趙春梅
(江蘇省如皋市長江高級中學,江蘇 如皋 226532)
一組關于限制酶試題的解題方法
趙春梅
(江蘇省如皋市長江高級中學,江蘇 如皋 226532)
限制酶主要存在于微生物中.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點上切割DNA分子.它作用的部位是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵.
高中生物;限制酶
限制酶所識別的序列,無論是6個堿基還是4個堿基,都可以找到一條中心軸線,中軸線兩側的雙鏈DNA上的堿基是反向對稱重復排列的(如右圖).DNA分子經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式——黏性末端和平末端(如下圖).盡管微生物中含有某種限制酶,但它不會使自身的DNA被切斷,并且可以防止外源DNA的入侵.
例1 基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒,便于重組和篩選.已知限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-.根據(jù)圖示判斷下列操作正確的是( ).
A.質粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割
B.質粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割
C.目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割
D.目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割
分析要想正確解答此題,首先要弄清兩個問題:1.兩個標記基因中至少要有一個保持完整性,因為重組質粒要具有標記基因,便于進行篩選;2.限制酶II也能識別限制酶I的識別序列.搞懂上述兩個問題后,下面我們請看:質粒應用限制酶Ⅰ切割,而不能用限制酶Ⅱ切割,因為限制酶Ⅱ將破壞兩個標記基因;目的基因要用限制酶Ⅱ切割,卻不能用限制酶Ⅰ切割,這是由于限制酶Ⅱ能將目的基因完整地切割下來,而限制酶I只能將目的基因的左邊切斷.所以,正確的答案應選A.
例2 限制酶是一種核酸切割酶,可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸序列.下圖為四種限制酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BgⅢ的辨識序列.箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合?其正確的末端互補序列為何?( ).
A.BamHI和EcoRI;末端互補序列-AATT-
B.BamHI和HindⅢ;末端互補序列-GATC-
C.EcoRI和HindⅢ;末端互補序列-AATT-
D.BamHI和BgⅢ;末端互補序列-GATC-
分析要使兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合,必須使這兩個DNA片段產生相同的黏性末端.從圖中四種限制酶的識別序列和切點位置可判斷出正確答案為D.
[1]黃獻勇.高中生物課課堂教學有效性的探討[J]. 高中生學習(師者),2014(11).
[責任編輯:季春陽]
G632
A
1008-0333(2017)25-0098-01
2017-07-01
趙春梅,江蘇省如皋市長江高級中學,高中生物,中學一級教師,從事高中生物教學研究.