諸葛雪朋,孟慶江,王保收

(河南省開封市中心醫(yī)院心胸外科 475000)

食管癌組織MTA1蛋白表達與患者臨床病理特征及3年生存率的關系

諸葛雪朋,孟慶江,王保收

(河南省開封市中心醫(yī)院心胸外科 475000)

食管腫瘤；腫瘤轉(zhuǎn)移相關蛋白；臨床病理特征、生存率

食管癌是臨床上較為常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，不健康的飲食習慣、遺傳易感因素等均可促進食管癌的發(fā)生、發(fā)展。相關研究表明，我國現(xiàn)階段的食管癌的發(fā)生率可達0.05%以上，且近年來呈現(xiàn)出了上升的趨勢[1-2]。對于食管癌發(fā)病機制過程的研究可為食管癌患者的早期診斷及臨床遠期預后提供參考。腫瘤生物學分子在調(diào)控腫瘤細胞增殖、分化和侵襲的過程中發(fā)揮了重要的作用，腫瘤轉(zhuǎn)移相關蛋白1(MTA1)是近年來發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關分子，可以通過影響上皮細胞的染色體復制和組蛋白的乙?；?，進而促進腫瘤細胞增殖、誘導細胞不良分化[3-4]。已有研究探討了MTA1在卵巢癌、乳腺癌等惡性腫瘤中的異常表達，認為MTA1與患者的遠期預后具有密切的關系[5-6]，但在食管癌中的研究不足。本研究通過選取在本院病理科收集的食管癌標本，探討了MTA1的表達及其與患者臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2010年1月至2012年12月本院病理科收集的96例食管癌患者術(shù)后病理標本、癌旁組織標本40例進行研究。食管癌組織96例，其中男57例，女39例，年齡46～79歲，平均(62.3±11.7)歲；腫瘤部位：上段15例，中段50例，下段31例，鱗癌82例，非鱗癌14例；分化程度：高分化26例，中分化40例，低分化30例；國際抗癌聯(lián)盟(UICC)TNM分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期32例，Ⅲ期39例。癌旁組織40例，男24例，女16例，年齡43～73歲，平均(60.1±12.9)歲。兩組患者年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入、排除標準

1.2.1納入標準 (1)食管癌組織標本、癌旁組織組織標本均來源于本院心胸外科手術(shù)切術(shù)后組織標本；(2)患者年齡小于80歲；(3)癌旁組織標本為距離癌組織大于5 cm以上的組織；(4)所有患者術(shù)前未接受放化療或者免疫治療；(5)患者愿意接受術(shù)后隨訪，各類資料完整。

1.2.2排除標準 (1)未經(jīng)病理學證實的患者；(2)轉(zhuǎn)移性食管癌患者；(3)術(shù)前已經(jīng)接受放化療、免疫治療的患者；(4)合并其他部位腫瘤疾病的患者。

1.3免疫組織化學 采用石蠟切片脫蠟至水，切片厚度3 mm，3%H2O2室溫孵育 5 min，采用去離子水沖洗3次，每次3 min，采用濃度為10%牛奶蛋白(1 g蛋白加入100 mL純水)封閉，室溫孵育 5 min，加入MTA1抗體(鼠來源，南京碧云天生物科技有限公司)，37 ℃孵育2 h，PBS沖洗3次，每次5 min，滴加HRP標記的二抗(兔來源，購自羅氏公司)，37 ℃孵育 30 min，PBS 沖洗3次，每次5 min，加入NBT/BCIP色劑顯色5 min，復染，脫水，透明，封片，鏡下觀察。Olipics電子顯微鏡購自上海精密儀器有限公司，配套試劑購自南京泰康生物科技有限公司。

1.4免疫組織化學判斷標準 免疫組織化學結(jié)果判斷采取著色強度、陽性著色細胞比例進行綜合考量，在400倍的高倍顯微鏡下進行觀察。著色強度：著色較弱，與背景色相近為0分；著色較淺，淡黃色為1分；著色較深，深黃色2分；著色呈褐色為3分；陽性著色細胞比例：<10%計為0分；10%～49%計為1分，50%～74%計為2分，>74%計為3分。著色強度計分+陽性著色細胞計分為總分，總分小于2分為陰性，≥2分為陽性。

1.5隨訪情況 本研究主要通過電話隨訪或患者到本院門診接受隨診檢查，隨訪時間間隔為3個月1次，共計失訪10例患者，隨訪率為89.58%。

2 結(jié) 果

2.1MTA1蛋白質(zhì)食管癌、癌旁組織中的表達 食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達率(73.96%)顯著高于癌旁組織(2.50%)(P<0.05)，見表1。

表1 MTA1蛋白質(zhì)食管癌、癌旁組織中的表達[n(%)]

2.2MTA1蛋白表達與食管癌患者的臨床病理特征的關系 食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達主要與患者的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著的相關性(P<0.05)，見表2。

表2 MTA1蛋白表達與食管癌患者的臨床病理特征的關系[n(%)]

續(xù)表2 MTA1蛋白表達與食管癌患者的臨床病理特征的關系[n(%)]

2.3MTA1蛋白表達與食管癌患者的遠期生存的關系 食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達患者的3年生存率(33.80%)顯著低于陰性患者的60.00%(P<0.05)，見表3。

表3 MTA1蛋白表達與食管癌患者的遠期生存的關系[n(%)]

2.4影響食管癌患者的遠期生存的多因素分析 采用非條件Logistic回歸進行分析，以患者3年預后情況作為因變量，以結(jié)果2.2中有統(tǒng)計學意義的因素作為自變量，結(jié)果顯示食管癌患者的遠期生存率與TNM分期、MTA1蛋白表達具有顯著的關系(OR=1.638、1.433，P<0.05)，見表4。

表4 影響食管癌患者的遠期生存的多因素分析

-：無數(shù)據(jù)

3 討 論

食管癌的發(fā)病病因較為復雜，各種因素導致的食管鱗狀上皮持續(xù)性病變，均可以促進食管癌的發(fā)生。在全世界范圍內(nèi)，食管癌屬于高發(fā)病率、高病死率的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，我國每年約有20萬人死于食管癌[7-8]。由于食管癌的早期診斷水平較低，多數(shù)患者臨床確診時已處于中晚期，且多數(shù)已具有明顯的淋巴結(jié)或者遠處轉(zhuǎn)移。研究顯示，食管癌的5年生存率不足45%，中位生存時間不足32個月，且病死率較高，可達25%以上，臨床遠期預后較差[2,9]。而對于食管癌發(fā)生過程中基礎機制的研究，可以為食管癌的綜合性治療提供新的生物學靶向治療靶點，且可以為患者的遠期預后提供生存評估指標。

MTA1蛋白具有長鏈的糖蛋白結(jié)構(gòu)，其氨基酸序列中含有多個重復的脯氨酸及亮氨酸區(qū)域，羧基末端含有多個鋅指結(jié)構(gòu)和亮氨酸拉鏈，可以通過結(jié)合細胞核內(nèi)的糖蛋白配體，或者通過鋅指結(jié)構(gòu)影響到染色體的復制和分離，進而影響細胞增殖和分化[10-11]。MTA1蛋白可以上調(diào)轉(zhuǎn)錄翻譯基因cyc的活性，促進腫瘤細胞快速跨越周期G0期，并能夠與細胞凋亡蛋白BAX的轉(zhuǎn)錄上游啟動子配體的結(jié)合，抑制BAX的翻譯和表達，抑制細胞凋亡，促進上皮細胞持續(xù)性的增殖[12-13]。有研究探討了MTA1蛋白在卵巢癌等中的異常表達，發(fā)現(xiàn)MTA1蛋白與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及組織學分化程度等密切相關，而本研究在探討MTA1蛋白與食管癌患者臨床病理特征關系的同時，探討了其與患者遠期臨床預后的關系，此為本研究的創(chuàng)新性所在。

MTA1蛋白在食管癌標本中的表達陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，表明MTA1蛋白在食管癌的發(fā)生、發(fā)展過程中可能發(fā)揮了重要的促進作用，另外也說明臨床上通過檢測MTA1蛋白表達，可能具有一定的早期診斷或者臨床預后評價作用。MTA1可以通過影響染色體分離過程中紡錘體的形成和分離，促進食管癌腫瘤細胞跨越G0/S期的速度，促進細胞增殖。文獻[14-15]通過回顧性分析了53例食管癌患者的臨床資料，發(fā)現(xiàn)MTA1蛋白在食管臨床分期為Ⅲ期或者Ⅳ期患者中的陽性表達率可達75%以上，明顯高于癌旁組織，這與本次研究的結(jié)論較為相似。對于MTA1與食管癌患者臨床病理特征關系的研究發(fā)現(xiàn)，MTA1與患者的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有密切的關系，MTA1可以誘導淋巴管內(nèi)皮細胞的分化促進淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，并可促進食管癌對于臨近器官或者組織的浸潤，促進病變的進展，加劇TNM分期。但本研究并未發(fā)現(xiàn)MTA1與細胞分化程度、腫瘤細胞來源及病灶大小等的關系，這與Toh等[15]研究者的結(jié)論不完全一致，Toh等[15]認為MTA1與食管癌患者的細胞分化程度具有一定的關系，考慮樣本量的差異、細胞低分化患者的比例及免疫組織化學檢測方式的差異，均可能影響統(tǒng)計結(jié)果的差別。食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達患者3年生存率較低，遠期生存指標較差，提示MAT1可以作為評估食管癌患者遠期生存預后的重要參考。相關關系分析也可以發(fā)現(xiàn)，TNM分期、MTA1蛋白陽性率等是影響食管癌患者遠期生存的重要指標，臨床上對于MTA1蛋白陽性表達、TNM分期較晚的患者，應加強預后隨訪，采取綜合性的治療措施，進而改善預后。

綜上所述，MTA1蛋白在食管癌患者中存在明顯的異常陽性表達，且與患者的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關，臨床上通過檢測MTA1蛋白的表達可以評估患者的遠期生存率，但相關研究結(jié)論仍然需要大樣本量、多中心的分析研究證實。

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RelationshipbetweenMTA1proteinexpressioninesophagealcancertissuewithclinicopathologicalfeaturesand3-yearsurvivalrate

ZhugeXuepeng,MengQingjiang,WangBaoshou

(DepartmentofThoracicSurgery,KaifengMunicipalCentralHospital,Kaifeng,Henan475000,China)

esophageal neoplasms;tumor metastasis-associated protein;clinicopathological features,survival rate

目的探討食管癌組織中腫瘤轉(zhuǎn)移相關蛋白1(MTA1)的表達與臨床病理特征、3年生存率的關系。方法選取2010年1月至2012年12月該院病理科收集的96例食管癌患者術(shù)后病理標本、符合納入標準的癌旁組織標本40例采用免疫組織化學染色，分析MTA1蛋白表達與患者臨床病理特征及遠期生存率的關系。結(jié)果食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達率(73.96%)顯著高于癌旁組織的2.50%(P<0.05)；食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達主要與患者的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著的相關性(P<0.05)；食管癌組織中MTA1蛋白陽性表達患者的3年生存率(33.80%)顯著低于陰性患者(60.00%)(P<0.05)；食管癌患者的遠期生存率與TNM分期、MTA1蛋白表達具有顯著的關系(OR=1.638、1.433，P<0.05)。結(jié)論食管癌組織中MTA1蛋白高表達，并且與患者的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關，MTA1蛋白高表達是食管癌患者預后的獨立危險因素。

R735.1

A

1671-8348(2017)31-4378-03

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.31.020

諸葛雪朋(1983-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事普胸、心臟及血管外科工作。

ObjectiveTo investigate the expression of tumor metastasis associated protein 1 (MTA1) in esophageal cancer tissue and its relationship with clinicopathological features and 3-year survival rate.MethodsNinety-six postoperative pathological samples of esophageal cancer and 40 samples of paracancerous tissue conforming to the inclusion standard collected by the pathological department of this hospital from January 2010 to December 2012 were selected and performed the immunohistochemical staining.Then the relationship between MTA1 protein expression with the clinicopathological features and long term survival rate was analyzed.ResultsThe MTA1 protein expression rate in the esophageal cancer tissues was 73.96%,which was significantly higher than 2.50% in paracancerous tissues (P<0.05);esophageal cancer tissues MTA1 protein expression mainly had significant correlation with TNM stage and lymph node metastasis(P<0.05);the 3-year survival rate in the patients with esophageal cancer tissue MTA1 protein positive expression was 33.80%,which was significantly lower than 60.00% in the patients with MTA1 protein negative expression (P<0.05);the long-term survival rate in the patients with esophageal cancer had significant relationship with TNM staging and MTA1 protein expression (OR=1.638,OR=1.433,P<0.05).ConclusionMTA1 protein is highly expressed in esophageal cancer tissue,and has the relationship with TNM stage and lymph node metastasis,MTA1 protein high expression is an independent risk factor for the prognosis in the patients with esophageal cancer.

2017-04-14

2017-07-02)