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        熒光法測(cè)定蘑菇中維生素B2的含量

        2017-11-30 07:53:30劉艷紅努娜馬曉光

        劉艷紅,努娜,馬曉光

        (赤峰學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,內(nèi)蒙古赤峰024000)

        熒光法測(cè)定蘑菇中維生素B2的含量

        劉艷紅,努娜,馬曉光

        (赤峰學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,內(nèi)蒙古赤峰024000)

        本文采用熒光法對(duì)三種不同品種的蘑菇里的維生素B2含量進(jìn)行測(cè)定.在最大激發(fā)波長為423nm,最大發(fā)射波長為526nm條件下,采用分子熒光法分別測(cè)定了平菇、香菇、杏鮑菇3種蘑菇中的維生素B2含量.結(jié)果表明,杏鮑菇中的維生素B2含量最高,其次是香菇,平菇B2含量最低.同時(shí)研究了經(jīng)陽光照射和陰干處理的蘑菇樣品,通過實(shí)驗(yàn)測(cè)定表明,兩種環(huán)境下處理的蘑菇中的維生素B2含量變化不大.研究可以為人們?cè)谑秤媚⒐椒矫嫣峁I養(yǎng)數(shù)據(jù).

        熒光法;蘑菇;維生素B2

        維生素B2又稱核黃素,在水中溶解性不大,在中性或酸性溶液中加熱是穩(wěn)定的.維生素B2是體內(nèi)黃酶類輔基的組成部分,黃酶在生物氧化還原中發(fā)揮遞氫作用.所以當(dāng)機(jī)體內(nèi)維生素B2不足時(shí)就會(huì)使機(jī)體代謝受阻.臨床癥狀多表現(xiàn)為口、眼和外生殖器部位的炎癥,如口角炎、舌炎、唇炎、眼結(jié)膜炎和陰囊炎等癥狀[1-2].人體不能直接合成維生素B2,加之其屬水溶性維生素,故在人體內(nèi)儲(chǔ)存是很有限的,因此需要每天從外界攝取.

        蘑菇是含維生素B2較豐富蔬菜之一.它口感滑嫩,符合當(dāng)代綠色營養(yǎng)健康的飲食需求.長期食用蘑菇不但可以起到降糖、降脂、降膽固醇的作用,而且蘑菇在慢性肝炎、增加白細(xì)胞以及維生素B2缺乏癥等方面具有較好的食療作用.所以研究蘑菇的營養(yǎng)價(jià)值具有重要的意義.

        鑒于分子熒光具有測(cè)量簡(jiǎn)便、選擇性好、受雜散光干擾小等優(yōu)點(diǎn).所以作者采用分子熒光法來測(cè)定蘑菇中維生素B2的含量,以期為人們合理食用蘑菇和進(jìn)一步研究蘑菇提供數(shù)據(jù)參考.

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 試劑和材料

        原料:香菇,平菇,杏鮑菇皆是本地市場(chǎng)購買.主要試劑:核黃素,購自西亞試劑.鹽酸,乙酸鈉皆為市售分析純.

        1.2 儀器

        熒光分析儀(上海棱光技術(shù)有限公司制造F97Pro熒光分光光度計(jì)),熒光分析儀(上海棱光技術(shù)有限公司制造F96熒光分光光度計(jì)),電熱套,分析天平.

        1.3 樣品處理

        購買新鮮蘑菇,除掉其中的雜質(zhì),將選擇的樣品洗凈,分為兩份,一份為陽光照射直接曬干,一份為避光陰干操作.

        樣品處理:將曬干的樣品在研缽中研磨成粉末,再分別精確稱取香菇、平菇、杏鮑菇3種樣品2g左右,分別置于250mL的燒杯中,然后加入50mL的0.1mol/L鹽酸溶液,加熱煮沸30min,冷卻至室溫后,緩慢滴加3mL 2.5mol/L乙酸鈉溶液搖勻后,用漏斗過濾,棄去含雜質(zhì)較多的最初的5mL濾液.將上述得到的濾液轉(zhuǎn)移到100mL的容量瓶中,加水定容至刻度[3-5].

        1.4 維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

        配制維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0μg/mL,量取維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL分別置于50mL的容量瓶中,加入蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,配成五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣,待測(cè).

        2 結(jié)果與分析

        2.1 激發(fā)波長和發(fā)射波長的確定

        將裝有3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.00mL定容至50mL)的石英比色皿放入熒光分光光度計(jì)中,設(shè)置λem=525nm為發(fā)射波長,在250—450nm范圍內(nèi)掃描,從得到的激發(fā)光譜中找出最大激發(fā)波長,在此激發(fā)波長下,在460—660nm范圍內(nèi)掃描,記錄發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系,便得到熒光發(fā)射光譜.從熒光發(fā)射光譜上找出其最大熒光發(fā)射波長λem見圖1.從圖1可知維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大激發(fā)波長為423nm,最大發(fā)射波長為526nm.

        最大激發(fā)波長和最大發(fā)射波長確定后,將儀器參數(shù)固定為λex=423nm,λem=526nm.對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行定量測(cè)定,得出一系列熒光強(qiáng)度.以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo),在excel里擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而得出標(biāo)準(zhǔn)方程.在相同條件下測(cè)定未知溶液的熒光強(qiáng)度,并由標(biāo)準(zhǔn)方程確定未知試樣中維生素B2的濃度,從而計(jì)算出待測(cè)樣品溶液中的維生素B2的含量.

        圖1 維生素B2的最大激發(fā)波長(423nm)和最大發(fā)射波長(526nm)

        2.2 熒光光度法測(cè)定各樣品

        從表1和圖2中可看出:在此濃度范圍內(nèi)維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與熒光強(qiáng)度線性關(guān)系良好,擬合常數(shù)R2=0.991,可用此法測(cè)定維生素B2的含量.由測(cè)得的蘑菇待測(cè)樣品溶液的熒光強(qiáng)度,帶入維生素B2標(biāo)準(zhǔn)方程y=54.3x+0.23中求得蘑菇待測(cè)樣品溶液的濃度見表3.

        表1 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的熒光強(qiáng)度及濃度(ug/mL)

        圖2 維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與熒光強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線

        表3 樣品中維生素B2的含量

        通過實(shí)驗(yàn)測(cè)定可知(表3),香菇的維生素B2含量為1.383mg/100g,平菇中的維生素B2的含量為0.774mg/100g,杏鮑菇中的維生素B2含量為1.507mg/100g,其中杏鮑菇中維生素B2含量最高.從表3的數(shù)據(jù)還可以看出,經(jīng)陽光照射與陰干處理后的蘑菇中維生素B2含量變化不大.

        3 結(jié)論

        通過實(shí)驗(yàn)測(cè)定,蘑菇中香菇的維生素B2含量為1.383mg/100g,平菇中的維生素B2的含量為0.774mg/100g,杏鮑菇中的維生素B2含量為1.507 mg/100g.從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)還可以看出,杏鮑菇中的維生素B2含量最高,而且經(jīng)陽光照射與陰干處理后的蘑菇中維生素B2含量變化不大.

        〔1〕羅信昌.蘑菇的營養(yǎng)價(jià)值[J].食用菌,1980(1):47.〔2〕陳炳卿.營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997.47-48.

        〔3〕曹忠.熒光光譜分析法用于維生素藥片中核黃素的檢測(cè)[J],食品與機(jī)械.2009,7,20(4).

        〔4〕程春英.熒光法測(cè)定藥品中維生素B2含量的綜合型實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索,2014,12,33(12).

        〔5〕劉程程.熒光法測(cè)定薺菜中維生素B2的含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(7).

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