汪 璐，曲遠(yuǎn)青

(成都軍區(qū)總醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 成都610038)

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥監(jiān)測(cè)

汪 璐，曲遠(yuǎn)青

(成都軍區(qū)總醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 成都610038)

目的研究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供臨床參考。方法采用法國(guó)生物梅利埃VITEK2COMPACT 全自動(dòng)微生物鑒定分析儀對(duì)2016年1月到2016年12月我院臨床各類(lèi)標(biāo)本分離的大腸埃希菌及肺炎克雷伯進(jìn)行鑒定及藥敏分析。結(jié)果1920株大腸埃希菌檢出最多的標(biāo)本分別為中段尿(38.28%)，痰液(29.11%)，膿液(11.15%)，1920株大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性株943株，陽(yáng)性率49.11%，其中以積液ESBLs陽(yáng)性率(64.44%)、創(chuàng)面分泌物ESBLs陽(yáng)性率(62.50%)較高；1236株肺炎克雷伯菌檢出最多的標(biāo)本分別為痰液(32.85%)，咽拭子(26.38%)，膿液(15.86%)，1236株肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株549株，陽(yáng)性率44.42%，其中以血液ESBLs陽(yáng)性率(57.45%)、積液ESBLs陽(yáng)性率(50.00%)較高。大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性株科室分布以泌尿科(22.69%)、ICU(19.62%)、腫瘤科(12.83%)較高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸內(nèi)科(30.05%)、泌尿科(19.67%)、ICU(15.85%)較高。耐藥分析：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株對(duì)阿米卡星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐藥率均高于ESBLs陰性株，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。結(jié)論腸桿菌科ESBLs陽(yáng)性菌株的產(chǎn)生、耐藥率上升以及多重交叉耐藥的普遍性給臨床的治療帶來(lái)極大的困難，抗生素的合理使用有重要的臨床意義。

大腸埃希菌；肺炎克雷伯菌；分布；耐藥

(ChinJLabDiagn,2017,21:1893)

大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌均屬腸桿菌科，也是常見(jiàn)的臨床分離菌株，尤其在醫(yī)院感染致病菌中兩種菌株占較大比重[1]。由于抗生素的不合理應(yīng)用，腸桿菌科主導(dǎo)耐藥模式也發(fā)生較大轉(zhuǎn)變，外排泵機(jī)制逐漸轉(zhuǎn)向超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)機(jī)制[2,3]。ESBLs可在菌株間傳遞等特質(zhì)大幅提高了醫(yī)院感染的控制困難性。本研究回顧性分析2016年1月到2017年1月我院臨床各類(lèi)標(biāo)本分離的大腸埃希菌及肺炎克雷伯的檢出情況，旨在了解大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供臨床參考。

1 材料與方法

1.1菌株來(lái)源

菌株來(lái)源于2016年1月到2016年12月我院住院病人送檢的各類(lèi)標(biāo)本(尿液、痰標(biāo)本、拭子、血液、積液、膿液等)，共檢出大腸埃希菌1920株、肺炎克雷伯1236株。

1.2培養(yǎng)鑒定

各類(lèi)標(biāo)本采集、接種嚴(yán)格按第三版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行，標(biāo)本接種于血瓊脂培養(yǎng)基及麥康凱培養(yǎng)基，35℃培養(yǎng)18-24 h，進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)，培養(yǎng)基由鄭州安圖生物有限公司提供。細(xì)菌鑒定藥敏分析采用法國(guó)生物梅利埃VITEK2COMPACT 全自動(dòng)微生物鑒定藥敏儀，使用配套試劑，ESBLs檢測(cè)采用美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)NCCLS推薦的K-B法，藥物紙片為英國(guó)Oxid公司提供，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株：大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC70603，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS22.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，率比較采用卡方檢驗(yàn)，以Plt;0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，藥敏檢測(cè)數(shù)據(jù)應(yīng)用 WHONET5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.11920株大腸埃希菌及1236株肺炎克雷伯菌來(lái)源及構(gòu)成比

1920株大腸埃希菌檢出最多的標(biāo)本分別為中段尿(38.28%)，痰液(29.11%)，膿液(11.15%)檢出較多，1920株大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性株943株，陽(yáng)性率49.11%，其中以積液ESBLs陽(yáng)性率(64.44%)、創(chuàng)面分泌物ESBLs陽(yáng)性率(62.50%)較高。1236株肺炎克雷伯菌檢出最多的標(biāo)本分別為痰液(32.85%)，咽拭子(26.38%)，膿液(15.86%)，1236株肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株549株，陽(yáng)性率44.42%，其中以血液ESBLs陽(yáng)性率(57.45%)、積液ESBLs陽(yáng)性率(50.00%)較高。見(jiàn)表1。

表1 1920株大腸埃希菌及1236株肺炎克雷伯菌來(lái)源及構(gòu)成比(n，%)

2.2大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株科室分布

大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性株科室分布以泌尿科(22.69%)、ICU(19.62%)、腫瘤科(12.83%)較高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸內(nèi)科(30.05%)、泌尿科(19.67%)、ICU(15.85%)較高。見(jiàn)表2。

2.3大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥分析

大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥分析見(jiàn)表3，經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株對(duì)阿米卡星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐藥率均高于ESBLs陰性株，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。

表2 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株科室分布(n，%)

表3 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥率分析(n，%)

注:*Plt;0.05.

3 討論

在臨床治療過(guò)程中因抗生素的不合理使用所導(dǎo)致的耐藥問(wèn)題正日趨嚴(yán)重。致命性耐藥菌株在全世界范圍內(nèi)均多有報(bào)道[4]，尤其部分發(fā)展中國(guó)家抗生素耐藥性問(wèn)題蔓延迅速，其產(chǎn)生因素極為復(fù)雜且并不局限于臨床抗生素的濫用，部分畜牧業(yè)利用抗生素來(lái)促進(jìn)牲畜的生長(zhǎng)，或某些國(guó)家(例如印度)的藥物生產(chǎn)廠商將抗生素釋放到廢水之中導(dǎo)致環(huán)境的惡化[5,6]。抗生素使用的監(jiān)管已刻不容緩。ESBLs為一種細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)可水解和滅活諸如頭孢菌素類(lèi)、青霉素類(lèi)及氨曲南等單酰胺類(lèi)抗菌素為特征的β-內(nèi)酰胺酶，其編碼ESBLs基因可在同種和不同種細(xì)菌間擴(kuò)散，產(chǎn)ESBLs菌株多呈現(xiàn)多重耐藥，由其誘發(fā)的感染極難控制[7]。

產(chǎn)ESBLs菌株以革蘭氏陰性桿菌居多，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌在臨床分離菌株中較為多見(jiàn)。本研究1920株大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs菌株陽(yáng)性率為49.11%，1236株肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株陽(yáng)性率為44.42%，稍高于臨床其他研究所報(bào)道的20%-40%[8,9]，大腸埃希菌引發(fā)的感染高于肺炎克雷伯菌，同時(shí)數(shù)據(jù)也說(shuō)明本院大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌耐藥現(xiàn)象不容樂(lè)觀。大腸埃希菌檢出標(biāo)本主要來(lái)源于中段尿、痰液及膿液，多見(jiàn)于尿路感染、呼吸道感染，與臨床研究相符[10]。肺炎克雷伯菌檢出標(biāo)本則多見(jiàn)于痰液、咽拭子及膿液，多見(jiàn)于下呼吸道感染。大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性株科室分布以泌尿科、ICU、腫瘤科較高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸內(nèi)科、泌尿科、ICU較高。ICU及腫瘤科患者多病情嚴(yán)重、免疫力低下、廣譜抗生素大量使用為發(fā)生醫(yī)院感染的高危人群，醫(yī)院感染發(fā)生率居高不下，醫(yī)院感染的發(fā)生加重了基礎(chǔ)疾病的治療難度，感染也是造成重癥患者死亡的重要因素，泌尿科多侵襲性操作、導(dǎo)尿管的留置(留置導(dǎo)管內(nèi)壁容易形成細(xì)菌生物膜，使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥[11])等，呼吸內(nèi)科患者接觸各類(lèi)病原菌、交叉感染的機(jī)率較高也是造成兩科室ESBLs陽(yáng)性株檢出率較高的重要原因。ESBLs陽(yáng)性質(zhì)粒編碼，傳播方式多種，接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)均可造成耐藥基因的擴(kuò)散[12]，使同種或不同菌種敏感菌變成耐藥菌，另一方面抗生素的選擇作用使得耐藥菌株大量繁殖成為優(yōu)勢(shì)菌群同時(shí)也加快了 細(xì)菌突變的速度產(chǎn)生相應(yīng)耐藥菌株甚至新的耐藥菌株[13]。

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，本研究中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性株耐藥率對(duì)阿米卡星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐藥率均顯著高于ESBLs陰性株，與臨床其他研究相符。據(jù)臨床報(bào)道[14]：ESBLs陽(yáng)性菌株多同時(shí)攜帶其他抗生素如氨基糖苷類(lèi)、磺胺類(lèi)、氟喹諾酮類(lèi)多種耐藥基因，菌株往往呈現(xiàn)多重交叉耐藥。國(guó)外研究顯示[15]：腸桿菌科ESBLs陽(yáng)性菌株產(chǎn)生率與三代頭孢菌素的消費(fèi)量呈現(xiàn)正相關(guān)，減少三代頭孢菌素的使用可減少相應(yīng)腸桿菌科ESBLs陽(yáng)性菌株產(chǎn)生。本研究中大腸埃希菌對(duì)妥布霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星具有較高的耐藥性，肺炎克雷伯菌對(duì)左氧氟沙星、阿米卡星、妥布霉素具有相對(duì)較高的耐藥性，與本院臨床相應(yīng)的經(jīng)驗(yàn)性用藥習(xí)慣相符。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南耐藥情況的出現(xiàn)尤其值得引起臨床重點(diǎn)關(guān)注，在類(lèi)似的國(guó)內(nèi)研究中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南耐藥較少，亞胺培南在臨床仍是治療ESBLs的最后一道防線，其耐藥率上升的危害性不言而喻。腸桿菌科碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥產(chǎn)生機(jī)制多見(jiàn)于AmpC酶過(guò)度表達(dá)聯(lián)合OMP丟失，及PBP對(duì)碳青霉烯類(lèi)親和力的改變[16]。

綜上所述，腸桿菌科ESBLs陽(yáng)性菌株的產(chǎn)生、耐藥率上升以及多重交叉耐藥的普遍性給臨床的治療帶來(lái)極大的困難，抗生素的合理使用有重要的臨床意義。

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ClinicaldistributionanddrugresistancemonitoringofEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniae

WANGLu,QUYuan-qing.

(DepartmentofLaoratoryMedicine,GeneralHospitalofChengduMilitaryCommand,Chengdu610038,China)

ObjectiveTo study the clinical distribution and drug resistance of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae,and provide clinical reference for clinical rational drug use.MethodsThe biological Melly VITEK2COMPACT automatic microorganism analyzer on January 2016 to January 2017 in our hospital all kinds of isolates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were identified and the drug sensitivity analysis.ResultsThe specimens of Escherichia coli was the most of 1920 strains were urine (38.28%),(29.11%) sputum,pus (11.15%) detected more,1920 strains of Escherichia coli Coli ESBLs 943 positive strains,the positive rate was 49.11%,the positive rate of ESBLs effusion (64.44%),the positive rate of wound secretion of ESBLs (62.50%) high; 1236 strains of Klebsiella pneumoniae were detected in most of the specimens were sputum (32.85%),pharynx (26.38%),pus (15.86%),1236 strains of Klebsiella pneumoniae ESBLs 549 positive strains,the positive rate was 44.42%,among which the blood ESBLs positive rate (57.45%),the positive rate of ESBLs (50%).Higher ESBLs positive strains of Escherichia coli; distribution of departments in urology (22.69%),ICU (19.62%),oncology (12.83%) high; Klebsiella pneumoniae clinical distribution in the respiratory department (30.05%),urology (19.67%),ICU (15.85%):high; drug resistance analysis of Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae Klebsiella pneumoniae ESBLs positive strains to Amikacin,ciprofloxacin,levofloxacin,cefepime,cefoperazone sulbactam,piperacillin tazobactam,tobramycin resistance rate was higher than that of ESBLs negative strains,the difference was statistically Significance (Plt;0.05).ConclusionEnterobacteriaceae ESBLs positive strains,the resistant rate of rise and universal multiple cross resistance to clinical treatment brings great difficulties,has important clinical significance in the rational use of antibiotics.

Escherichia coli;Klebsiella pneumoniae;distribution;drug resistance

1007-4287(2017)11-1893-04

R372

A

2017-02-21)