梁軍 孫凌云
間充質(zhì)干細(xì)胞治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基礎(chǔ)和臨床研究
梁軍 孫凌云
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種常見的累及多臟器包括心血管系統(tǒng)、關(guān)節(jié)和腎臟的自身免疫性疾病。其中,狼瘡性腎炎是影響SLE患者預(yù)后的重要因素。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種來源廣泛的干細(xì)胞,具有多向分化功能和免疫調(diào)節(jié)功能。本課題組前期已從動物實驗、臨床試驗等多方面對MSC移植進(jìn)行了研究,已初步證實了MSC移植治療SLE的有效性和安全性,并部分闡明了其相應(yīng)的機制。
間充質(zhì)干細(xì)胞 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 移植
孫凌云,主任醫(yī)師,博士,教授,博士研究生導(dǎo)師。1998年孫凌云教授帶領(lǐng)課題組在亞洲率先開展造血干細(xì)胞移植治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)。2007年率先在國際上開展了異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)移植治療SLE,之后又用異體骨髓或臍帶MSC移植治療其他自身免疫性疾病,已完成820例。首創(chuàng)非清髓性化療治療難治性狼瘡性腎炎安全有效;首創(chuàng)血漿置換聯(lián)合MSC移植治療難治性系統(tǒng)性硬化取得較好療效;多中心研究證實MSC移植可作為狼瘡性腎炎誘導(dǎo)緩解的新方案。發(fā)表SCI論文120篇,主編、副主編專著6部,參編12部。獲國家發(fā)明專利3項、教育部高等學(xué)??萍吉劧泉?、江蘇省科技進(jìn)步一等獎,中華醫(yī)學(xué)科技獎二等獎等獎項共17項。承擔(dān)國家自然基金6項,其他省市科研項目等共27項。獲國家衛(wèi)計委和江蘇省衛(wèi)計委有突出貢獻(xiàn)中青年專家、全國衛(wèi)生系統(tǒng)先進(jìn)工作者、江蘇衛(wèi)生領(lǐng)軍人才、十二五江蘇省優(yōu)秀科技工作者、江蘇省醫(yī)學(xué)杰出人才、江蘇省中青年首席科學(xué)家,南京市十大科技之星、南京市科技功臣等稱號,2002年享受國務(wù)院津貼。
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種異質(zhì)性的慢性自身免疫性疾病,血清中出現(xiàn)以抗核抗體(ANA)為代表的多種自身抗體和多系統(tǒng)受累是SLE的兩個主要臨床特征。Lisnevskaia等[1]認(rèn)為遺傳易感性與外界因素如藥物、紫外線、感染、壓力等共同參與了SLE發(fā)病。盡管影響因素不同,但基本和最終的途徑是大量免疫細(xì)胞(包括T細(xì)胞、B細(xì)胞和單核細(xì)胞系)的畸變,導(dǎo)致T細(xì)胞缺陷、多克隆B細(xì)胞活化、產(chǎn)生自身抗體和免疫復(fù)合物的形成[2]。
SLE通??赏ㄟ^糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑來控制。美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)方案和Euro-Lupus方案都認(rèn)為糖皮質(zhì)激素聯(lián)合環(huán)磷酰胺(CYC)或霉酚酸酯(MMF)具有良好的療效和耐受性,可以作為一線方案來誘導(dǎo)狼瘡性腎炎的緩解[3-5]。近年來,生物靶向治療也日益成為SLE的一種治療方向,如抑制B細(xì)胞的抗CD20單抗、抗BLys/BAFF單抗,抑制T細(xì)胞活化并阻斷T-B細(xì)胞間相互作用的抗CD40L單抗、CTLA4Ig,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的TNF-α。盡管這些治療方法明顯改善了SLE的臨床癥狀,降低了病死率,但仍有部分難治性病例對治療無應(yīng)答。
自體/異體造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)用于難治性SLE患者的目的是破壞原來的異常免疫系統(tǒng),重建健康的免疫系統(tǒng),從根本上治療SLE。1997年,意大利首次使用自體HSCT來治療SLE[6]。接下來的20年,許多Ⅰ/Ⅱ期前瞻性和回顧性研究證實了HSCT的有效性[7]。歐洲血液與骨髓移植組數(shù)據(jù)顯示,難治性SLE患者5年總生存率為(81±8)%,無病生存率為(29±9)%,非復(fù)發(fā)病死率為(15±7)%[8]。然而,HSCT疾病復(fù)發(fā)率高、預(yù)處理可造成嚴(yán)重不良反應(yīng)、移植物抗宿主病發(fā)生率高等高風(fēng)險,限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用[9-10]。因此迫切需要尋找一種更有效、更低毒的治療方案為難治性SLE患者帶來福音。
間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)最早由Friedenstein報道,并定義為構(gòu)成骨髓微環(huán)境的一種具有黏附性的、成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞群。骨髓是MSC的主要來源,其他組織包括脂肪、臍血、臍帶、胎盤、肺等也能分離獲得MSC。MSC具有易純化、體外擴增迅速、可長期傳代的特點。MSC沒有特異性的表面標(biāo)志物,其高表達(dá)多種細(xì)胞表面抗原,如CD73、CD90、CD105等及多種整合素和黏附分子,不表達(dá)CD14、CD34、CD45。MSC具有多向分化潛能,在特定的誘導(dǎo)條件下,它不僅能分化為脂肪、骨和軟骨等中胚層組織細(xì)胞,而且能夠分化為其他胚層組織細(xì)胞,包括神經(jīng)細(xì)胞及皮膚、肺、肝、腸等上皮細(xì)胞。MSC可分泌多種細(xì)胞因子,如巨噬細(xì)胞集落刺激因子、IL-6和血管內(nèi)皮生長因子等,參與造血調(diào)控、促血管生成及免疫調(diào)控等多種作用。鑒于這些優(yōu)點和它極低的免疫原性,MSC已經(jīng)被認(rèn)為是一種理想的細(xì)胞治療、組織工程和基因治療的新型靶細(xì)胞。2004年,Le Blanc等[11]報道了首例異基因MSC移植成功治療類固醇治療無效的嚴(yán)重的移植物抗宿主?。℅VHD)。目前美國食品藥品監(jiān)督管理局已經(jīng)批準(zhǔn)MSC作為急性GVHD治療的一線藥物用于臨床。
20世紀(jì)大量證據(jù)表明自身免疫性疾病起源于造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell,HSC)的缺陷,分離的HSC足以將自身免疫性疾病從易感小鼠轉(zhuǎn)移到正常小鼠[12],而全骨髓移植后小鼠自身免疫性疾病可得到預(yù)防和治療[13]。因此,Ikehara等[12-13]提出了自身免疫性疾病如SLE是HSC缺陷病。但是,越來越多的研究顯示SLE不僅存在HSC缺陷,也存在MSC異常。Ishida等[14]最早發(fā)現(xiàn)用骨分離得到的MSC和HSC一起移植MRL/lpr狼瘡小鼠,可以有效防止自身免疫性疾病的復(fù)發(fā),而單獨HSC移植,復(fù)發(fā)率卻很高。
MRL/lpr小鼠是常用的SLE動物模型之一,很多研究發(fā)現(xiàn)其BM-MSC有功能缺陷。Sun等[15]研究發(fā)現(xiàn),與對照組相比,MRL/lpr小鼠的BM-MSC增殖率升高,細(xì)胞集落形成單位數(shù)量也增加。MRL/lpr小鼠BM-MSC有成骨分化障礙,表現(xiàn)為骨誘導(dǎo)培養(yǎng)中礦化降低,成骨基因包括Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2、ALP、骨鈣素的表達(dá)水平降低。此外,MRL/lpr小鼠BM-MSC的成脂分化也存在障礙,表現(xiàn)為分化過程中脂質(zhì)油紅O染色陽性細(xì)胞數(shù)減少和脂肪細(xì)胞特異性基因如過氧化物酶體增殖物激活受體和脂蛋白脂酶的表達(dá)減少。而另一個狼瘡模型BXSB小鼠的BM-MSC較對照組體積偏大,生長速度慢,端粒酶活性增加,增殖率和間隙連接蛋白的表達(dá)水平均降低[16]。
SLE患者的MSC也表現(xiàn)出異常,在傳代過程中更容易衰老,更容易失去活力,BM-MSC增殖和分化能力均受損。孫凌云教授團隊發(fā)現(xiàn)SLE患者的BM-MSC與正常對照組相比,雖有相同的表面標(biāo)記但生長緩慢[17-18],這些細(xì)胞更容易發(fā)生凋亡和衰老[19-20],在體外培養(yǎng)中遷移能力下降[21]。這也許可以解釋為什么正常細(xì)胞可以在體外培養(yǎng)40代而狼瘡BM-MSC卻只能培養(yǎng)10代。應(yīng)用寡聚核苷酸基因表達(dá)芯片來研究SLE患者的MSC基因表達(dá)譜變化,發(fā)現(xiàn)有652個基因表達(dá)上調(diào),1 253個下調(diào)[22]。其中上調(diào)的NF-κB可通過骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)/Smad信號通路抑制BMP-2,后者可促進(jìn)成骨細(xì)胞分化,提示MSC的基因缺陷可能參與SLE患者骨質(zhì)疏松的機制[23]。
另外,Sun等[17]研究結(jié)果也表明,SLE的MSC分泌細(xì)胞因子的能力下降,如轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、IL-6和IL-7。最重要的是,SLE的MSC在體外抑制T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖、漿細(xì)胞終末分化的能力下降[24-25]??梢酝茰y,這種缺陷會造成免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)的失調(diào)而最終導(dǎo)致臨床疾病。動物實驗發(fā)現(xiàn),異體BM-MSC移植可以改善NZB/W小鼠的病情,而從年老NZB/W小鼠分離的BM-MSC移植卻不能改善病情,而且臨床數(shù)據(jù)也提示自體MSC治療無效[26-27]。這些結(jié)果都表明自體BM-MSC不適宜在臨床治療SLE。
目前尚不清楚SLE的MSC存在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能缺陷的確切機制。Nie等[28]發(fā)現(xiàn),與SLE血清共培養(yǎng)能明顯抑制正常MSC對B細(xì)胞增殖和成熟的影響,提示SLE患者血清中的一些因素可能會影響MSC的免疫調(diào)節(jié)功能。此外,Chen等[29]研究表明SLE患者血清中瘦素與中性粒細(xì)胞激活肽2水平增加是BM-MSC加速衰老的原因,表現(xiàn)為MSC的β-半乳糖苷酶染色和p53、p21的表達(dá)增加。除了這些因素,一些炎癥細(xì)胞因子可能會影響SLE的MSC功能。Tang等[23]發(fā)現(xiàn)SLE患者高水平的血清TNF-α可激活NF-κB并抑制Smad1/5/8信號通路,參與MSC的成骨分化受損。此外,TNF-α還可以顯著抑制BM-MSC遷移和歸巢的能力,這種作用與IκB激酶活化導(dǎo)致肝細(xì)胞生長因子mRNA生成減少有部分關(guān)系[30]。
總之,狼瘡小鼠和SLE患者的MSC均表現(xiàn)出結(jié)構(gòu)和功能的缺陷,這可能與體內(nèi)的炎癥環(huán)境異常有關(guān)。
2.1 不同來源的MSC治療狼瘡小鼠 由于狼瘡模型小鼠自體MSC結(jié)構(gòu)和功能的缺陷,所以首先被研究者選用來驗證異基因MSC的療效。近年來,已經(jīng)有許多不同來源的MSC移植治療狼瘡小鼠的研究。
Gu等[26]的研究中,同種異基因、同種同基因的BMMSC被分別用來治療MRL/lpr和NZB/NZW F1狼瘡小鼠。研究結(jié)果表明,同種異基因和同種同基因MSC靜脈移植不僅都能改善病情,延長生存率,減少蛋白尿和血清抗雙鏈DNA(ds-DNA)抗體,而且還能改善小鼠腎臟免疫球蛋白G(IgG)和補體3(C3)的沉積。無論在疾病的早期階段(9周齡)或在成熟階段(16周齡),MSC均能恢復(fù)腎小球結(jié)構(gòu),減少腎臟IgG和C3的沉積[15]。Ji等[31]對比異基因BM-MSC不同的細(xì)胞數(shù)經(jīng)靜脈移植MRL/lpr狼瘡小鼠的療效,結(jié)果發(fā)現(xiàn)高劑量組的MSC(0.2×106細(xì)胞/10g體重)可明顯減少血清抗ds-DNA抗體、免疫球蛋白M(IgM)、ANA和24h尿蛋白定量,也能顯著改善腎臟的組織病理學(xué);而低劑量組的MSC(0.05×106細(xì)胞/10g體重)與未處理小鼠無統(tǒng)計學(xué)差異,提示移植的細(xì)胞劑量可能也是影響療效的一個因素。
除了同種MSC移植,研究者還嘗試用異種MSC移植治療狼瘡模型小鼠。Zhou等[32]首先發(fā)現(xiàn)人類BM-MSC(hBM-MSC)移植聯(lián)合CYC治療可顯著改善蛋白尿和腎臟病理,治療2周后,聯(lián)合治療組的狼瘡小鼠血清抗ds-DNA抗體和24h尿蛋白定量水平明顯下降,而單用CYC組僅表現(xiàn)為血清抗體水平與腎臟病理的輕微改善。
人臍帶MSC(hUC-MSC)被發(fā)現(xiàn)也有相同的移植療效。在狼瘡小鼠的不同周齡行hUC-MSC的多次移植,能夠顯著降低小鼠的24h尿蛋白定量、血清肌酐水平、血清抗ds-DNA抗體,并改善腎臟組織學(xué),遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于單次移植的效果[33]。另外,hUC-MSC還被發(fā)現(xiàn)可改善MRL/lpr小鼠的間質(zhì)性肺炎,移植后肺的細(xì)支氣管病變指數(shù)和血管損傷指數(shù)明顯下降。
也有研究對不同來源MSC(健康hBM-MSC、健康hUC-MSC和狼瘡患者h(yuǎn)BM-MSC)的移植療效進(jìn)行比較。移植8周后,健康hBM-MSC和健康hUC-MSC均能顯著改善腎臟疾病,提高M(jìn)RL/lpr小鼠的生存率;而狼瘡患者h(yuǎn)BM-MSC顯著增加腎小球的IgG和C3沉積[34],進(jìn)一步驗證狼瘡MSC存在缺陷。
2.2 修飾的MSC治療狼瘡小鼠 MSC還是非常理想的基因治療細(xì)胞載體,易被病毒載體系統(tǒng)所轉(zhuǎn)染,經(jīng)過基因修飾的MSC輸注后可以遍布全身,不僅可以發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)和修復(fù)的作用,同時又可大量表達(dá)如細(xì)胞因子等的目的基因,而且兩者具有協(xié)同作用。在治療狼瘡小鼠領(lǐng)域出現(xiàn)的基因修飾包括:將CTLA4Ig基因重組到MSC,使MSC過表達(dá)人抗氧化性1基因;將人激肽釋放酶1(hKLK1)基因轉(zhuǎn)染給小鼠BM-MSC等。這些基因修飾過的MSC除了能改善狼瘡小鼠的蛋白尿、腎功能和腎臟病理,還能有目的基因大量表達(dá)所引起的效果,如hKLK1轉(zhuǎn)染后的MSC能通過抑制炎癥因子的表達(dá)而減少巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞在腎臟的浸潤[35]。
2.3 MSC聯(lián)合HSC移植治療狼瘡小鼠 HSCT的基本原理是重建免疫系統(tǒng),但是自體HSCT面臨高復(fù)發(fā)的風(fēng)險,而異體MSC移植易出現(xiàn)移植排斥反應(yīng)。所以有研究者嘗試MSC聯(lián)合HSC移植治療狼瘡小鼠。MRL/lpr小鼠經(jīng)靜脈輸注不同混合比例的HSC和MSC(分別為1∶5,1∶1,5∶1,1∶0),8 周后,移植細(xì)胞比例為 5∶1 組的狼瘡小鼠與僅接受HSCT組的小鼠相比,蛋白尿和血清肌酐水平的降低、腎組織病理學(xué)的改變更明顯,移植物抗宿主反應(yīng)的發(fā)生率更低[36]。這些結(jié)果表明,MSC可以明顯提高HSCT治療MRL/lpr小鼠的療效。
迄今為止,在NIH的臨床試驗官方網(wǎng)站(http://clinicaltrials.gov)注冊的用MSC移植治療SLE的相關(guān)研究共有5個,其中有4個使用的細(xì)胞是異基因BM-MSC或UC-MSC。目前,已經(jīng)有多項研究報道了MSC移植在SLE患者中的療效。
2007年開始,南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院首先應(yīng)用同種異基因的BM-MSC治療難治性SLE患者[15],至今共移植400多例。最初入選的4個難治性狼瘡性腎炎患者,均對一線治療方案[強的松劑量>20mg/d聯(lián)合CYC 0.75g/(m2·月),6個月]無效,所以接受了BM-MSC移植(細(xì)胞數(shù)為106/kg體重,骨髓來自于患者的健康家庭成員)。移植后所有患者的SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)明顯降低,蛋白尿明顯減少,強的松和CYC劑量逐漸減少。這個臨床結(jié)果大大鼓勵了后期的研究。
一項多中心臨床研究更具有說服力[37]。來自4個臨床中心的40例SLE患者均輸注UC-MSC 2次(106/kg體重,間隔1周),隨訪12個月后總生存率為92.5%。所有患者耐受良好,無移植相關(guān)不良事件發(fā)生。13例患者達(dá)到主要臨床反應(yīng),11例患者達(dá)到部分臨床反應(yīng),7例患者移植后病情復(fù)發(fā)。SLEDAI評分和英島狼瘡評定組指數(shù)評分在移植3個月后明顯降低,血清ANA、抗ds-DNA抗體水平亦在移植3個月后明顯下降[37]。該研究還發(fā)現(xiàn)許多患者在移植6個月后病情復(fù)發(fā),提示可在移植6個月后再次移植以減少復(fù)發(fā)[37]。
在一項納入87例難治性SLE患者的Ⅱ期臨床研究中,59%的患者在移植前3d接受CYC[10mg/(kg·d)]治療以期抑制淋巴細(xì)胞反應(yīng),41%的患者由于嚴(yán)重的基礎(chǔ)疾病未接受CYC治療。69例患者接受了1次MSC移植,18例患者接受了多次MSC移植。平均隨訪27個月后,患者的總生存率為94%,且生存率與病程、初始SLEDAI評分、MSC的來源或CYC預(yù)處理方案均無關(guān)。緩解時間 3~24(9.4)個月,總復(fù)發(fā)率為 23%(20/87),5例死于非移植相關(guān)事件。同時,該研究還對BM-MSC和UC-MSC的移植療效進(jìn)行對比,發(fā)現(xiàn)后者的療效更優(yōu)[38]。
MSC移植治療SLE的機制尚不清楚,目前認(rèn)為可能包括以下4方面。
4.1 MSC歸巢 了解移植后MSC的命運對探討MSC療效的機制至關(guān)重要。有研究發(fā)現(xiàn)MRL/lpr小鼠移植后,很快就能在腎、肺、肝、脾等組織檢測到CFSE標(biāo)記的UC-MSC,在24h達(dá)到最高水平,并持續(xù)1周。靜脈輸注MSC 11周后仍然能在腎臟檢測到移植的MSC[23]。在另一種狼瘡模型NZB/W狼瘡小鼠中,經(jīng)尾靜脈輸注1×106/kg體重UC-MSC 2周后也仍然能在腎臟檢測到MSC[39]。這些歸巢的細(xì)胞能通過抑制單核細(xì)胞趨化蛋白-1和高遷移率族蛋白1[33]、血管內(nèi)皮生長因子、TGF-β的表達(dá)來調(diào)控局部的炎癥反應(yīng),或通過分化為腎小管上皮細(xì)胞來促進(jìn)腎臟組織的修復(fù)[40]。
4.2 MSC對T細(xì)胞的調(diào)控 MSC移植療效主要依賴于MSC對各種免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用,其中最重要的是對T細(xì)胞的調(diào)控。MSC可以劑量依賴性地抑制T細(xì)胞的增殖[32],并抑制Akt/GSK3b介導(dǎo)的狼瘡T細(xì)胞的G1/S期轉(zhuǎn)變[31]。
實驗表明,MSC移植可能會促進(jìn)狼瘡小鼠體內(nèi)的細(xì)胞因子平衡。MRL/lpr小鼠靜脈輸注hBM-MSC,外周T細(xì)胞分泌IL-4減少,而IFN-γ增加,使Th1/Th2平衡向Th1方向偏移[32]。SLE患者經(jīng)UC-MSC移植后,血清細(xì)胞因子向Th1極化[41]。
MSC通過兩條途徑調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能。首先,MSC直接抑制抗原特異性T細(xì)胞的功能。在體外,hBM-MSC通過分泌高水平的吲哚胺吡咯2,3-雙加氧酶(IDO)顯著抑制CD4+CD25+調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Treg)的增殖。第二,MSC通過促進(jìn)Treg的生成或抑制Th17細(xì)胞來間接抑制T細(xì)胞的功能。在hBM-MSC和Treg共培養(yǎng)后,Treg的存活率和增殖指數(shù)都明顯增加,這些作用由MSC分泌的TGF-β所介導(dǎo)[25]。同時,hBM-MSC在體外還能降低CD4+IL-17A+Th17細(xì)胞的生成,后者能被抗TGF-β和抗前列腺素E2(PGE2)所阻斷。
濾泡輔助性T細(xì)胞(Tfh)是新發(fā)現(xiàn)的一類CD4+T細(xì)胞亞群,在生發(fā)中心形成和B細(xì)胞分化中起重要作用。NZB/NZW F1小鼠經(jīng)MSC移植后,血液和脾臟的Tfh細(xì)胞比例(CD4+CXCR5+PD-1+)及其前體細(xì)胞(CD4+CD44+CXCR5+PD-1+)均明顯降低。最近Zhang等[42]研究發(fā)現(xiàn)hUC-MSC可以在誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的介導(dǎo)下抑制Tfh細(xì)胞的分化和增殖,提示MSC對Tfh細(xì)胞有直接調(diào)控作用。
4.3 MSC對B細(xì)胞的調(diào)控 狼瘡小鼠經(jīng)MSC移植后,血清IgG和IgM水平顯著降低;狼瘡患者經(jīng)MSC移植后,血清 ANA、抗 ds-DNA 抗體水平顯著降低[41,43],都表明MSC可調(diào)節(jié)B細(xì)胞功能。將hUC-MSC與從MRL/lpr小鼠分離的脾臟B細(xì)胞共培養(yǎng),B細(xì)胞增殖和分化減少,上清液中IgG和IgM產(chǎn)生減少,具體機制為MSC抑制B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白和B細(xì)胞特異性激活蛋白的表達(dá)[44]。
4.4 MSC對巨噬細(xì)胞的調(diào)控 巨噬細(xì)胞存在于所有組織中,具有極大的可塑性和功能多樣性,是免疫應(yīng)答、組織修復(fù)、維持機體穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)。MSC經(jīng)靜脈輸注可顯著增加CD206陽性巨噬細(xì)胞(M2)在狼瘡小鼠腹膜及腎組織中的表達(dá),且巨噬細(xì)胞的吞噬活性有明顯提高。進(jìn)一步研究表明MSC分泌的IL-6在其中起介導(dǎo)作用[45-46]。
像其他細(xì)胞療法一樣,在MSC移植的臨床應(yīng)用中,也需要考慮其安全性的問題,后者涉及細(xì)胞采集、分離、培養(yǎng)、純化和移植到患者體內(nèi)的每一個環(huán)節(jié)。已有MSC移植狼瘡后的一些小樣本的長期安全性研究,數(shù)據(jù)顯示MSC移植后無移植相關(guān)死亡,血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物包括甲胎蛋白、癌胚抗原、糖抗原(CA)155和CA19-9無升高[4],提示狼瘡患者M(jìn)SC移植的安全性。國外多個隨機對照臨床試驗的統(tǒng)計學(xué)結(jié)果發(fā)現(xiàn)MSC治療組和對照組的感染率沒有差異,明確提出MSC治療不會增加感染的風(fēng)險,而且MSC治療組和對照組在致瘤方面也沒有差異。大量基礎(chǔ)研究也證實MSC可通過它分泌的IDO來抑制病原微生物,比如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、弓形蟲和巨細(xì)胞病毒,但是具體機制還不是很清楚。另外,MSC對腫瘤細(xì)胞的調(diào)控也是雙向的,MSC可以通過重構(gòu)間質(zhì)、抑制免疫、生成血管等促進(jìn)腫瘤生長,也能通過改變細(xì)胞周期或凋亡蛋白的表達(dá)來抑制腫瘤生長。總的來講,MSC移植的有效性和安全性已經(jīng)得到一定的認(rèn)可,但仍需足夠多的基礎(chǔ)研究和臨床研究來進(jìn)一步證實。隨著這些研究的進(jìn)一步深入,MSC移植必將為臨床疾病的治療提供新的角度和思路。
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210008 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院風(fēng)濕免疫科
孫凌云,E-mail:lingyunsun@nju.edu.cn
2017-07-17)
陳麗)