王 加，張炳峰，婁鑒芳

(南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)部，南京210029)

非濃縮尿蛋白電泳在原發(fā)性高血壓腎損傷中的診斷價(jià)值

王 加，張炳峰，婁鑒芳*

(南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)部，南京210029)

原發(fā)性高血壓是常見的心血管疾病，腎臟為最常受累的靶器官之一，高血壓累及腎臟的最初癥狀為輕度的蛋白尿[1]。臨床上腎臟損傷的金標(biāo)準(zhǔn)是活檢組織病理分型，但具有一定的創(chuàng)傷性，經(jīng)過長期臨床研究證實(shí)，檢測尿中分子量不同的蛋白質(zhì)成分及水平，能夠間接地反映腎臟損傷的部位和程度。十二烷基磺酸鈉-瓊脂糖凝膠(Sodium dodecyl sulphat-agarose gel electrophoresis,SDS-AGE)非濃縮尿蛋白電泳，敏感性高并能判斷尿蛋白的類型，已廣泛應(yīng)用于臨床上對(duì)腎病的診斷[2,3]。尿微量白蛋白(uALB)是早期腎損傷的敏感指標(biāo)[4-6]，也是高血壓患者亞臨床心血管病變的早期標(biāo)志，本研究通過對(duì)原發(fā)性高血壓患者行SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳分析，并與uALB進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)其對(duì)原發(fā)性高血壓腎損傷的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2016年3月-2016年8月在南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的原發(fā)性高血壓患者57例，排除糖尿病及自身免疫病等累及腎臟的疾病，參照《中國高血壓防治指南》(2005修訂版)，根據(jù)原發(fā)性高血壓腎損害的診斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合病史、靶器官受損情況及尿蛋白定性結(jié)果分為兩組：(1) 腎臟損傷組，28例，其中男性14例，女性14例，年齡41-85歲，中位年齡62(41-85)歲。(2) 無腎臟損傷組，29例，其中男性15例，女性14例，年齡36-80歲，中位年齡59(36-80)歲。

1.2主要試劑SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳檢測為法國Sebia Hydrasys自動(dòng)電泳分析儀原裝配套試劑。uALB檢測為美國西門子DCA-Vantage分析儀原裝配套試劑。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本處理 收集新鮮晨尿10 ml。

1.3.2尿蛋白電泳的檢測 在20μl SDS稀釋液中加入80 μl尿液，充分混勻后吸取5 μl于凝膠片的加樣槽中，裝上緩沖條，電泳、烘片、染色、脫色和固定后，掃描并報(bào)告結(jié)果。

1.3.3uALB的檢測 測定原理為免疫比濁法，使用DCA-Vantage分析儀，嚴(yán)格按照儀器和試劑盒說明書進(jìn)行操作。儀器檢測最高限為300 mg/L，超過線性范圍的標(biāo)本需稀釋。

2 結(jié)果

2.1對(duì)腎臟損傷組和無腎臟損傷組進(jìn)行SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳檢測后，分為5組，未檢出、單純性、腎小管性、腎小球性和混合性蛋白尿。腎臟損傷組患者尿蛋白電泳結(jié)果均為陽性，以混合性蛋白尿?yàn)橹鳎粺o腎臟損傷組患者部分檢出少量單一的白蛋白帶，為單純性蛋白尿，有2例為可見低分子量蛋白的腎小管蛋白尿。兩組高血壓患者尿蛋白電泳檢測結(jié)果見表1。

表1 兩組高血壓患者尿蛋白電泳檢測結(jié)果(%)

2.2SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳與uALB的關(guān)系單純性、腎小球性、腎小管性和混合性這四種類型蛋白尿患者uALB定量水平總體不同。經(jīng)兩兩比較，單純性蛋白尿uALB水平最低(20.6±5.3)mg/L，明顯低于其余三種類型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)；腎小管性蛋白尿uALB水平(218±81.9)mg/L，與其余三種類型相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)，腎小球性蛋白尿和混合型蛋白尿的uALB水平相比，無差異(Pgt;0.05)，見表2。

表2 四種類型蛋白尿患者uALB水平

注：與腎小球性、腎小管性和混合性蛋白尿比較，*Plt;0.05 與腎小球性、單純性和混合性蛋白尿比較，ΔPlt;0.05。

3 討論

近年來，我國因高血壓腎臟損害而進(jìn)入慢性腎功能不全的患者逐年增多[7]。原發(fā)性高血壓腎臟損傷是一個(gè)長期的進(jìn)行性過程，生理?xiàng)l件下，尿液內(nèi)蛋白含量甚微，血壓高導(dǎo)致腎有效濾過壓增高，血流量增加致使腎小球高濾過性損害，腎小球?yàn)V過膜通透性增加，漏出蛋白增多，同時(shí)腎小管重吸收功能受損，對(duì)漏出蛋白重吸收減低，即產(chǎn)生蛋白尿。因此蛋白尿是原發(fā)性高血壓出現(xiàn)腎臟損傷的重要表現(xiàn)之一，而早期發(fā)現(xiàn)腎損害并進(jìn)行合理治療，可有效延緩腎病進(jìn)展。

SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳，能夠根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的不同，區(qū)分出單一的白蛋白帶、中高分子量蛋白區(qū)帶、低分子量蛋白區(qū)帶和大中小分子量混合性蛋白區(qū)帶。單一的白蛋白帶為單純性蛋白尿，多為生理性蛋白尿或者腎小球輕微病變；中高分子量蛋白區(qū)帶反映了腎小球的病變，主要為白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白和IgG等；低分子量蛋白區(qū)帶見于腎小管病變，標(biāo)志性蛋白有α1-微球蛋白、β2-微球蛋白和視黃醇結(jié)合蛋白等；混合性蛋白尿則提示腎小球和腎小管均有損傷。腎臟損傷組患者混合性蛋白尿占57.2%，說明高血壓患者有明確腎臟靶器官受損時(shí)，大部分小球和小管均已受累。無腎臟損傷組患者經(jīng)SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳，部分檢出少量單一的白蛋白帶，為單純性蛋白尿，此外還見到2例腎小管蛋白尿，低分子量的蛋白在尿常規(guī)定性檢測中往往是陰性或者是弱陽性，這種損害具有極大的隱蔽性[8]。SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳可較直觀地反映腎損傷的部位，正確判斷蛋白尿性質(zhì)，來源和了解腎臟的損傷程度。

本研究將SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳與uALB定量比較分析，單純性蛋白尿的uALB水平明顯最低，腎小球和混合性蛋白尿的uALB水平較高。uALB是帶負(fù)電荷的中分子量蛋白，當(dāng)腎小球?yàn)V過屏障受損時(shí)，尿中uALB超出腎小管吸收能力或者腎小管功能下降時(shí)，uALB含量升高。腎小管性蛋白尿是以低分子量蛋白為主，檢測到的uALB水平要低于腎小球和混合性蛋白尿，而有研究表明，腎小管性蛋白尿與混合性蛋白尿腎損傷程度都較高[9,10]，由此可見，尿蛋白的組成成分比尿蛋白量的多少更能反應(yīng)腎臟病變的廣泛性及疾病本身的嚴(yán)重程度，腎功能損害程度與蛋白質(zhì)分子量更具有相關(guān)性。uALB能提示原發(fā)性高血壓引起的腎臟早期損害，尿蛋白電泳則更能準(zhǔn)確判斷腎臟損害程度。

SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳方法簡單，快速，能區(qū)別尿蛋白類型，反映尿蛋白組成，對(duì)及時(shí)診斷高血壓腎病有重要臨床參考價(jià)值，為臨床采取干預(yù)措施，及時(shí)治療，延緩病情發(fā)展提供了時(shí)機(jī)。

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1007-4287(2017)11-1980-02

江蘇省實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室基金 ( XK 201114)

*通訊作者

王加(1982-)，女，主管技師，碩士研究生，研究方向：臨床生化診斷。

2016-12-20)