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        子宮內膜癌組織Septin- 9表達變化及其意義

        2017-11-16 10:00:07楊愛萍
        山東醫(yī)藥 2017年36期

        楊愛萍

        (青海紅十字醫(yī)院,西寧810000)

        子宮內膜癌組織Septin- 9表達變化及其意義

        楊愛萍

        (青海紅十字醫(yī)院,西寧810000)

        目的探討子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達變化及其臨床意義。方法選擇子宮內膜癌患者120例(子宮內膜癌組)、子宮內膜不典型增生患者63例(不典型增生組)、子宮肌瘤患者70例(子宮肌瘤組),分別取手術切除的子宮內膜癌組織、子宮內膜不典型增生組織、正常子宮內膜組織,采用qRT- PCR法檢測各子宮內膜組織Septin- 9 mRNA表達。同時分析子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)及預后的關系。結果子宮內膜癌組、不典型增生組、子宮肌瘤組Septin- 9 mRNA相對表達量分別為1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00,組間兩兩比較P均<0.05。子宮內膜癌組Septin- 9 mRNA表達與淋巴結轉移、肌層浸潤和FIGO分期有關(P均<0.05),與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、病理類型及病理分級無關(P均>0.05)。以子宮內膜癌組Septin- 9 mRNA相對表達量的下四分位數(shù)為界值,將子宮內膜癌患者分為Septin- 9 mRNA低表達者和Septin- 9 mRNA高表達者。Septin- 9 mRNA高表達者術后5年生存率及總生存時間均低于Septin- 9 mRNA低表達者(P均<0.05)。結論子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達升高,其表達變化可能有助于子宮內膜癌診斷、病情評估及預后預測。

        子宮內膜癌;Septin- 9;實時熒光定量PCR;臨床病理特征;預后

        子宮內膜癌是女性常見的三大惡性腫瘤之一,占女性生殖道惡性腫瘤的20%~30%,近年來其發(fā)病率有升高趨勢[1]。Septin- 9蛋白是細胞骨架GTP結合蛋白家族的重要成員之一,廣泛存在于真核生物中,與細胞骨架重構、囊泡運輸以及細胞質分裂等多種生理過程密切相關[2]。近年研究表明,Septin- 9可參與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,如乳腺癌[3]、直腸癌[4]、胃癌[5]等。但Septin- 9與子宮內膜癌發(fā)生、發(fā)展的關系鮮有報道[6]。本研究分析子宮內膜癌組織Septin- 9表達變化及其與患者臨床病理參數(shù)和預后的關系?,F(xiàn)分析結果并報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 研究對象為2008年1月~2012年1月在青海紅十字醫(yī)院行手術收治的子宮疾病患者253例,其病例資料完整。其中,子宮內膜癌患者120例(子宮內膜癌組),年齡38~75(54.98±10.75)歲,術前未行任何抗腫瘤治療;子宮內膜不典型增生患者63例(不典型增生組),年齡36~72(57.47±13.62)歲;子宮肌瘤患者70例(子宮肌瘤組),年齡36~80(53.54±12.17)歲。所有患者經(jīng)術后組織病理檢查明確診斷。三組年齡具有可比性。本研究經(jīng)青海紅十字醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準,患者均知情同意。

        1.2 子宮內膜組織Septin- 9 mRNA表達檢測 采用qRT- PCR法。取三組手術切除的子宮內膜組織,采用TRIzol抽提試劑盒提取組織總RNA,紫外分光光度計檢測總RNA濃度和純度,采用逆轉錄試劑盒將總RNA逆轉錄為cDNA,然后進行PCR擴增。引物序列由上海英駿生物技術有限公司設計合成。引物序列:Septin- 9上游引物:5′- CAGAGCGGCTTGGGTAAATCC- 3′,下游引物: 5′- CTCCTCAATATCGTGC-GTGATGG- 3′;GAPDH上游引物:5′- ACAACTTTGGTATCGTGGAAGG- 3′,下游引物:5′- GCCATCACGCCACAGTTTC- 3′。PCR反應體系共20 μL,反應條件:50 ℃孵育2 min,95 ℃ Taq酶活化10 min,95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min共40個循環(huán)。所有操作在熒光定量PCR擴增儀(ABI PRISM? 7300,美國ABI公司)上進行。以GAPDH為內參,采用2-ΔΔCt法計算Septin- 9 mRNA相對表達量。

        1.3 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)關系分析 收集子宮內膜癌患者臨床病理參數(shù),包括年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、組織學類型、病理分級、FIGO分期、肌層浸潤、淋巴結轉移等,分析子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)的關系。

        1.4 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者預后關系分析 收集子宮內膜癌患者隨訪資料。以子宮內膜癌患者Septin- 9 mRNA相對表達量的下四分位數(shù)為界值,將子宮內膜癌組分為Septin- 9 mRNA低表達者(Septin- 9 mRNA相對表達量低于下四分位數(shù))和Septin- 9 mRNA高表達者(Septin- 9 mRNA相對表達量等于或高于下四分位數(shù)),繪制其Kaplan- Meier生存曲線,比較其術后5年生存率和總生存時間。

        2 結果

        2.1 各組Septin- 9 mRNA相對表達量比較 子宮內膜癌組、不典型增生組、子宮肌瘤組Septin- 9 mRNA相對表達量分別為1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00,組間兩兩比較P均<0.05。

        2.2 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)的關系 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與淋巴結轉移、肌層浸潤和FIGO分期有關(P均<0.05),與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、組織學類型及病理分級無關(P均>0.05)。見表1。

        表1 子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達 與患者臨床病理參數(shù)的關系

        2.3 子宮內膜癌組織Septin- 9表達與患者預后的關系 隨訪3~60個月,子宮內膜癌組死亡78例。Septin- 9 mRNA高表達者與Septin- 9 mRNA低表達者術后5年生存率分別為18.75%(12/64)、53.57%(30/56),總生存時間分別為(33.67±2.59)、(50.55±2.35)個月,Septin- 9 mRNA高表達者術后5年生存率及總生存時間均低于Septin- 9 mRNA低表達者(P均<0.05)。

        3 討論

        子宮內膜癌屬于上皮性惡性腫瘤,以來源于子宮內膜腺體的腺癌最常見,是女性生殖系統(tǒng)的三大惡性腫瘤之一,其病因迄今尚不明確[7]。手術聯(lián)合放化療為目前子宮內膜癌的首選治療方法[8],但患者預后并不樂觀。故尋求新的治療和預測預后的靶標是臨床研究的熱點[9]。

        Septin- 9基因是Septin- 9蛋白的編碼基因,位于染色體17q25.3,其轉錄產(chǎn)物可產(chǎn)生18種變異剪切體,編碼15種多肽[10]。Septin- 9變異剪切體之間具有一定的核苷酸相似性和氨基酸一致性[11],且他們的分布具有組織特異性,如Septin- 9 v1分布于除腦和胸腺外的組織[12],Septin- 9 v2、Septin- 9 v3、Septin- 9 v4多在胎兒組織中表達[13]。Scholz等[14]研究證實,siRNA技術干擾Septin- 9表達可使細胞分裂不完整;Fukushige等[15]研究表明,Septin- 9異常表達可導致細胞極性丟失,從而使細胞癌變的發(fā)生風險增加。

        本研究結果顯示,子宮內膜癌組Septin- 9 mRNA表達顯著高于不典型增生組和子宮肌瘤組,且不典型增生組Septin- 9 mRNA相對表達量顯著高于子宮肌瘤組。提示隨著正常子宮內膜組織向子宮內膜癌組織進展,Septin- 9 mRNA表達逐漸升高,Septin- 9在子宮內膜癌發(fā)生、發(fā)展過程中可能具有癌基因作用。本研究還發(fā)現(xiàn),子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、組織學類型和病理分級無關,而與淋巴結轉移、肌層浸潤和FIGO分期有關,且存在淋巴結轉移、肌層浸潤深、FIGO分期高的子宮內膜癌患者Septin- 9 mRNA表達相對較高,提示Septin- 9可能與子宮內膜癌的侵襲和轉移有關,檢測癌組織Septin- 9 mRNA表達有助于判斷病情。林春燕等[16]研究發(fā)現(xiàn),Septin- 9能夠抑制HIF- 1α蛋白降解,增加血管內皮生長因子的表達,從而促進腫瘤血管形成。這可能是Septin- 9參與子宮內膜癌發(fā)生、發(fā)展的具體機制。

        本研究結果顯示,Septin- 9 mRNA高表達者總生存時間較Septin- 9 mRNA低表達者明顯縮短,術后5年生存率亦明顯降低。提示子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達變化可影響患者預后,Septin- 9 mRNA高表達提示患者預后不良;檢測子宮內膜癌組織Septin- 9 mRNA表達將有助于評估子宮內膜癌患者預后。

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