本收集于手術切除過程用于病理檢查的宮頸組織，CIN及正常宮頸組織是行子宮肌瘤子宮全切除術獲得。所有宮頸組織予以10%的福爾馬林溶液固定，石蠟包埋后，切片厚度約為4μm，采用免疫組化的方法對三組研究對象的抑癌基因P16、FHIT的表達水平進行測量，選擇的試劑包括兔抗人FHIT多克隆抗體、鼠抗人單克隆P16抗體，采用PBS作為陰性對照，試劑均購自福州邁新公司。免疫組化的方法嚴格按照試劑盒說明書進行。宮頸癌的臨床分期標準參考國際婦產科聯盟(FIGO)(2009年)宮頸癌分期[3]：Ⅰ期，腫瘤僅局限在宮頸部位，尚未考慮向宮體方面侵犯；Ⅱ期，宮頸癌的侵犯已經超出了子宮的范圍，但仍未累及骨盆壁或陰道下方1/3的部位；Ⅲ期，腫瘤已經對盆腔壁造成侵犯，行直腸檢查可見宮頸腫瘤與盆腔壁之間未存在間隙，或腫瘤已經累及陰道的1/3以下部位。根據取得宮頸癌組織標本后在顯微鏡下對細胞的形態(tài)進行分類，宮頸癌的病理分級包括高分化、中分化及低分化三類。

1.3結果判斷標準

在光鏡下隨機選擇5個完整且不重疊的高倍視野進行觀察，共500個細胞，觀察并判斷是否著色：0分，切片中無陽性細胞或僅有5%以下的細胞著色；1分，切片中有5%～50%的細胞呈現炎性表達；2分，可見至少50%的細胞呈現陽性的表達，見圖1。將≥1分判斷為陽性標準。

圖1 P16、FHIT細胞漿染色陽性(免疫組化ABC×100)

Fig.1 P16 and FHIT cell pulp staining was positive (immunohistochemistry ABC×100)

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計學處理及分析，計數資料比較采用χ2檢驗，計量資料比較采用t檢驗，Plt;0.05為有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1抑癌基因P16和FHIT在不同宮頸組織中的表達

與CIN組、對照組比較，宮頸癌組抑癌基因P16、FHIT陽性率均較低，CIN組較對照組抑癌基因P16、FHIT陽性率低，差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=5.36～6.12，均Plt;0.05)，見表1。

表1 抑癌基因P16、FHIT在不同宮頸組織中的表達[n(%)]

2.2抑癌基因P16、FHIT在宮頸癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系

宮頸癌組織中臨床分期Ⅰ期P16陽性率明顯高于Ⅱ期、Ⅲ期，Ⅱ期P16陽性率明顯高于Ⅲ期，病理分級中高分化的P16陽性率明顯高于中分化、低分化，中分化P16陽性率明顯高于低分化，宮頸癌組織中無淋巴結轉移的P16陽性率、FHIT陽性率明顯高于有淋巴結轉移的組織，差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=5.23～5.36，均Plt;0.05)。宮頸癌組織中不同臨床分期、病理分級中FHIT陽性率相比無明顯差異(Pgt;0.05)，見表2。

表2 抑癌基因P16、FHIT在宮頸癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系[n(%)]

3討論

3.1 FHIT基因在宮頸癌中的作用機制

FHIT基因是近年來在臨床工作中發(fā)現的一類新型候選抑癌基因，其作用機制為通過其編碼的蛋白質參與細胞周期的調節(jié)過程。有研究報道指出，FHIT蛋白在良性的上皮細胞組織中具有較高的表達水平，但當其水平降低時，即表現出失活的情況時，惡性上皮腫瘤的發(fā)生率則會同時明顯升高，最終引起腫瘤的發(fā)生發(fā)展[4]。另有資料顯示，在絕大多數的惡性腫瘤組織及細胞中能夠發(fā)現FHIT基因的高頻率缺失及異常表達的情況[5]。本次研究結果顯示，宮頸癌組與CIN組、對照組分別相比抑癌基因FHIT的陽性率均較低，CIN組與對照組相比FHIT的陽性率均較低，宮頸癌組織中無淋巴結轉移者FHIT陽性率明顯高于有淋巴結轉移的組織，差異具有統(tǒng)計學意義(Plt;0.05)。但宮頸癌組織中不同臨床分期、病理分級的FHIT陽性率相比無明顯差異(Pgt;0.05)。結果提示，抑癌基因FHIT可能參與了宮頸癌變，且雖然其在宮頸癌的不同臨床分期及病理分級之間無明顯差異，但與淋巴結的轉移相關，認為抑癌基因FHIT可作為預測及判斷宮頸癌發(fā)生及轉移的可靠指標[6]。

3.2 P16基因在宮頸癌中的作用機制

通常情況下，哺乳動物細胞周期調控過程中的G1～S期之間的調控點可作為細胞增殖等一系列變化的調控關鍵點，一旦該調控點發(fā)生異常的改變，則可能引起腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[7]。尤其是有P16所參與的調控途徑，一旦發(fā)生改變，例如出現P16失活或異常等情況，則可能導致細胞無法正常增殖而出現失控，另外，伴隨發(fā)生錯誤的細胞周期進展紊亂的情況，這就在一定程度上增加了細胞癌變的發(fā)生可能，引起腫瘤細胞的發(fā)生與發(fā)展[8-9]。結合本次研究結果，宮頸癌組與CIN組、對照組分別相比抑癌基因P16陽性率均較低，CIN組與對照組相比抑癌基因P16陽性率均較低，宮頸癌組織中臨床分期Ⅰ期P16陽性率明顯高于Ⅱ期、Ⅲ期，Ⅱ期P16陽性率明顯高于Ⅲ期，病理分級中高分化的P16陽性率明顯高于中分化、低分化，中分化P16陽性率明顯高于低分化，宮頸癌組織中無淋巴結轉移者16陽性率明顯高于有淋巴結轉移的組織，差異具有統(tǒng)計學意義(Plt;0.05)。提示P16與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展存在一定的關系，當P16表達降低或缺失時能夠加重病情，證實了P16的表達對腫瘤細胞的分化及轉移起到了調控的作用，需引起臨床工作者的重視[10-11]。

綜上所述，抑癌基因P16、FHIT的表達水平與宮頸病變的進展有一定的關系，同時可能與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關，但由于本次研究樣本量有限，在收集數據方面可能存在缺陷，通過進一步深入分析可獲得精確的結論。

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[專業(yè)責任編輯：安瑞芳]

ExpressionsoftumorsuppressorgeneP16andFHITincervicallesionsandtheirsignificance

LIN Cui-bo, LIN An, HE Hai-xin, LI Ling

(DepartmentofGynecology,FujianTumorHospital,FujianFuzhou350014,China)

ObjectiveTo explore the expressions of tumor suppressor gene P16 and fragile histidine triad (FHIT) in cervical lesions and their significance.MethodsForty patients with cervical cancer admitted in Fujian Tumor Hospital from May 2015 to May 2017 were selected in cervical cancer group, and at the same period 40 patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN) were selected in CIN group and 40 healthy adults in control group. Expression levels of tumor suppressor gene P16 and FHIT in three groups were measured by using immunohistochemical method.ResultsPositive rate of tumor suppressor gene P16 and FHIT in cervical cancer group was lower than that in CIN group and the control group, and that in CIN group was lower than that in the control group with significant differences (χ2value ranged 5.36-6.12, allPlt;0.05). Positive rate of P16 in cervical cancer tissue in stage Ⅰ was significantly higher than that in stage Ⅱ and Ⅲ, and that in stage Ⅱ was much higher than that in stage Ⅲ. Positive rate of P16 in well differentiated cervical cancer tissue was obviously higher than that in moderately and poorly differentiated cancer tissues, and that in moderately differentiated cancer tissue was significantly higher than in poorly differentiated cancer tissue. Positive rate of P16 and FHIT in cervical cancer tissue without lymph node metastasis was much higher than that in cancer tissue with lymph node metastasis. All differences had statistical significance (χ2value ranged 5.23-5.36, allPlt;0.05).ConclusionExpression levels of tumor suppressor gene P16 and FHIT are associated with progress of cervical lesions, and they may be related to occurrence and development of cervical cancer.

tumor suppressor gene P16; fragile histidine triad (FHIT); expression; cervical cancer

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.11.015

R737.3

A

1673-5293(2017)11-1362-02

2017-07-10

林翠波(1979—)，女，主治醫(yī)師，主要從事婦科臨床醫(yī)療工作。

李 玲，副主任醫(yī)師。