蘇付保，馮立新，黃恒華，羅其光，許蓉蓉，林華，李榮珍，李盛

(1.廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院 林業(yè)工程系；廣西珍貴鄉(xiāng)土樹種良種培育中心，廣西 柳州 545004； 2.廣西天峨縣林朵林場，廣西 河池 547300；3.廣西柳州食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 柳州 545006)

晚花型天峨金花茶優(yōu)良單株選擇初探

蘇付保1，馮立新1，黃恒華2，羅其光2，許蓉蓉3，林華3，李榮珍1，李盛1

(1.廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院林業(yè)工程系；廣西珍貴鄉(xiāng)土樹種良種培育中心，廣西柳州545004； 2.廣西天峨縣林朵林場，廣西河池547300；3.廣西柳州食品藥品檢驗(yàn)所，廣西柳州545006)

以“天峨金花茶種質(zhì)資源保存園”中的晚花型野生金花茶為研究對象，開展晚花型天峨金花茶優(yōu)良單株選擇。通過對25個單株花朵數(shù)量的連續(xù)觀測和花朵數(shù)量靠前的10個單株總黃酮含量的測定，從花朵數(shù)量的角度初步篩選出晚花2、晚花3和晚花6優(yōu)良單株3株及晚花1、晚花15和晚花22候補(bǔ)優(yōu)良單株3株，從總黃酮含量的角度初步篩選出晚花4、晚花6和晚花21優(yōu)良單株3株及晚花1和晚花7候補(bǔ)優(yōu)良單株2株，從總黃酮總量的角度初步篩選出晚花1、晚花3和晚花6優(yōu)良單株3株及晚花15候補(bǔ)優(yōu)良單株1株。綜合考慮種植戶和藥品開發(fā)商的需求，初步篩選出晚花1、晚花3和晚花6為優(yōu)良單株，晚花15為候補(bǔ)優(yōu)良單株。

天峨金花茶；晚花型；優(yōu)樹選擇；花朵數(shù)量；總黃酮含量；總黃酮總量

金花茶(CamellianitidissimaChi)為山茶科山茶屬金花茶組金花茶系植物，是國家一級保護(hù)植物，有極高的藥用價(jià)值和保健功能。據(jù)張宏達(dá)1981年報(bào)道：世界產(chǎn)金花茶組植物有22種，其中我國產(chǎn)20種，特有18種；越南4種，特有2種[1]101-107；梁盛業(yè)2007年報(bào)道：世界上的金花茶有42種5變種，除越南北部產(chǎn)10多種和我國云南、貴州、四川各產(chǎn)1種外，其余29種5變種均產(chǎn)于廣西，廣西成為金花茶的現(xiàn)代地理分布中心，被譽(yù)為金花茶的故鄉(xiāng)[2]。金花茶在廣西主要分布在南部和西南部。天峨金花茶(Camelliatianeensis)分布于廣西西北部，是至今為止在廣西發(fā)現(xiàn)的最北面的一個金花茶新種，有早花和晚花兩個類型，早花型天峨金花茶10月中旬前后開始開花，晚花型12月下旬前后開始開花。據(jù)觀測，不同金花茶單株的花朵數(shù)量和總黃酮含量相差較大，開展優(yōu)良單株選擇對金花茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展有重要的意義。在金花茶優(yōu)良單株選擇方面，陳俊愉、吳洪明等從觀賞性的角度進(jìn)行了選優(yōu)[3-4]，從花朵數(shù)量、總黃酮含量和總黃酮總量的角度開展選優(yōu)尚未有報(bào)道。本文在對野生金花茶單株的花朵數(shù)量進(jìn)行連續(xù)觀測和總黃酮含量測定的基礎(chǔ)上，開展晚花型天峨金花茶優(yōu)良單株選擇，以期為金花茶產(chǎn)業(yè)的良種繁育提供基礎(chǔ)材料。

1 材料與方法

1.1 材料來源

金花茶花朵來源于“天峨金花茶種質(zhì)資源保存園”。該園是用當(dāng)?shù)氐囊吧鸹ú枰圃远桑?009年建成，面積約0.3 hm2，有早花和晚花兩個類型。位于廣西天峨縣向陽鎮(zhèn)羅家坳，北緯25°5′，東經(jīng)106°60′，海拔520～600 m，東坡。據(jù)近10年觀測數(shù)據(jù)分析，年均氣溫19.1 ℃，年均最高氣溫36.1 ℃，最低溫度1.1 ℃，年均降水量1 232 mm。成土母巖為砂巖，土層較深厚疏松，石礫含量高。測定總黃酮含量所用蘆丁由中國食品藥品檢定研究院提供，含量為92.8%。

1.2 花朵數(shù)量觀測與樣品采集

1.2.1 花朵數(shù)量觀測

從2014年起，在“天峨金花茶種質(zhì)資源保存園”的晚花型野生單株中選擇花朵較多的25個單株為定株觀測對象，每年12月即將開花時(shí)進(jìn)行觀測。觀測指標(biāo)為花朵數(shù)量、冠幅、冠高、花朵直徑和花朵高度。觀測期從2014年至2016年。

1.2.2 樣品采集處理

2016年12月，選擇經(jīng)連續(xù)3年觀測單位體積樹冠平均花朵數(shù)量排列前14的單株采集即將開花的花朵作為檢測樣品，放在干燥的室內(nèi)自然風(fēng)干。因處理過程中部分樣品霉變，實(shí)際送專業(yè)檢驗(yàn)所檢測的樣品為10個。

1.3 干花重量和總黃酮測定方法

1.3.1 干花重量測定

從干花混合樣品中隨機(jī)抽取100粒花朵秤重，測定5個重復(fù)，計(jì)算平均重和千粒重。

1.3.2 總黃酮含量測定方法

以蘆丁為對照品，用紫外可見分光光度計(jì)(島津UV-2450)在500 nm的波長處測定金花茶供試品吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含蘆丁的重量(mg)，并計(jì)算出金花茶樣品總黃酮含量[5]。

1.4 單位體積花朵數(shù)量和總黃酮總量計(jì)算

1.4.1 單位體積花朵數(shù)量計(jì)算

由于移栽的金花茶單株年齡有一定的差別，須換算為單位體積花朵數(shù)量進(jìn)行比較。采用公式“πx2y/6”計(jì)算樹冠體積，其中x為冠幅，y為冠高[6]；單位體積花朵數(shù)量=單株花朵數(shù)量/樹冠體積。

1.4.2 單位體積總黃酮總量計(jì)算

單位體積總黃酮總量=單位體積花朵數(shù)量*總黃酮含量*干花重量。

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行處理分析，其中花朵數(shù)量采取t檢驗(yàn)法進(jìn)行顯著性分析，總黃酮含量和總黃酮總量采用單因素方差分析進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同單株單位體積花朵數(shù)量比較

由表1可知，不同單株間單位體積樹冠的花朵數(shù)量差異大，排名第1的晚花3是總平均的268.5%，排名第2的晚花2是總平均的217.2%，排名第3的晚花6是總平均的190.5%。經(jīng)t檢驗(yàn)P值小于0.01，表明不同單株間單位體積樹冠的花朵數(shù)量有極顯著差異；經(jīng)若干次總平均數(shù)增加5%進(jìn)行差異顯著性分析，差異顯著臨界值的范圍為35%～40%，再增加1%進(jìn)行差異顯著性分析確定臨界值為36%，表明排名靠前的6個單株單位體積樹冠的花朵數(shù)顯著高于總平均數(shù)。綜合考慮不同單株單位體積樹冠花朵數(shù)量的差異顯著性、梯度關(guān)系和混系種植的需要，初步篩選出晚花2、晚花3和晚花6優(yōu)良單株3株及晚花1、晚花15和晚花22候補(bǔ)優(yōu)良單株3株。

表1 不同單株單位體積樹冠花朵數(shù)量比較

單株號花朵數(shù)量/朵2014年2015年2016年平均與總平均比較/%12897400147481#33110694277605525#36119235656795562#38718566741695667#459257672791013686#472138621416136805#55423960971796909#6251114226348319626625106458812679636622447715438709636621720784563799716687403591205910187002032924223541035712211096120111531150791161475964125712328471432728641035140996947711510199814269818145028619111741119791405324093518601279221205402112272151?147911594371421492486?171015963399925522505?172363358157333772769?190525620130225543159?217234514208851083903?2685總平均1454

注：*表示顯著高于總平均數(shù)；#表示顯著低于總平均數(shù)。

2.2 不同單株總黃酮含量比較

由表2可知，不同單株間總黃酮含量差異大，排名第1的晚花21是總平均的142.9%，排名第2的晚花4是總平均的127.2%，排名第3的晚花6是總平均的123.3%。經(jīng)方差分析，P值小于0.01，表明不同單株間的總黃酮含量有極顯著差異。多重比較表明，10個單株兩兩之間的總黃酮含量均有顯著差異；除排名第6的15號與第7的20號單株之間外，其它單株兩兩之間及其它單株與15號和20號之間均有極顯著差異。綜合考慮不同單株總黃酮含量的差異顯著性、梯度關(guān)系和混系種植的需要，初步篩選出晚花4、晚花6和晚花21優(yōu)良單株3株及晚花1和晚花7候補(bǔ)優(yōu)良單株2株。

表2 不同單株的總黃酮含量比較

單株號總黃酮含量/%重復(fù)1重復(fù)2重復(fù)3平均與總平均比較/%3392393391392jI6698427420426424iH72422459460458459hG78320492496489492gF84015503506506505fF8621638641640640eE10927646644643644dD11006725723720723cC12334741745750745bB127221839836838838aA1429總平均586

注：不同小寫字母表示多重比較的t檢驗(yàn)在P≤0.05水平上差異顯著；不同大寫字母表示多重比較的t檢驗(yàn)在P≤0.01水平上差異顯著。下同。

2.3 不同單株單位體積總黃酮總量比較

由表3可知，不同單株間單位體積樹冠總黃酮總量差異大，排名第1的晚花6是總平均的177.0%，排名第2的晚花1是總平均的140.7%，排名第3的晚花3是總平均的135.4%。經(jīng)方差分析，P值小于0.01，表明不同單株間單位體積樹冠總黃酮總量有極顯著差異。多重比較表明，10個單株兩兩之間單位體積樹冠總黃酮總量有極顯著差異。綜合考慮不同單株單位體積樹冠總黃酮總量的差異顯著性、梯度關(guān)系和混系種植的需要，初步篩選出晚花1、晚花3和晚花6優(yōu)良單株3株及晚花15候補(bǔ)優(yōu)良單株1株。

表3 單位體積樹冠總黃酮總量比較

單株號總黃酮總量/g重復(fù)1重復(fù)2重復(fù)3平均與總平均比較/%201412142314031413J45171823181818151819I58082061202720562048H653212675266626722671G852222737274327312737F87342930294629652947E940153494351435143507D111934242425342314242C135414398441844114409B140765566555155285548A1770總平均3134

注：經(jīng)測定金花茶干花千粒重為277.26 g。

3 結(jié)論與討論

本次選優(yōu)，從花朵數(shù)量的角度初步篩選出晚花2、晚花3和晚花6優(yōu)良單株3株及晚花1、晚花15和晚花22候補(bǔ)優(yōu)良單株3株，其中晚花3是總平均的268.5%、晚花2的花朵數(shù)量是總平均的217.2%、晚花6是總平均的190.5%；從總黃酮含量的角度初步篩選出晚花4、晚花6和晚花21優(yōu)良單株3株及晚花1和晚花7候補(bǔ)優(yōu)良單株2株，其中晚花21的總黃酮含量是總平均的142.9%、晚花4是總平均的127.2%、晚花6是總平均的123.3%；從總黃酮總量的角度初步篩選出晚花1、晚花3和晚花6優(yōu)良單株3株及晚花15候補(bǔ)優(yōu)良單株1株，其中晚花6的總黃酮總量是總平均的177.0%、晚花1是總平均的140.7%，晚花3是總平均的135.4%。

進(jìn)入21世紀(jì)，金花茶從保護(hù)和觀賞逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槿斯しN植及其藥用價(jià)值和保健功能的開發(fā)。種植戶最關(guān)心的是花朵數(shù)量，藥品開發(fā)商則更看重總黃酮含量，而本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明花朵數(shù)量多的植株總黃酮含量不一定高。因此，金花茶優(yōu)良單株選擇既要考慮種植戶的利益，又要考慮藥品開發(fā)商的利益，其平衡點(diǎn)則是單位體積樹冠的總黃酮總量。因此，綜合考慮各方需求，初步篩選出晚花1、晚花3和晚花6為優(yōu)良單株，晚花15為候補(bǔ)優(yōu)良單株。這4個單株不僅總黃酮總量高，而且花朵數(shù)量也排在前5名。花朵數(shù)量排名第2的晚花2因樣品霉變，沒有測定其總黃酮含量，還應(yīng)繼續(xù)開展觀測；另外，由于本次選優(yōu)是基于3年連續(xù)觀測的基礎(chǔ)上進(jìn)行，觀測時(shí)間還不夠長，選優(yōu)結(jié)果的穩(wěn)定性還待繼續(xù)觀測。

[1]張宏達(dá).山茶屬植物的系統(tǒng)研究[Z].中山大學(xué)學(xué)報(bào)編輯部，1981.

[2]梁盛業(yè). 世界金花茶植物名錄 [J].廣西林業(yè)科學(xué)，2007，36(4)：221-223.

[3]陳俊愉，鄧朝佐.用百分制評選三種金花茶優(yōu)株試驗(yàn) [J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1986(3)：35-43.

[4]吳洪明. 福建金花茶組植物種質(zhì)資源研究與評價(jià)[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2004.

[5]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[6]何誠，張思玉，Matteo Convertino，等. 基于方格網(wǎng)法的樹冠體積測算方法[J]. 農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào)，2014，45(12)：308-316.

2017-07-06

[責(zé)任編輯姚勝勛]

PreliminaryStudyoftheSelectionofSuperiorIndividualsfromLateBloomingCamelliaNitidssima

Chi.inTian’eSUFubao1，F(xiàn)ENGLixing1，HUANGHenghua2,LUOQiguang2，XURongrong3，LINHua3,Rongzhen1，LIJianxing1

(1.DepartmentofForestryEngineering，GuangxiEco-engineeringVocationalandTechnicalCollege，GuangxiRareindigenousTreespropagationCenter，Liuzhou，Guangxi545004； 2.LinduoForestFarm，Hechi，Guangxi547300； 3.LiuzhouInstituteforFoodandDrugcontrol，Liuzhou，Guangxi545006,China)

The superior individuals selection of late bloomingCamellianitidssimaChi. in Tian’e were studied，which was based on wildCamelliaat Germplasm conservation garden ofCamelliapetelotiiin Tian’e. The continuous observation of flower number of 25 individuals and total flavonoid content of 10 individuals which had more flowers were measured. From the point of flower number，the late bloomingCamellianitidssimaChi. in Tian’e of No. 2，3 and 6 were selected as superior individuals and No. 1，15 and 22 were selected as candidates. From the point of total flavonoids contents，No.4，6 and 21 were selected as superior individuals，and No. 1 and 7 were selected as candidates. From the point of total flavonoid，No.1，3 and 6 were as superior individuals，and No.15 was selected as candidates. Given the needs of growers and drug developers，the late bloomingCamellianitidssimaChi. in Tian’e of No.1，3 and 6 were selected as superior individuals and No. 15 were selected as candidates.

CamellianitidssimaChi.in Tian’e；late blooming；uperior individuals；flower number；total flavonoids contents；total flavonoid

Q949.9

A

1672-9021(2017)05-00012-05

蘇付保(1963-)，男，廣西靈川人，廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院林業(yè)工程系教授，主要研究方向：森林培育。

廣西林業(yè)科技項(xiàng)目(桂林科字(2013)第13號)。