吳思敏 賀曉潔 楊嫄 李會 孫璐 李永霞

CPAP治療對OSAHS患者血清8-isoprostane、8-OHdG水平的影響

吳思敏 賀曉潔 楊嫄 李會 孫璐 李永霞

目的觀察OSAHS患者一夜CPAP治療后血清8-isoprostane、8-OHdG的水平變化。方法選擇經(jīng)PSG檢查確診的OSAHS患者10例納入治療組(OSAHS組)及非OSASH患者10例納入正常對照組(非OSAHS組)，(1) 比較OSAHS患者與非OSAHS患者血清8-isoprostane、8-OHdG水平差異；(2)治療組給予夜間 CPAP干預(yù)，對照比較患者予以CPAP治療的前后血清中8-isoprostane、8-OHdG水平的變化。結(jié)果(1) OSAHS組血清8-isoprostane、8-OHdG均高于非OSAHS組(Plt;0.05)；(2)10例OSAHS患者經(jīng)1晚CPAP治療后血清8-isoprostane、8-OHdG水平較治療前無顯著變化(Pgt;0.05)。結(jié)論在OSAHS患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激反應(yīng)，短期的CPAP治療對此反應(yīng)無改善作用，需進行長期CPAP治療。

OSAHS；持續(xù)氣道正壓通氣；氧化應(yīng)激

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(obstructive sleep apnea/hyperpnea syndrome，OSAHS)以在患者睡眠過程當中反復(fù)發(fā)生上氣道完全或不完全的阻塞而導(dǎo)致頻繁地呼吸暫停、通氣量降低、氧飽和度降低以及睡眠的結(jié)構(gòu)紊亂為此疾病的特征性表現(xiàn)。它是一種臨床中常見的睡眠呼吸紊亂疾病，其反復(fù)的缺氧-復(fù)氧過程，被認為是OSAHS的特征性病理生理變化。這個過程在夜間反復(fù)發(fā)生，產(chǎn)生過多的氧自由基，導(dǎo)致機體產(chǎn)生大量活性氧，引起細胞與組織的損傷，由此導(dǎo)致了呼吸道局部和全身的炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)。目前CPAP治療被公認為一線的治療方案，長期治療對OSAHS患者炎癥與氧化應(yīng)激反應(yīng)的療效明確，但短期治療效果目前研究結(jié)果較少，本研究探討OSAHS患者經(jīng)1晚CPAP治療后氧化應(yīng)激標記物8-isoprostane、8-OHdG水平的變化，以明確短程治療的效果。

資料與方法

一、對象

隨機選取2015年03月至2016年12月昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院門診及呼吸內(nèi)科二病區(qū)住院病人，并經(jīng)整夜7h多導(dǎo)睡眠監(jiān)測 (polysomnography，PSG) 檢查確診OSAHS患者10例，非OSAHS患者10例。分別給予治療組患者1晚CPAP治療，次日清晨復(fù)查血清中8-isoprostane、8-OHdG標記物濃度水平。治療組與對照組間納入的研究對象平均年齡、性別無明顯差異(Pgt;0.05)。所有的研究對象均排除了兩周之內(nèi)的感染、慢性呼吸系統(tǒng)疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘)、嚴重心臟疾病(如心肌梗塞、不穩(wěn)定型心絞痛、瓣膜性心臟病、各類心肌病、嚴重心律失常)、腦血管疾病、糖尿病、惡性腫瘤、周圍血管疾病、凝血障礙、嚴重肝、腎功不全、風(fēng)濕免疫病，近三月內(nèi)無創(chuàng)傷以及手術(shù)史，近一月內(nèi)沒有使用抗生素、阿司匹林和COX-I等影響血清中8-isoPG、8-OHdG水平的藥物。

二、OSAHS診斷

臨床有典型的睡眠過程中打鼾、呼吸暫停、憋醒以及白天嗜睡癥狀，經(jīng)多導(dǎo)睡眠儀監(jiān)測提示每夜7小時睡眠過程中呼吸暫停低通氣指數(shù)(apnea hypopnea index,AHI)大于等于5次每小時。研究中患者診斷的標準依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會擬定的《阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南(基層版)》[1]。

三、呼吸機治療

10名OSAHS組患者經(jīng)PSG確診后均使用美國飛利浦REMstar Auto A-Flex呼吸機治療。

四、血清中8-isoprostane、8-OHdG水平測定

每位實驗參與者抽取肘靜脈血5mL，其中10名治療組OSAHS患者在CPAP治療1晚后清晨再次在空腹狀態(tài)下進行抽血，于肘靜脈處抽取靜脈血5mL。將抽取的標本于離心機以轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘 ，取部分上層血清存放在EP管，存放于-80℃冰箱保存，待進行統(tǒng)一測定。試劑選用南京金益柏生物科技有限公司提供的8-iso-PG及8-OhdG Elisa試劑盒對血清進行酶聯(lián)免疫吸附法，測定血清8-OHdG、8-iso-PG標記物水平。

五、統(tǒng)計學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0版本統(tǒng)計軟件進行分析。治療組與正常對照組間血清濃度比較采用獨立樣本T檢驗，治療組治療前、后血清濃度的比較采用配對T檢驗。所有的計量資料以均數(shù)±標準差表示，P值小于0.05時視為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、OSAHS組和非OSAHS組各指標比較

OSAHS組患者血清8-isoPG、8-OHdG水平高于非OSAHS組(其中Plt;0.05),(見表1)。

二、OSAHS治療前后各指標比較

經(jīng)呼吸機治療后次日OSAHS組患者血8-isoPG、8-OHdG較治療前血清中濃度水平值沒有顯著差異(其中Pgt;0.05)。(見表2)。

表1 OSAHS組與非OSAHS組血清8-iso-PG及8-OHdG濃度比較

表2 OSAHS組持續(xù)正壓通氣治療1晚前后血清8-iso-PG及8-OHdG濃度比較

討 論

OSAHS患者因其體內(nèi)存在夜間反復(fù)的缺氧-復(fù)氧特征性過程，這種間歇性低氧類似于缺血再灌注損傷，這個過程能夠使患者機體內(nèi)產(chǎn)生大量活性氧，導(dǎo)致氧化/抗氧化系統(tǒng)的失衡，致使機體中發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)?；钚匝蹩梢詫?dǎo)致脫氧核糖核酸的損傷，比如DNA鏈斷裂，堿基修飾以及DNA與蛋白質(zhì)交聯(lián)，ROS在堿基修飾后產(chǎn)生了8-OHdG，這種修飾后的DNA堿基被認為是一種非常穩(wěn)定可靠的組織及尿液中氧化應(yīng)激標記物[2]。8-異前列腺素為脂質(zhì)過氧化作用的產(chǎn)物，被認為是反映機體氧化應(yīng)激反應(yīng)的最佳標記物之一。本研究中選取8-異前列腺素(8-isoprostane)及8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)這兩種標記物作為氧化應(yīng)激反應(yīng)標記物，比較10例OSAHS患者與非OSAHS患者上述標記物的血清濃度水平，并對10例OSAHS患者進行1晚的CPAP治療，對比治療前后上述氧化應(yīng)激標志物(8-iso-PG以及8-OHdG)血清濃度的變化。本研究顯示，OSAHS組較非OSAHS組血清8-異前列腺素及8-羥基脫氧鳥苷濃度水平明顯升高(Plt;0.05)。高愛武等人研究發(fā)現(xiàn)，OSAHS病人血清中8-OHdG的水平明顯高于對照組，且OSAHS患者血清8-OHdG濃度與夜間最低血氧飽和度(SaO2)及平均最低SaO2呈負相關(guān)，與其AHI、血氧飽和度小于90%的時長占總睡眠時長的百分比、睡眠中呼吸障礙事件發(fā)生的總時長占總時長的百分值呈正相關(guān)[3]。Yamauchi在一項128名OSAHS患者研究中發(fā)現(xiàn)，嚴重的OSAHS患者(58例)尿液中8-OHdG較非嚴重OSAHS患者(70例)也有明顯的升高[4]。錢進等人發(fā)現(xiàn)，OSAHS病人睡眠前及睡眠后血清8-iso-PG濃度水平較正常組均顯著增高[5]。本研究結(jié)果與以往研究相似，OSAHS組患者較非OSAHS患者血清8-異前列腺素及8-OHdG明顯增高，表明OSAHS患者因夜間間斷缺氧-復(fù)氧過程，使體內(nèi)氧自由基增多，而機體對其清除能力下降，存在氧化應(yīng)激反應(yīng)。

同時經(jīng)過1晚的CPAP治療之后，OSAHS患者血清8-異前列腺素及8-OHdG兩者濃度無顯著性降低(Plt;0.05)，治療后患者血清8-異前列腺素(679.67±382.59ng/mL)較治療前(710.77±551.08ng/mL)均值有所下降,治療后患者血清8-羥基脫氧鳥苷濃度(216.95±116.19ng/mL)較治療前(237.70±171.45 ng/mL)均值也有所下降。Ben MD發(fā)現(xiàn)6個月CPAP治療后患者尿液中8-isoPG以及血清NOX2有著明顯下降，認為OSAHS能夠使患者體內(nèi)氧化應(yīng)激水平提高，CPAP治療后能夠反轉(zhuǎn)此種情況[6]。Karamanl H同樣發(fā)現(xiàn)3個月CPAP治療之后患者血清中8-iso-PG水平較治療前有所下降[7]。李永霞等人研究報道，在OSAHS患者血清以及呼出氣冷凝液，8異前列腺素濃度與其疾病病情嚴重程度密切相關(guān)，，有效治療后能明顯降低這些標記物水平，進一步地證明了在OSAHS患者中存在呼吸道局部和全身的炎癥以及氧化應(yīng)激反應(yīng)[8]。在本研究中，CPAP治療后患者血清中8-異前列腺素及8-OHdG濃度變化雖無統(tǒng)計學(xué)意義，但其以上標記物血清濃度較治療前有所下降。同時，考慮到其理論依據(jù)可能與患者在短暫的CPAP治療后，一方面短暫的CPAP治療后，對患者的缺氧-復(fù)氧過程有一定的改善，而另一方面，患者的氣道高反應(yīng)性增加，反復(fù)缺氧-復(fù)氧以及對CPAP治療適應(yīng)過程又會加重其氧化應(yīng)激水平。

本研究因CPAP治療時長較短，入組人數(shù)較少，且未進行OSAHS患者嚴重程度分級以分析OSAHS嚴重程度與OSAHS患者上述指標血清濃度的相關(guān)性分析，以及沒有將OSAHS病人血清中8-異前列腺素、8-羥基脫氧鳥苷濃度水平與其疾病嚴重程度指標(AHI、ESS評分、最長窒息時長、最低SaO2以及平均最低SaO2等)進行相關(guān)性分析。出現(xiàn)這樣的結(jié)果，可能與我們的研究CPAP治療時間短、樣本量較少、患者治療依從性差別、研究異質(zhì)性等有關(guān)。今后研究可以擴大樣本量，進行不同時相CPAP治療后相關(guān)標記物的檢測，以便明確CPAP治療的有效時間長度。

[1] 阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南(基層版)寫作組.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南(基層版)[S].中華全科醫(yī)師雜志,2015,14(7):509-515.

[2] Cooke MS,Evans MD,Dizdaroglu M,et al.Oxidative DNA damage: mechanisms, mutation, and disease[J].FASEB J,2003,17(10):1195-1214.

[3] 高愛武，平芬，韓書芝，等.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清8-OHdG水平的變化[J].河北醫(yī)藥，2009,31(7):826-827.

[4] Yamauchi M,Nakano H,Maekawa J,et al.Oxidative Stress in Obstructive Sleep Apnea[J].Chest,2005,127(5):1674-1679.

[5] 錢進,馬曉蓉,潘磊,等.持續(xù)氣道正壓通氣治療對阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者8-異前列腺素和超敏C反應(yīng)蛋白的影響[J].中華內(nèi)科雜志,2015,54(7):633-637.

[6] Del Ben M,Fabiani M,Loffredo L,et al.Oxidative stress mediated arterial dysfunction in patients with obstructive sleep apnoea and the effect of continuous positive airway pressure treatment[J].BMC Pulm Med,2012,12:36.

[7] Karamanl H,?zol D,Ugur KS,et al.Influence of CPAP treatment on airway and systemic inflammation in OSAS patients[J].Sleep Breath,2014,18(2):251-256.

[8] Li Y,Chongsuvivatwong V,Geater A,et al.Exhaled breath condensate cytokine level as a diagnostic tool for obstructive sleep apnea syndrome[J].Sleep Med,2009,10(1):95-103.

EffectofCPAPtherapyonserumlevelof8-isoprostaneand8-OHdGinpatientswithOSAHS

WUSi-min,HEXiao-jie,YANGYuan,LIHui,SUNLu,LIYong-xia
RespiratoryDepartment,theSecondAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity,Kunming,Yunnan650101,China

ObjectiveTo observe the changes of serum 8-isoprostane and serum 8-OHdG levels in patients with OSAHS, and to compare the effect of CPAP intervention on the above indexes after the treatment of OSAHS.Methods10 non-OSASH patients were taken as the control group and 10 patients with OSAHS diagnosed by PSG as the experimental group. ① The difference of serum 8-isoprostane and 8-OHdG levels was compared between the control group and the experimental group. ② The experimental group was treated with 1 night CPAP, and the difference of serum 8-isoprostane and 8-OHdG levels prior treatment and post-treatment was compared.Results① The serum 8-isoprostane and 8-OHdG in the experimental group were higher than those in the control group (Plt;0.05). ② After 1 night treatment, serum 8-isoPG and 8-OHdG of 10 cases of OSAHS patients had no statistical significant difference than before (Pgt;0.05).ConclusionOxidative stress occurs in OSAHS patients, and short-term CPAP of 1 night has no effect on it and it needs long term therapy.

OSAHS; continuous positive airway pressure; oxidative stress

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.12.003

昆明醫(yī)科大學(xué)研究生創(chuàng)新基金(No 2016S32)

650101 云南 昆明，昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科二病區(qū)

李永霞 ，E-mail：lyx6349@qq.com

2017-04-20]