湯英賢 李玉珍 徐令清 溫偉洪 陳凌娟 李介華

2016年某院血培養(yǎng)情況及耐藥性分析

湯英賢 李玉珍 徐令清 溫偉洪 陳凌娟 李介華

目的了解2016年清遠市人民醫(yī)院血培養(yǎng)常見病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法使用BD BACTECTM FX全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)對10 889份臨床采集的血液進行培養(yǎng)，陽性標本采用BD Phoenix 100全自動細菌鑒定藥敏檢測系統(tǒng)進行鑒定及藥敏分析，耐藥性分析采用WHONET 5.6軟件統(tǒng)計。結果10 889份血培養(yǎng)標本中檢測陽性為952份，總陽性率8.74%；剔除同一患者多次培養(yǎng)重復分離株，陽性標本為542份，其中革蘭陽性菌183株，革蘭陰性菌321株，真菌38株。常見的病原菌依次為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、和銅綠假單胞菌。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對美羅培南、亞胺培南和復方新諾明的敏感性為100%；耐藥性排名前四位的抗生素分別為氨芐西林、哌拉西林、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦；銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的敏感性均大于90%；金黃色葡萄球菌對阿莫西林/克拉維酸、利奈唑胺、替考拉寧、萬古霉素的敏感性均為100%，對氨芐西林菌耐藥性為100%、青霉素G耐藥性為97.9%；糞腸球菌屬對替考拉寧、萬古霉素和利奈唑胺敏感性為100%。結論該院血培養(yǎng)陽性率及耐藥率均比較高，血流感染病原菌以腸桿菌科細菌為主，凝固酶陰性的葡萄球菌占比也比較高，馬爾尼菲青霉菌感染應引起重視，臨床應高度重視血培養(yǎng)檢查，加強抗生素的早期、合理使用，減少耐藥菌株的產生。

血培養(yǎng)；病原菌；耐藥性

血流感染包括菌血癥和敗血癥，是致病菌或條件致病菌侵入血液中生長繁殖并釋放毒素和代謝產物而引起的急性重癥感染性疾病，其發(fā)病率和致死率均較高[1]。早期及時有效的抗菌治療，對于降低發(fā)病率、病死率具有極為重要的價值。因而進行血培養(yǎng)標本分析及研究其耐藥情況，有助于初始治療時選用恰當?shù)目股?。血培養(yǎng)是判斷患者血流感染的金標準[2]。本研究對清遠市人民醫(yī)院2016年臨床采集的10 889份血培養(yǎng)標本中分離的542份菌株進行分析，為臨床早期、合理使用抗生素提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源收集 2016年全年清遠市人民醫(yī)院門診與住院患者送檢的10 889份血培養(yǎng)標本。

1.2 儀器與試劑使用BD BACTECTM FX全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)及配套血培養(yǎng)瓶。細菌鑒定藥敏采用BD全自動快速生物質譜檢測系統(tǒng)IVD MALDI Biotyper和BD Phoenix 100全自動細菌鑒定藥敏檢測系統(tǒng)及3種獨立的鑒定藥敏復合板條，即革蘭陽性鑒定藥敏復合板條、革蘭陰性鑒定藥敏復合板條和鏈球菌鑒定藥敏復合板條。真菌鑒定采用梅里埃診斷產品（上海）有限公司產品 API20CAux。藥敏紙片為英國Oxoid公司產品。培養(yǎng)基選用鄭州安圖生物工程股份有限公司生產。

1.3 質控菌株大腸埃希菌ATCC25922，金黃色葡萄球菌ATCC29213，銅綠假單胞菌ATCC27853和糞腸球菌ATCC29212均購自衛(wèi)生部臨檢中心。

1.4 檢查方法參照《血培養(yǎng)檢測規(guī)范化操作》[3]進行標本的正確采集，成人8～10 ml分別注入美國BD公司配套成人樹脂需氧瓶和厭氧瓶，兒童1～3 ml注入兒童樹脂培養(yǎng)瓶。放入BD BACTECTM FX全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)進行監(jiān)測。陽性報警后立即取出，分別接種于血平板、巧克力平板和沙保氏平板，若為厭氧瓶報陽分別轉種相應平板做需氧和厭氧培養(yǎng)。35 ℃培養(yǎng)24 h后，根據(jù)革蘭染色結果選用相應的鑒定藥敏復合板條進行細菌的鑒定藥敏試驗。細菌菌譜及耐藥性分析采用 WHONET 5.6軟件進行處理。

2 結果

2.1 病原菌分布10 889份血培養(yǎng)標本中檢測陽性為952份，總陽性率8.74%。剔除同一患者多次培養(yǎng)重復分離株，陽性為 542份菌株，其中革蘭陽性菌183株，占33.76%；革蘭陰性菌321株，占59.23%；真菌38株，占7.01%，其中馬爾尼菲青霉菌占2.58%，專性厭氧菌占0.92%。由表1可以看出，常見的病原菌依次為大腸埃希菌（32.10%）、凝固酶陰性葡萄球菌（11.62%）、金黃色葡萄球菌（9.23%）、肺炎克雷伯菌（9.04%）和銅綠假單胞菌（4.98%）。

表1 542株病原菌的種類及構成比

2.2 革蘭陰性菌耐藥性分析由表2可知，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對美羅培南、亞胺培南和復方新諾明的敏感性為100%，耐藥性排名前四位的抗生素分別為氨芐西林、哌拉西林、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦，銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的敏感性均大于90%。

2.3 革蘭陽性菌耐藥性分析金黃色葡萄球菌對阿莫西林/克拉維酸、利奈唑胺、替考拉寧、萬古霉素的敏感性均為100%，對氨芐西林菌耐藥性為100%、青霉素G耐藥性為97.9%；凝固酶陰性葡萄球菌對氨芐西林和青霉素G有較高的耐藥性，而對利奈唑胺、替考拉寧和萬古霉素的敏感性均為100%；腸球菌屬對氨芐西林、利奈唑胺、青霉素G、替考拉寧、萬古霉素敏感性均為100%。

表2 革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

表3 革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

2.4 真菌耐藥性分析見表4。

表4 真菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

3 討論

血流感染是一種嚴重的全身感染性疾病，可引起患者發(fā)熱、彌散性血管內凝血（DIC）、休克等嚴重后果[4]，如果診治不及時可威脅患者生命，病死率較高。本研究結果顯示，2016年該院血培養(yǎng)分離病原菌以革蘭陰性菌為主，分離排名前五位的病原菌分別為大腸埃希菌（32.10%）、凝固酶陰性葡萄球菌（11.62%）、金黃色葡萄球菌（9.23%）、肺炎克雷伯菌（9.04%）和銅綠假單胞菌（4.98%）。血培養(yǎng)病原菌譜與國內的一些監(jiān)測報道大致相似[5]。凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率也比較高，此類菌群常常作為污染菌但有時也可成為致病菌，為導管相關性血流感染的病原菌。對于血培養(yǎng)檢測出的病原菌是否為真正的致病菌，還需要結合患者具體的臨床治療和病原菌進行綜合分析。

根據(jù)藥敏結果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對美羅培南、亞胺培南和復方新諾明的敏感性為100%；耐藥性排名前四位抗生素分別為氨芐西林、哌拉西林、四環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦，但隨著碳青霉烯類藥物的廣泛使用，其他標本類別中已發(fā)現(xiàn)碳青霉烯類藥物耐藥的腸桿科細菌。本研究培養(yǎng)出的革蘭陽性菌主要為凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和糞腸球菌，而金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率遠低于2011年CHINET中國細菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)血培養(yǎng)檢出率的 42.5%和68.0%[5]。金黃色葡萄球菌屬對阿莫西林/克拉維酸、萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的敏感性為100%，但據(jù)報道在日本、美國等已發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的葡萄球菌[6]。對氨芐西林和青霉素G的耐藥性均高于95%以上，給臨床經驗用藥提供參考。腸球菌屬主要是糞腸球菌，目前還未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的腸球菌屬。

研究中還出現(xiàn)了本市的第1例布魯菌感染病例，為感染性發(fā)熱就診患者，至今已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)本菌感染病例，疾病防控方面應引起重視。布魯菌是一類人畜共患感染性疾病的病原菌，臨床表現(xiàn)為反復發(fā)熱、關節(jié)痛、全身乏力，通過空氣傳播比接觸傳播更為重要。目前，厭氧培養(yǎng)技術在臨床檢驗中普遍得到開展，本研究還發(fā)現(xiàn)5例專性厭氧菌血流感染病例，其在臨床非常普遍，可發(fā)生于人體的各個部位，遍及臨床各科。據(jù)統(tǒng)計[7]，約60%的臨床感染均有厭氧菌參與。因此，臨床對于感染標本應重視厭氧菌的檢出情況，尤其對于疑似為感染而常規(guī)細菌培養(yǎng)的陰性病例，應嚴格進行厭氧菌的分離培養(yǎng)與鑒定。

隨著現(xiàn)代醫(yī)學的快速發(fā)展，侵入性治療等技術的開展和抗菌藥物的廣泛使用，血流感染率呈不斷上升趨勢，因此臨床應嚴格按照血培養(yǎng)檢測規(guī)范化操作執(zhí)行，加強抗生素的早期、合理使用，減少耐藥菌株的產生。

[1] 儲新民,孔建新.某三甲醫(yī)院2010年血培養(yǎng)標本中細菌分布及耐藥性分析[J].臨床輸血與檢驗,2012,14(3):208-211.

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10.12010/j.issn.1673-5846.2017.11.005

清遠市人民醫(yī)院檢驗科，廣東清遠 511500

湯英賢（1984.6-），本科學歷，主管檢驗師。研究方向：主要從事微生物方面研究。E-mail：224841975@qq.com