田 浪,何彥俠,侯月娥,郭吉余,錢雪橋?,王林川

(1. 廣東海大集團股份有限公司畜牧水產(chǎn)研究中心,廣東 廣州 511400;2. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,廣東 廣州 510642)

中草藥微生態(tài)制劑替代抗生素對黃羽肉雞生產(chǎn)性能、免疫機能和臟器組織的影響

田 浪1,2,何彥俠1,侯月娥1,郭吉余1,錢雪橋1?,王林川2?

(1. 廣東海大集團股份有限公司畜牧水產(chǎn)研究中心,廣東 廣州 511400;2. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,廣東 廣州 510642)

為研究中草藥微生態(tài)制劑替代抗生素對黃羽肉雞生產(chǎn)性能、免疫機能及臟器組織的影響,試驗選用500羽黃羽肉雞混合雛,隨機分為5組,A組飼喂基礎(chǔ)日糧,B組飼喂基礎(chǔ)日糧+飼用抗生素(含50 g/t金霉素+40 g/t桿菌肽鋅),C組飼喂基礎(chǔ)日糧+中草藥(5 kg/t)、D組飼喂基礎(chǔ)日糧+微生態(tài)制劑(0.1 kg/t),E組飼喂基礎(chǔ)日糧+中草藥微生態(tài)制劑(5.1 kg/t),每組10個重復(fù),每個重復(fù)10羽,試驗期50 d.結(jié)果表明:與抗生素組相比,中草藥微生態(tài)制劑組日增重顯著提高了8.2%(P<0.05),耗料增重比顯著降低了6.0%(P<0.05),成活率(98.5%)提高了2.4%;中草藥微生態(tài)制劑組的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)等均顯著高于抗生素組(P<0.05),但與單純的中草藥組、微生態(tài)制劑組差異不顯著(P>0.05);中草藥微生態(tài)制劑組提高了禽流感疫苗的抗體滴度和整齊度,并且促進腸道、肝臟、腎臟等臟器組織的健康發(fā)育.結(jié)果顯示,中草藥微生態(tài)制劑可以顯著提高黃羽肉雞生產(chǎn)性能,增強機體免疫功能和健康水平,提高成活率,可以替代抗生素用于黃羽肉雞養(yǎng)殖.

中草藥微生態(tài)制劑;黃羽肉雞;生產(chǎn)性能;免疫機能;臟器組織

抗生素在畜牧業(yè)中促生長、防治疫病方面發(fā)揮了重要作用,但抗生素的長期使用、濫用等不規(guī)范應(yīng)用也導(dǎo)致了藥物殘留、食品安全、公共衛(wèi)生等系列負面問題.因此,為了實現(xiàn)健康養(yǎng)殖和安全食品,研發(fā)能替代抗生素的安全、環(huán)保、有效的飼料添加劑,成為肉雞養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的必然要求.中草藥具有增強機體免疫力、促進動物生長發(fā)育、提高飼料利用率和改善胴體品質(zhì)等功能[1-2],而益生菌也是一種有潛力替代抗生素的新型飼料添加劑,已經(jīng)研究闡明其改善腸道菌群平衡、修復(fù)炎癥、調(diào)節(jié)免疫功能等多方面的作用機制[3-5].

農(nóng)業(yè)部1773號公告《飼料原料目錄》明確規(guī)定了飼用天然植物多達115種,以及2045號公告《飼料添加劑品種目錄》允許的飼用微生物添加劑種類有34種.盡管近年來有不少關(guān)于中草藥和益生菌分別在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的研究,但聯(lián)合使用替代抗生素應(yīng)用于黃羽肉雞養(yǎng)殖的研究未見報道.本試驗在前期研究基礎(chǔ)上,主要篩選農(nóng)業(yè)部《飼料原料目錄》中的12種天然植物組成扶正祛邪、補益增免類中草藥制劑,并配合由枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、酪酸菌等組成的微生態(tài)制劑,研究其替代抗生素對黃羽肉雞生產(chǎn)性能、免疫機能及臟器組織等方面的影響,為中草藥微生態(tài)制劑在黃羽肉雞中的應(yīng)用提供試驗依據(jù).

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)方中草藥中的金銀花、連翹、板藍根、藿香、黃芩、黃連等12味中草藥購自玉林中藥港,所有中草藥經(jīng)單獨烘干(60~65℃)6 h, 細微粉碎,過120目篩,然后按一定比例均勻混合.微生態(tài)制劑由廣東海大集團畜牧水產(chǎn)研究中心提供,主要成分為枯草芽胞桿菌(活菌數(shù)≥4X109個/g),嗜酸乳桿菌(活菌數(shù)≥5X109個/g)和酪酸菌(活菌數(shù)≥3X109個/g),總活菌數(shù)≥1010個/g.

中草藥微生態(tài)制劑為98%復(fù)方中草藥+2%微生態(tài)制劑.10%金霉素購自內(nèi)蒙古金河股份有限公司,10%桿菌肽鋅購自江蘇天成保健品有限公司.

1.2 試驗設(shè)計 挑選500羽健康、平均始重120 g、10日齡黃羽肉仔雞,隨機均分為1個對照組和4個試驗組,每組10個重復(fù),每個重復(fù)10羽.對照組肉雞(A組)飼喂基礎(chǔ)日糧,在4個試驗組肉雞基礎(chǔ)日糧中分別添加抗生素(含50 g/t金霉素+40 g/t桿菌肽鋅)(B組)、中草藥制劑5 kg/t(C組)、微生態(tài)制劑100 g/(tD組)和中草藥微生態(tài)制劑5.1 kg/(tE組),試驗期50 d,其中試驗第1~20天為試驗Ⅰ期(肉雞10~30日齡),試驗第21~50天為試驗Ⅱ期(肉雞31~60日齡).試驗日糧組成及營養(yǎng)成分見表1.

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗在廣東海大集團試驗基地進行,試驗前20 d在層疊式育雛籠內(nèi)完成,試驗20 d后轉(zhuǎn)入育成舍3層重疊式育成籠進行.所有試驗肉雞的飼養(yǎng)環(huán)境一致,飼養(yǎng)作息、免疫、衛(wèi)生消毒等程序按照標(biāo)準(zhǔn)養(yǎng)殖制度,每天觀察雞群健康狀況,及時淘汰病弱雞.

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能 分別于試驗期第20天(試驗Ⅰ期)、第50天(試驗Ⅱ期)08∶00空腹稱重,計算各組采食量、日增重和耗料增重比、成活率等指標(biāo).

1.4.2 免疫器官指數(shù)及臟器組織結(jié)構(gòu)測定 試驗期第32天時,每個重復(fù)隨機選取1只中等大小的公雞屠宰,放血致死后迅速剖開腹腔,取脾臟、胸腺、法氏囊并稱重,計算各器官指數(shù)=器官重(g)/雞活體重(kg).同時取十二指腸中段約2 cm腸段、肝臟、腎臟組織,用HE染色法制作組織切片,對比觀察十二指腸絨毛形態(tài),計算絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度(V/C),觀察肝臟、腎臟組織結(jié)構(gòu)變化情況.

1.4.3 血清抗體測定 雞群16日齡時免疫禽流感H5-Re6滅活疫苗,分別于免疫后第14、21天,每個重復(fù)隨機選取3只雞采集血清,測定血清中禽流感疫苗抗體效價及計算離散度.

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計軟件SPSS16.0進行單因素方差分析(One-Way ANOVA),采用Duncan′s法進行均值比較,以P<0.05為顯著水平,試驗結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示.

2 結(jié) 果

2.1 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞不同階段生長性能的影響 由表2可見,與抗生素組相比,中草藥微生態(tài)制劑組的耗料量提高了1.56%(P>0.05)、平均增重顯著增加了8.2%(P<0.05),耗料增重比顯著降低了6.0%(P<0.05),成活率提高了2.4%;與空白對照組相比,中草藥微生態(tài)制劑組的耗料量顯著降低了2.70%(P<0.05)、平均增重顯著增加了9.85%(P<0.05),耗料增重比顯著降低了12.54%(P<0.05),成活率提高了5.7%.與抗生素組相比,單獨的中草藥組和微生態(tài)制劑組的平均耗料量顯著降低(P<0.05),平均增重顯著提高(P<0.05),耗料增重比降低(P>0.05),但兩組間差異不顯著.

2.2 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞免疫機能的影響 由表3可見,中草藥微生態(tài)制劑組肉雞的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均顯著優(yōu)于抗生素組(P<0.05),其中脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)同時顯著優(yōu)于空白對照組(P<0.05),法氏囊指數(shù)優(yōu)于空白對照組(P>0.05).單獨的中草藥組和微生態(tài)組的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均優(yōu)于抗生素組和空白對照組(P>0.05),其兩組間差異也不顯著.與抗生素組相比,空白對照組的3個免疫指數(shù)均略優(yōu)(P>0.05).

表2 中草藥微生態(tài)制劑組對黃羽肉雞生長性能的影響

表3 中草藥微生態(tài)制劑對42日齡黃羽肉雞免疫器官的影響

由表4可見,疫苗免疫后14 d時,各組已產(chǎn)生抗體,其中中草藥微生態(tài)制劑組、中草藥組、益生菌組的抗體效價均顯著高于抗生素組和空白對照組(P<0.05),其中以中草藥微生態(tài)制劑組抗體效價最高,但3組間差異不顯著(P>0.05),同時該組的抗體水平整齊度顯著優(yōu)于其他組(P<0.05).疫苗免疫后21 d時,各組均已產(chǎn)生具有免疫保護力的較高抗體水平,與抗生素組和空白對照組相比,中草藥微生態(tài)制劑組的抗體效價和抗體整齊度均顯著提高(P<0.05).

2.3 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞臟器組織結(jié)構(gòu)的影響 由圖1可見,對照組十二指腸絨毛較短,黏膜上皮細胞有明顯壞死、脫落現(xiàn)象,腸腔內(nèi)有炎性粘液,而抗生素組腸絨毛較對照組變粗、變短,有上皮細胞脫落及壞死.與抗生素組和對照組相比,中草藥組、微生態(tài)制劑組、中草藥微生態(tài)組腸絨毛均明顯更長和完整,上皮細胞脫落及壞死現(xiàn)象少,腸腔干凈無炎性粘液,尤其是中草藥微生態(tài)組腸絨毛明顯變長、變粗,排列整齊且清晰有光澤.由表5可見,與抗生素組相比,微生態(tài)制劑組腸絨毛長度增加最顯著(P<0.05),其V/C顯著增加,中草藥微生態(tài)制劑組腸絨毛長度、V/C均顯著增加;抗生素組腸隱窩深度較其余4個試驗組顯著增加.

表4 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞禽流感H5疫苗血清抗體的影響

由圖2可見,各組肝臟組織為正常形態(tài).對照組肝小葉中央靜脈擴張,靜脈及組織內(nèi)發(fā)生部分血細胞浸入現(xiàn)象;抗生素組門管區(qū)有少量炎性滲出,組織內(nèi)亦有浸入少許紅細胞;中草藥組、微生態(tài)制劑組、中草藥微生態(tài)組肝臟組織均輪廓清晰,無血細胞浸入,肝血竇增大,肝細胞索分界明顯,內(nèi)皮枯否氏細胞數(shù)量增多.

由圖3可見,各試驗組腎臟組織細胞結(jié)構(gòu)總體比較清晰、完整.空白對照組和抗生素組均可見少數(shù)血細胞和單核細胞浸入,部分腎小球增大及腎小管上皮細胞肥大,而中草藥組、微生態(tài)制劑組、中草藥微生態(tài)組均無此現(xiàn)象發(fā)生,腎小管上皮細胞結(jié)構(gòu)正常、輪廓清晰,排列完整.

3 討 論

3.1 中草藥微生態(tài)制劑對肉雞生長性能的影響 大量試驗證明,天然中草藥和微生態(tài)制劑具有替代抗生素、增強雞體健康水平、提高成活率和生長速度等功效,更有利于生產(chǎn)出健康、安全、優(yōu)質(zhì)的禽肉蛋品[6-7].Guo等[8]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),14種中藥組成的復(fù)方中草藥散劑取代維吉尼亞霉素在7~21 d能夠提高肉雞生產(chǎn)性能.Wang等[9]研究表明,益生菌組或其與益生元聯(lián)合組在28~41日齡獲得最好的增重效果,說明益生菌有潛力作為肉雞中后期催肥的抗生素替代品.

本試驗發(fā)現(xiàn),中草藥微生態(tài)制劑組比單獨的中草藥組或益生菌組具有更優(yōu)的生產(chǎn)性能,說明中草藥組與益生菌組具有協(xié)同增效作用,其機理可能是益生菌進入雞腸道增殖后,除了與病原菌競爭營養(yǎng)物質(zhì)和結(jié)合位點,同時產(chǎn)生多種消化酶類,促進了中草藥充分發(fā)酵及其活性成分的釋放,共同達到促進動物生長的目的[10];與抗生素組相比,中草藥微生態(tài)制劑組增加采食量和顯著提高飼料轉(zhuǎn)化利用率達到了更優(yōu)的生產(chǎn)性能,與上述國內(nèi)外研究報道有一致性,說明中草藥微生態(tài)制劑在肉雞養(yǎng)殖上具有替代抗生素的潛力.

表5 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞十二指腸發(fā)育的影響

圖2 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞肝臟的影響(400X)

圖3 中草藥微生態(tài)制劑對黃羽肉雞腎臟的影響(400X)

3.2 中草藥微生態(tài)制劑對動物免疫器官及功能的影響 Rivas等[11]提出用禽類胸腺、法氏囊、脾臟的重量評價雛雞免疫狀態(tài),其絕對質(zhì)量和相對質(zhì)量體現(xiàn)了機體細胞免疫和體液免疫機能.中草藥多糖提取物對雞的免疫提高與修復(fù)的作用機理:刺激免疫器官的生長發(fā)育;增強細胞免疫和體液免疫;誘導(dǎo)細胞因子分泌;促進T細胞、NK細胞補體的形成[12].Shokraneh等[13]在肉雞飲水中添加不同劑量的庫拉索蘆薈提取物,發(fā)現(xiàn)各提取物添加組比對照組顯著增加體重和腸道乳酸菌數(shù)量,對新城疫和禽流感疫苗的抗體滴度提高最佳.Seidavi等[14]研究結(jié)果表明,益生菌和酶混合物能夠影響22~42 d肉雞的血清IgG數(shù)量,顯著增加脾臟指數(shù).

本試驗研究發(fā)現(xiàn),中草藥微生態(tài)制劑組的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均顯著優(yōu)于抗生素組,同時均優(yōu)于對照組和單獨的中草藥組和益生菌組,說明中草藥微生態(tài)制劑能夠促進雞體中樞及外周免疫器官的發(fā)育,進而提高肉雞的免疫應(yīng)答能力.本試驗進一步測定的中草藥微生態(tài)制劑組的AIV疫苗抗體水平及離散度均顯著優(yōu)于對照組和抗生素組,該結(jié)論與Chen等[15]的報道一致,表明中草藥微生態(tài)制劑組能夠有效提高疫苗抗體水平及其整齊度,為雞群提供更可靠的免疫保護保障.

3.3 中草藥微生態(tài)制劑對臟器組織結(jié)構(gòu)的影響 腸道是機體重要的消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和保護屏障系統(tǒng),肝臟是機體內(nèi)最大的代謝和解毒器官,腎臟是泌尿系統(tǒng)的重要器官.因此,腸道、肝臟和腎臟的健康狀況直接決定了雞體的健康水平.Zheng等[16]研究發(fā)現(xiàn),屎腸球菌對肉雞肝臟的作用機理可能是改變營養(yǎng)物質(zhì)的分配和提升最佳的養(yǎng)分利用率.Zhang等[17]研究發(fā)現(xiàn),丁酸菌組用大腸桿菌攻毒后空腸絨毛高度顯著高于抗生素組及對照組,表明丁酸菌能夠促進免疫反應(yīng),提高腸道屏障功能.

本研究發(fā)現(xiàn),中草藥微生態(tài)制劑組的腸絨毛長度、V/C均較抗生素組和對照組有顯著提高,表明中草藥微生態(tài)制劑能促進腸道健康發(fā)育,直接解釋了中草藥微生態(tài)制劑提高生長速度、降低耗料增重比等改善生產(chǎn)性能的機理;同時由于腸道亦是機體重要的免疫器官,本試驗的中草藥微生態(tài)制劑通過促進腸道健康發(fā)育進一步增強了免疫功能,該結(jié)論也通過AIV疫苗抗體水平得到了驗證.本試驗中草藥微生態(tài)制劑組較抗生素組、對照組的肝臟組織發(fā)育更好,說明中草藥微生態(tài)制劑促進了肝臟的造血和儲血能力,從而增強了機體的代謝和免疫功能,這與Zheng等[16]研究益生菌對肝臟作用機理的分析有互補一致性.同時,中草藥微生態(tài)制劑組腎臟組織細胞結(jié)構(gòu)較抗生素組、對照組更好,說明中草藥微生態(tài)制劑同時促進了腎臟的代謝功能,有效緩解養(yǎng)殖過程中多種應(yīng)激.

同時,本試驗發(fā)現(xiàn)抗生素組的肝臟和腎臟均有炎性滲出、上皮細胞脫落、毛細血管出血等現(xiàn)象,而中草藥微生態(tài)制劑組無此病理現(xiàn)象,結(jié)合抗生素組免疫指數(shù)和腸隱窩值差于對照組,直接證明了肉雞養(yǎng)殖中長期添加抗生素會造成機體的毒副損傷及免疫抑制等,直接影響了機體健康水平、免疫功能和生產(chǎn)性能,加之耐藥性的弊端,應(yīng)盡早減少或取消在養(yǎng)殖過程中長期添加抗生素的傳統(tǒng)做法,加快研發(fā)和推廣更安全、有效的抗生素替代品具有必要性和緊迫性.

4 結(jié) 論

本研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加中草藥微生態(tài)制劑可以發(fā)揮中草藥和益生菌的協(xié)同功效,提高黃羽肉雞生產(chǎn)性能和成活率,增強免疫功能,促進腸道、肝臟和腎臟等重要組織器官的健康發(fā)育,且效果優(yōu)于抗生素(金霉素+桿菌肽鋅).中草藥微生態(tài)制劑可替代抗生素應(yīng)用于黃羽肉雞飼糧中,添加量為5.1 kg/t.盡管單獨應(yīng)用益生菌或中草藥均可較對照組顯著改善黃羽肉雞生產(chǎn)性能,而應(yīng)用復(fù)合中草藥益生菌制劑的成本更高,但從替代抗生素角度及其整體效益分析,應(yīng)用復(fù)合中草藥微生態(tài)制劑更能保證養(yǎng)殖場獲得更高的綜合經(jīng)濟效益.

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Effects of Composite Herbal-probiotics agents Substitute for Antibiotic on Growth performance, immune function and organs & tissue development of Yellow Broilers

TIAN Lang1,2, HE Yan‐xia1, HOU Yue‐e1, GUO Ji‐yu1, QIAN Xue‐qiao1*, WANG Lin‐chuan2*

(1. Animal Husbandry and Fisheries Research Center, Guangdong Haid Group Co., Ltd., Guangdong Guangzhou 511400,China; 2. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangdong Guangzhou 510642, China)

The present study was aimed to study the effects of applying composite herbal‐probiotics agents in the feed on growth performance, immune function and organs & tissue development in Yellow‐feathered broilers. Five hundred Yellow‐feathered broilers at 10‐day‐old were divided into 5 groups. Group A was fed a basal diet, group B was fed the basal diet+50 g/t aureomycin and 40 g/t bacitracin zinc, group C was fed the basal diet+5 kg/t composite herbal agents,group D was fed the basal diet+0.1 kg/t probiotics agents and group E was fed the basal diet+5.1 kg/t composite herbal‐probiotics agents. Each group included 10 replicates(10 birds per replicates), and the experiment lasted 50 days. Results showed that group E got the best experimental results of all groups, ADG was increased by 8.2%(P<0.05), the feed‐gain ratio was decreased by 6.0%(P<0.05), and survival rate increased by 2.4% compared with the antibiotic group B. Group E also got significantly increased immune organ indexes and antibody titer of Avian influenza vaccine(P<0.05), and enhance development of the duodenum, liver and kidney. In conclusion, the results suggest that the composite herbal‐probiotics additives can improve growth performance, increase health degree, immunity and survival rate of Yellow‐feathered broilers, and has the potential to replace antibiotics for broiler breeding.

Composite herbal‐probiotics agents; Yellow‐feathered broilers; Growth performance; Immune function; Organ and tissue

S831.5

A

10.19556/j.0258-7033.2017-11-090

2017-06-30;

2017-08-24

廣州市博士后科研啟動項目(項目代碼230.30)

田浪(1981-),男,四川自貢人,博士,主要從事畜禽動物疫病防控研究,E-mail:tianlang@haid.com.cn

*通訊作者:錢雪橋,副教授,E-mail:qxq@haid.com.cn;王林川,教授,E-mail:lcwang@scau.edu.cn