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(藥食同源植物資源開(kāi)發(fā)四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川抗菌素工業(yè)研究所,成都大學(xué)，四川成都 610052)

墊狀卷柏總黃酮的 抗氧化和抗腫瘤活性

鄭瑞鳳,劉嵬,梁立,楊晨,顏軍,茍小軍,何鋼*

(藥食同源植物資源開(kāi)發(fā)四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川抗菌素工業(yè)研究所,成都大學(xué)，四川成都 610052)

目的：研究墊狀卷柏總黃酮的抗氧化能力,以及對(duì)人宮頸癌細(xì)胞Hela、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、人前列腺癌細(xì)胞PC-3M的生長(zhǎng)抑制作用。方法：采用Fenton法、鄰苯三酚自氧化法、DPPH法和還原力測(cè)定法評(píng)價(jià)墊狀卷柏總黃酮的體外抗氧化能力。CCK-8法檢測(cè)墊狀卷柏總黃酮的抗腫瘤細(xì)胞增殖活性。結(jié)果：在總黃酮質(zhì)量濃度為20～100 μg/mL之間,墊狀卷柏總黃酮對(duì)羥基自由基、超氧陰離子自由基、DPPH自由基的清除率隨總黃酮質(zhì)量濃度升高而增高,半數(shù)清除率EC50分別為111.86、89.24、26.51 μg/mL;對(duì)Hela、PC-3M和MDA-MB-231細(xì)胞的抑制作用在總黃酮質(zhì)量濃度為6.59～79.02 μg/mL范圍內(nèi)均呈劑量依賴性,作用時(shí)間為72 h的抑制率高于48 h的抑制率。結(jié)論：墊狀卷柏總黃酮抗氧化活性作用能力強(qiáng),對(duì)Hela、PC-3M和MDA-MB-231細(xì)胞具有顯著的增殖抑制作用。

墊狀卷柏,總黃酮,抗氧化,腫瘤細(xì)胞,生長(zhǎng)抑制

卷柏(Selaginellatamariscina(Beauv.)Spring)為蕨類植物門卷柏科卷柏屬植物,分布廣泛,我國(guó)約有60～70種[1],四川約有21種[2],常作為藥用的有6種?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2015年版收載了卷柏科植物卷柏或墊狀卷柏。中醫(yī)學(xué)上認(rèn)為卷柏具有活血通經(jīng)之功效,用于經(jīng)閉痛經(jīng),跌撲損傷,癥瘕痞塊;炒炭后可化瘀止血,用于吐血、便血、崩漏、脫肛[3]。卷柏含有豐富的雙黃酮類生物活性物質(zhì),具有抗氧化[4-5]、抗炎[6]、抑菌[7]、抗病毒[8]、抗腫瘤[9-11]、舒張血管[12]等多種藥理活性。

已有研究表明卷柏總黃酮對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞,肝癌Bel-7402細(xì)胞,人肝癌HepG2細(xì)胞,肺癌A549細(xì)胞具有顯著的抑制作用[9-11]。而卷柏總黃酮對(duì)乳腺癌和前列腺癌細(xì)胞的活性研究較少。研究墊狀卷柏總黃酮對(duì)前列腺癌PC-3M細(xì)胞和乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的抑制活性,以及采用體外抗氧化模型評(píng)價(jià)體外抗氧化活性,為墊狀卷柏的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù),尤其在抗氧化劑和抗癌藥物的篩選提供參考。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

墊狀卷柏 成都鐘氏蟲(chóng)草行;PC-3M、Hela細(xì)胞 英國(guó)利物浦大學(xué)柯有強(qiáng)教授實(shí)驗(yàn)室贈(zèng)送;MDA-MB-231細(xì)胞 中國(guó)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究院細(xì)胞庫(kù);蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥99%) 中國(guó)藥品生物制品檢定所;鄰菲羅啉、鄰苯三酚、硫酸亞鐵、雙氧水、三羥甲基氨基甲烷(Tris)、鐵氰化鉀、三氯乙酸、三氯化鐵、噻唑藍(lán)(CCK)、二甲基亞砜(DMSO)、硝酸鋁、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、無(wú)水乙醇 均為分析純，成都市科龍化工試劑廠;PBS緩沖液(pH7.4)、DMEM培養(yǎng)液、RPMI1640培養(yǎng)液 美國(guó)Hyclone公司;胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、0.05%胰酶-EDTA消化液(trypsin-ethylene diamine tetraacetie acid,EDTA)、青霉素、鏈霉素混合液(×100) 美國(guó)Gibco公司;細(xì)胞培養(yǎng)瓶、96孔板、15 mL離心管 美國(guó)Corning公司。

7200型可見(jiàn)光分光光度儀 尤尼柯(上海)儀器有限公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 鞏義市英峪予華儀器廠;電子天平JT202N 上海越平科學(xué)儀器有限公司;臺(tái)式離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;KQ3200超聲波清洗器 北京滬光學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;微型植物式樣粉碎機(jī) 北京中興偉業(yè)儀器有限公司;全自動(dòng)酶標(biāo)儀(EL×800) Bioteck Instruments Inc.;CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱 上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司;超凈工作臺(tái) 蘇州集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 墊狀卷柏總黃酮的制備 將干燥至恒重的墊狀卷柏全草,粉碎過(guò)40目篩,儲(chǔ)存于干燥器中備用。按照實(shí)驗(yàn)室前期研究方法,準(zhǔn)確稱取200 g墊狀卷柏干燥粉末,按料液比(g∶mL=1∶20),用70%乙醇浸提24 h,超聲輔助提取30 min,真空抽濾,濾渣重復(fù)上述操作提取兩次,合并濾液,減壓旋蒸除去乙醇,冷凍干燥得墊狀卷柏總黃酮粉末。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,經(jīng)硝酸鋁顯色法[12],檢測(cè)波長(zhǎng)為512 nm,測(cè)定墊狀卷柏總黃酮質(zhì)量濃度。

1.2.2 清除DPPH自由基能力的測(cè)定 DPPH(二苯代苦味酰基自由基)是一種比較穩(wěn)定的人工合成自由基,現(xiàn)已廣泛的用于提取物[13]、酚類物質(zhì)[14]、多糖類化合物[15]或其它物質(zhì)[16]的抗氧化能力評(píng)價(jià)。根據(jù)對(duì)DPPH自由基的清除能力的原理方法[17-18]評(píng)價(jià)墊狀卷柏總黃酮的體外抗氧化活性。樣品用70%乙醇溶液配制成不同濃度溶液,取1.0 mL樣品溶液、2.0 mL DPPH乙醇溶液和1.0 mL無(wú)水乙醇混合反應(yīng),置于暗處30 min,于波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定吸光度。用樣品乙醇溶液作為樣品顏色空白參比,無(wú)水乙醇為空白對(duì)照。按照同樣方法以同濃度VC做陽(yáng)性對(duì)照。

清除率(%)=A空白對(duì)照-(A樣品-A顏色對(duì)照)/A空白對(duì)照×100

1.2.3 清除超氧陰離子自由基能力的測(cè)定 采用鄰苯三酚自氧化法[19]。于試管中加入5 mL 0.05 mol/L pH8.2的Tris-HCl緩沖液和2 mL蒸餾水,25 ℃水浴20 min后,取出加入不同濃度樣品溶液2 mL,并立即加入3 mmol/L 鄰苯三酚1 mL(在25 ℃水浴中已預(yù)熱),立即混勻,在25 ℃水浴中準(zhǔn)確反應(yīng)4 min后,加入10 mmol/L的HCl溶液1 mL終止反應(yīng),并于320 nm處測(cè)定吸光度。按照同樣方法以同濃度VC做陽(yáng)性對(duì)照。

清除率(%)=A不加樣品時(shí)吸光度-(A樣品吸光度-A不加鄰苯三酚樣品的吸光度)/A不加樣品時(shí)吸光度×100

1.2.4 清除羥基自由基能力的測(cè)定 采用水楊酸法[20],于試管中加入2 mL 9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液和2 mL 9 mmol/L的FeSO4溶液,混勻,再加入2 mL不同濃度樣品溶液和0.2 mL 0.3%的H2O2溶液(以不加H2O2作為顏色空白對(duì)照,以蒸餾水作為空白對(duì)照)于37 ℃反應(yīng)30 min,以去離子水為參比,然后在510 nm波長(zhǎng)下分別測(cè)定吸光度A,按照同樣方法以同濃度VC做陽(yáng)性對(duì)照。

清除率(%)=A空白對(duì)照-(A樣品-A顏色對(duì)照)/A空白對(duì)照×100

1.2.5 墊狀卷柏總黃酮還原力的測(cè)定 參考文獻(xiàn)[21]中的方法,于試管加入不同濃度的樣品溶液2.5 mL,pH6.8的磷酸鹽緩沖液2.5 mL、1% K3Fe(CN)6溶液2.5 mL,并加蒸餾水至10 mL,混合均勻,混合液于50 ℃保溫20 min,再加入2.5 mL 10%的三氯乙酸溶液,混合后3000 r/min 離心10 min。取上清液2.5 mL,加入2.5 mL蒸餾水,加入0.5 mL 0.1% FeCl3溶液,室溫放置10 min,測(cè)定反應(yīng)液在700 nm處的吸光度。

1.2.6 細(xì)胞培養(yǎng) Hela人宮頸癌細(xì)胞[22]用含10%胎牛血清的培養(yǎng)液,100 U/mL青霉素和100 U/mL鏈霉素DMEM高糖培養(yǎng)基,在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng);PC-3M前列腺癌細(xì)胞[23],MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞[24]用含10%胎牛血清,100 U/mL青霉素和100 U/mL鏈霉素的RPMI 1640培養(yǎng)基,在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)。

教師的專業(yè)化發(fā)展始終離不開(kāi)學(xué)校組織的各類培訓(xùn)。本研究對(duì)吉林省4所有代表性的應(yīng)用型本科院校商務(wù)英語(yǔ)教師進(jìn)行了問(wèn)卷調(diào)查，結(jié)合我省具體狀況，總體分析國(guó)內(nèi)同類高校一般情況，首先向被調(diào)查教師解釋問(wèn)卷調(diào)查的目的是為了了解院校商務(wù)英語(yǔ)教師發(fā)展現(xiàn)狀，探尋應(yīng)用型本科院校商務(wù)英語(yǔ)教師專業(yè)化發(fā)展途徑，請(qǐng)他們?nèi)鐚?shí)客觀地回答。共發(fā)放問(wèn)卷 76份，全部回收，有效問(wèn)卷73份。為了消除被調(diào)查者顧慮，調(diào)查問(wèn)卷采取無(wú)記名的方式。在問(wèn)卷調(diào)查的基礎(chǔ)上還對(duì)4所學(xué)校的一些教師進(jìn)行隨機(jī)訪談。因此，該調(diào)查結(jié)果有一定代表性。調(diào)查結(jié)果相對(duì)真實(shí)而客觀，調(diào)查的師資情況見(jiàn)表1。

1.2.7 體外抑制腫瘤細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 采用CCK法進(jìn)行測(cè)定[24-25]。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞Hela、PC-3M、NDA-MB-231細(xì)胞接種于96孔板,使每孔細(xì)胞約為1×104個(gè)/mL,實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組分別加入100 μL細(xì)胞懸浮液,空白組加入100 μL培養(yǎng)基,37 ℃,5% CO2條件下預(yù)培養(yǎng)24 h。加入不同濃度的樣品溶液,每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)復(fù)孔,正常對(duì)照組和空白組分別加入100 μL培養(yǎng)基。繼續(xù)在37 ℃,5% CO2條件下培養(yǎng)48、72 h后,吸棄上清后每孔各加入100 μL培養(yǎng)基和10 μL CCK-8試劑,繼續(xù)在CO2培養(yǎng)箱孵育1 h后取出用酶標(biāo)儀在490 nm處測(cè)定吸光度值。計(jì)算對(duì)癌細(xì)胞的抑制率或細(xì)胞活力。

1.3數(shù)據(jù)處理

所有實(shí)驗(yàn)處理重復(fù)3次,實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,進(jìn)行單因素方差分析,各組間的差異比較采用LSD法,以p<0.05表示差異顯著,p<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1DPPH抗氧化活性

不同濃度的墊狀卷柏總黃酮對(duì)DPPH的清除率結(jié)果見(jiàn)圖1。濃度在20～100 μg/mL范圍內(nèi)其清除能力隨總黃酮濃度的升高而加強(qiáng),而濃度增加為200 μg/mL時(shí),清除率增加不明顯,并趨于平衡,墊狀卷柏和VC的清除率分別為83.42%和94.98%,卷柏總黃酮對(duì)DPPH自由基的半數(shù)清除率EC50為26.51 μg/mL;通過(guò)考察墊狀卷柏總黃酮對(duì)DPPH自由基的清除,表明墊狀卷柏總黃酮有較好的清除能力,可能與總黃酮中的穗花杉雙黃酮化合物有關(guān)[5],有文獻(xiàn)研究報(bào)道墊狀卷柏雙黃酮和穗花杉雙黃酮[26]均可濃度依賴性清除DPPH自由基。

圖1 墊狀卷柏總黃酮對(duì)DPPH自由基清除率測(cè)定結(jié)果Fig.1 Scavenging effects of total flavonoids from selaginella on DPPH free radicals

2.2清除超氧陰離子自由基的能力

超氧陰離子是一類重要的活性氧自由基,可誘導(dǎo)大分子物質(zhì)產(chǎn)生氧化損傷,因此通過(guò)測(cè)定對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用可以評(píng)價(jià)物質(zhì)的抗氧化能力大小。不同濃度的墊狀卷柏總黃酮清除超氧陰離子的作用如圖2所示,在20～100 μg/mL范圍內(nèi),墊狀卷柏總黃酮的清除作用隨濃度增加而增強(qiáng),當(dāng)濃度為200 μg/mL時(shí),VC和墊狀卷柏總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的清除率分別為91.75%和62.5%,卷柏總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的半數(shù)清除率EC50為89.24 μg/mL。

圖2 墊狀卷柏總黃酮對(duì)超氧陰離子 自由基清除率測(cè)定結(jié)果Fig.2 Scavenging effects of total flavonoids from selaginella on superoxide anion free radical

利用Fenton反應(yīng)產(chǎn)生具有高反應(yīng)活性的·OH。如果在體系中含有清除·OH能力的物質(zhì),能與水楊酸競(jìng)爭(zhēng)·OH,使水楊酸捕捉·OH后產(chǎn)生的有色物質(zhì)生成量減少,該物質(zhì)在510 nm 處有最大吸收[15]。不同濃度的墊狀卷柏總黃酮對(duì)羥基自由基的清除作用如圖3所示,總黃酮濃度為20～200 μg/mL的范圍內(nèi),VC和墊狀卷柏總黃酮的清除作用隨濃度的增加而清除活性增強(qiáng),兩者趨勢(shì)基本一致,當(dāng)濃度為200 μg/mL時(shí),VC對(duì)羥基自由基的清除率為91.25%,墊狀卷柏總黃酮的清除能力為64.67%,半數(shù)清除率EC50為111.86 μg/mL。結(jié)果表明墊狀卷柏總黃酮對(duì)羥基自由基的清除能力較強(qiáng)。

圖3 墊狀卷柏總黃酮對(duì)羥基自由基清除率測(cè)定結(jié)果Fig.3 Scavenging effects of total flavonoids from selaginella on hydroxyl radical

2.4還原力測(cè)定

物質(zhì)還原力的原理揭示了待評(píng)價(jià)化合物是電子給予體,它可將Fe3+還原成Fe2+,能與Fe3+形成普魯士藍(lán),在700 nm 處有最大吸收峰,吸光度越大,抗氧化能力越強(qiáng)。表明物質(zhì)的還原能力和其抗氧化能力呈正相關(guān)性,測(cè)定物質(zhì)的還原能力是測(cè)定物質(zhì)抗氧化能力的重要指標(biāo)之一。由圖4所示,在濃度為200 μg/mL時(shí),墊狀卷柏總黃酮和VC的OD值分別為0.913、1.439,表明墊狀卷柏總黃酮有較強(qiáng)的還原能力,還原能力隨總黃酮濃度增加而增強(qiáng),通過(guò)分析計(jì)算墊狀卷柏總黃酮的總還原能力與其濃度呈正相關(guān)性,得到VC和卷柏總黃酮的相關(guān)系數(shù)分別為0.99和0.98。

圖4 墊狀卷柏總黃酮的還原力Fig.4 The reducing power of total flavonoids

2.5對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用

黃酮類化合物發(fā)揮抗腫瘤活性的機(jī)制主要是抑制腫瘤細(xì)胞增殖[27],促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[28-29]等途徑發(fā)揮活性作用。墊狀卷柏總黃酮對(duì)Hela細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞以及MDA-MB231細(xì)胞增殖活力均有明顯的抑制作用,對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的增殖活力抑制具有差異。如圖5所示,墊狀卷柏總黃酮對(duì)不同癌細(xì)胞的抑制作用隨濃度的增加而增加,揭示了在6.59～79.02 μg/mL濃度范圍內(nèi)墊狀卷柏總黃酮對(duì)三種腫瘤細(xì)胞的抑制作用是呈劑量依賴作用,并隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),墊狀卷柏總黃酮對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用是逐漸增強(qiáng)的。如圖6所示,在6.59～131.7 μg/mL范圍內(nèi),卷柏總黃酮對(duì)Hela細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞的增值抑制結(jié)果均是72 h高于48 h的抑制率;對(duì)PC-3M細(xì)胞的抑制作用是在卷柏總黃酮濃度為6.59～13.17 μg/mL范圍內(nèi)是48 h高于72 h,濃度增加為26.34 μg/mL范圍內(nèi)是72 h的抑制作用強(qiáng)于48 h。墊狀卷柏總黃酮對(duì)Hela、PC-3M和MD-MDA-231細(xì)胞作用48 h的半數(shù)抑制率IC50分別為:67.29、150.84、139.55 μg/mL,作用72 h的IC50分別為:28.62、48.60、25.74 μg/mL。

圖5 不同濃度的墊狀卷柏總黃酮 對(duì)腫瘤細(xì)胞在72 h的生長(zhǎng)抑制作用Fig.5 Inhibitory effects of total flavones on the growth of three different cancer cells after 72 h 注:*表示與空白對(duì)照組相比差異顯著(p<0.05); **表示與空白對(duì)照組相比差異極顯著(p<0.01)。

圖6 墊狀卷柏總黃酮對(duì)腫瘤細(xì)胞在48 h 和72 h的生長(zhǎng)抑制作用Fig.6 Inhibitory effects of total flavones on the growth of three different cancer cells after 48 h and 72 h

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)以卷柏總黃酮為研究對(duì)象,采用體外抗氧化模型評(píng)價(jià)墊狀卷柏總黃酮抗氧化能力作用。當(dāng)總黃酮濃度為200 μg/mL,清除羥基自由基、超氧陰離子自由基、DPPH自由基的清除率分別為64.67%、62.5%、83.42%;而卷柏總黃酮對(duì)Fe3+還原能力強(qiáng),當(dāng)濃度為200 μg/mL,吸光度值為0.913。結(jié)果表明卷柏總黃酮對(duì)羥基自由基、超氧陰離子自由基和DPPH自由基均有一定的清除能力,并在一定濃度范圍內(nèi)總黃酮濃度與清除自由基的能力呈正相關(guān)。墊狀卷柏總黃酮表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化能力,可能與穗花衫雙黃酮、羅波斯塔雙黃酮、羅波斯塔-4-甲醚雙黃酮3種活性成分有關(guān),其作用機(jī)制與調(diào)節(jié)黃嘌呤氧化酶[30-31]、脂質(zhì)氧化酶[32]、環(huán)氧化酶Ⅱ[33]活性有關(guān)。

同時(shí),通過(guò)對(duì)抗腫瘤細(xì)胞的增殖作用研究,表明墊狀卷柏總黃酮對(duì)Hela、PC-3M、MDA-MB-231細(xì)胞均表現(xiàn)出較強(qiáng)的增殖抑制活性。隨著墊狀卷柏總黃酮的質(zhì)量濃度增加,作用時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞抑制作用增強(qiáng),墊狀卷柏總黃酮作用72 h時(shí)的抑制能力高于作用時(shí)間為48 h。當(dāng)墊狀卷柏總黃酮濃度為131.7 μg/mL時(shí),作用時(shí)間48 h時(shí)對(duì)Hela、PC-3M和MD-MDA-231細(xì)胞的抑制率分別為:74.95%、43.83%、61.35%,IC50分別為:67.29、150.84、139.55 μg/mL;作用時(shí)間72 h時(shí)對(duì)Hela、PC-3M和MD-MDA-231細(xì)胞的抑制率分別為:81.81%、70.49%、73.38%,IC50分別為:28.62、48.60、25.74 μg/mL。卷柏總黃酮對(duì)PC-3M細(xì)胞的增殖抑制作用,可能與卷柏雙黃酮化合物能夠下調(diào)環(huán)氧化酶-2活性有關(guān)。同時(shí),本實(shí)驗(yàn)對(duì)墊狀卷柏總黃酮對(duì)PC-3M、MDA-MB231、Hela細(xì)胞的增殖作用研究中,發(fā)現(xiàn)了許多關(guān)于腫瘤細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象,未對(duì)其細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡量化,有待今后實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步的研究探討。下一步,我們將通過(guò)分離純化等技術(shù)研究卷柏總黃酮的有效成分,為卷柏總黃酮抗氧化作用和抗癌作用提供理論依據(jù)。

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AntioxidantandantiproliferativeactivitiesoftotalflavonoidsextractedfromSelaginellapulvinata(Hook,etGrev.)Maxim

ZHENGRui-feng,LIUWei,LIANGLi,YANGChen,YANJun,GOUXiao-Jun,HEGang*

(Key Laboratory of Medicinal and Edible Plants Resources Development of Sichuan Education Department, Sichuan Industrial Institute of Antibiotics,Chengdu University,Chengdu 610052,China)

Objective:To explore the antioxidant activity ofSelaginellapulvinata(Hook,et Grev.)Maxim of total flavone and its growth inhibitory effect on HeLla、PC-3M and MDA-MB231 cells. Methods:Fenton reaction,pyrogallol auto-oxidation and DPPH radical-scavenging systems were used for antioxidant evaluation of total flavonoidsinvitro. The reducing power was evaluated by potassium ferricyanide assay. Growth inhibitory effect of total flavonoids on Hela,PC-3M and MDA-MB231 cells was assessed by CCK-8 assay. Results:The scavenging effects of the total flavonoids on the hydroxyl,superoxide anion and DPPH free radicals increased as the total flavonoids concentration increased within 20～100 μg/mL. The EC50of total flavonoids in scavenging hydroxyl,superoxide anion and DPPH free radicals were 111.86,89.24,26.51 μg/mL,respectively. The growth of HeLa,PC-3M and MDA-MB231 cells was remarkably inhibited by total flavonoids in a dose-dependent manner within the conservation of total flavonoids of 6.59～79.02 μg/mL. The inhibiting Hela,PC-3m and MDA-MB231 cells growth in 72 h was higher than in 48 h. Conclusion:Total flavonoids ofSelaginellapulvinata(Hook,et Grev.)Maxim shows strong antioxidant activity and good inhibitory effect against the growth of Hela,PC-3m and MDA-MB231 cells.

SelaginellapulvinatamMaxim;total flavorne;antioxidant;tumor cells;growth inhibition

2017-03-29

鄭瑞鳳(1992-),女,在讀碩士研究生,研究方向:藥物分析,E-mail:zrfblue@163.com。

*

何鋼(1982-),男,博士,副教授,研究方向:微生物與生化藥學(xué),E-mail:hegang@cdu.edu.cn。

四川省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)項(xiàng)目(2015JY0117);四川省教育廳基礎(chǔ)項(xiàng)目(17ZA0089);四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(TRCWYXFZCH2016014)。

TS201.1

A

1002-0306(2017)21-0037-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.21.008