趙春梅

(江蘇省如皋市長江高級中學，江蘇 如皋 226532)

一組關于限制酶試題的解題方法

趙春梅

(江蘇省如皋市長江高級中學，江蘇 如皋 226532)

限制酶主要存在于微生物中.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子.它作用的部位是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵.

高中生物；限制酶

限制酶所識別的序列，無論是6個堿基還是4個堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側的雙鏈DNA上的堿基是反向對稱重復排列的(如右圖).DNA分子經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式——黏性末端和平末端(如下圖).盡管微生物中含有某種限制酶，但它不會使自身的DNA被切斷，并且可以防止外源DNA的入侵.

例1 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選.已知限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-.根據(jù)圖示判斷下列操作正確的是( ).

A．質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割

分析要想正確解答此題，首先要弄清兩個問題：1.兩個標記基因中至少要有一個保持完整性，因為重組質粒要具有標記基因，便于進行篩選；2.限制酶II也能識別限制酶I的識別序列.搞懂上述兩個問題后，下面我們請看：質粒應用限制酶Ⅰ切割，而不能用限制酶Ⅱ切割，因為限制酶Ⅱ將破壞兩個標記基因；目的基因要用限制酶Ⅱ切割，卻不能用限制酶Ⅰ切割，這是由于限制酶Ⅱ能將目的基因完整地切割下來，而限制酶I只能將目的基因的左邊切斷.所以，正確的答案應選A.

例2 限制酶是一種核酸切割酶，可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸序列.下圖為四種限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BgⅢ的辨識序列.箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合?其正確的末端互補序列為何?( ).

A．BamHI和EcoRI；末端互補序列-AATT-

B．BamHI和HindⅢ；末端互補序列-GATC-

C．EcoRI和HindⅢ；末端互補序列-AATT-

D．BamHI和BgⅢ；末端互補序列-GATC-

分析要使兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合，必須使這兩個DNA片段產生相同的黏性末端.從圖中四種限制酶的識別序列和切點位置可判斷出正確答案為D.

[1]黃獻勇.高中生物課課堂教學有效性的探討[J]. 高中生學習(師者),2014(11).

[責任編輯：季春陽]

G632

A

1008-0333(2017)25-0098-01

2017-07-01

趙春梅，江蘇省如皋市長江高級中學，高中生物，中學一級教師，從事高中生物教學研究.