溫雋珉++黃澤偉++盧月梅

【關(guān)鍵詞】伏立康唑；梅奇酵母菌；敗血癥

【中圖分類號】R446.5 【文獻標(biāo)識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.23..02

酵母菌，特別是念珠菌感染，是重癥病房常見院內(nèi)條件性嚴重血流感染，近年來非白色念珠菌酵母菌感染數(shù)量增加，偶然可發(fā)生罕見的酵母菌感染[1]。梅奇酵母菌可定植人體的某些部位，生長形態(tài)類似念珠菌，通常認為是非致病菌，我們發(fā)現(xiàn)一例梅奇酵母菌（Metschnikowia pulcherrima）敗血癥，開始微生物室誤認為鐵紅假絲酵母菌（Candida pulcherrima），對非白色念珠菌包括罕見酵母菌的準(zhǔn)確診斷和治療需要提高認識。

1 病歷摘要

患者，女，16歲，主因腹脹、雙下肢無力伴意識障礙10月，于2015-06-29入深圳市人民醫(yī)院ICU。入院診斷：（1）播散性腦脊髓炎：遷延性昏迷，繼發(fā)性癲癇，腦室積液，腦室-腹腔引流術(shù)后，中樞性尿崩癥，腦耗鹽綜合征，腦干延髓損傷，繼發(fā)性O(shè)ndine's curse 綜合征，四肢軟癱，低血壓狀態(tài)，呼吸衰竭（呼吸機依賴），中樞性低熱；（2）格林巴雷綜合征后遺癥；（3）肺部感染，雙側(cè)胸腔積液；（4）泌尿系統(tǒng)感染；（5）體癬：繼發(fā)性皮炎；（6）氣管切開術(shù)后。入院后患者持續(xù)存在低熱，持續(xù)依賴經(jīng)氣管切開機械通氣，間有反復(fù)高熱，最高體溫達39.5度，痰培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌等，根據(jù)藥敏反復(fù)更改抗生素，血培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)白色念珠菌，尿培養(yǎng)熱帶念珠菌，予氟康唑治療后好轉(zhuǎn)，仍持續(xù)低熱。2015-9-8后反復(fù)高熱，血象升高，2015-9-11送深靜脈導(dǎo)管尖培養(yǎng)，2015-9-13培養(yǎng)回報為“鐵紅假絲酵母菌”；于2015-9-13送外周血培養(yǎng)，2015-9-16提示真菌培養(yǎng)陽性，2015-9-19正式回報血培養(yǎng)“鐵紅假絲酵母菌”；2015-9-17真菌1-3-β-D葡聚糖定：>1000 pg/mL；之后于2015-9-25，2015-9-26多次送血培養(yǎng)回報仍為“鐵紅假絲酵母菌”，2015-9-28最高體溫39.8度；根據(jù)2015-9-13深靜脈導(dǎo)管尖培養(yǎng)藥敏結(jié)果改用伏立康唑抗真菌治療（2015-9-16至2015-10-10）；2015-9-28真菌1-3-β-D葡聚糖定：127.7pg/ml，繼續(xù)伏立康唑抗真菌治療，分別于2015-10-9，2015-10-16，2015-10-17多次送血培養(yǎng)、深靜脈導(dǎo)管提示轉(zhuǎn)陰，2015-10-8真菌1-3-β-D葡聚糖定：52.54 pg/mL，患者體溫峰值較前明顯下降，血象正常，體溫降為平常體溫約38度。伏立康唑治療有效。

2 分離鑒定

（1）血培養(yǎng)陽性報警

（2）培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種血平板，35℃培養(yǎng)18-24小時

（3）挑取單個菌落轉(zhuǎn)種LB肉湯，35℃搖菌過夜，提取DNA，PCR檢測真菌間隔區(qū)序列（ITS）基因。PCR條件：引物序列上游引物ITS86 GTGAATCATCGAATCTTTGAAC，下液引物ITS4 TCCTCCGCTTAT

TGATATGC擴增片段長度約200 bp。PCR的反應(yīng)體系：含Mg2+的10×buffer 2 μL，dNTP終濃度為200 μmol/L，上下游引物終濃度分別為0.2 μmol/L，DNA模板1 μL，TaqDNA聚合酶1 U，用滅菌去離子水補足20 μL。PCR的反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 min；95℃變性15 s，58℃退火30 s，72℃延伸1 min，40個循環(huán)；72℃延伸10 min。

（4）PCR產(chǎn)物測序。

（5）測序結(jié)果BLAST，與genbank現(xiàn)有序列比對同源性。

（6）同源性大于98%可認為是與該序列是同一種，同源性97%～98%可認為是與該序列是同一屬。

基因測序結(jié)果證實該株真菌（原先認為是“鐵紅假絲酵母菌”）為梅奇酵母菌（Metschnikowia pulcherrima）。

3 文獻復(fù)習(xí)及展望

酵母菌的分類較復(fù)雜，除了根據(jù)其形態(tài)特征外，還必須結(jié)合其生理生化特征進行分類[2-5]。在近期的分類學(xué)研究中，DNA堿基序列的一致性在分類中占有重要地位[6-8]。梅奇酵母屬（Metschnikowia）屬于酵母科中的一個屬，梅奇酵母菌存在于花、水果、花蜜、昆蟲（蜜蜂、果蠅屬），果實幼蟲排泄物、酒[9-12]。它既可以導(dǎo)致水果腐爛，也可以作為替代農(nóng)藥對植物污染物產(chǎn)生拮抗作用而用于生物防治的[12-13]。有研究文獻報道認為，梅奇酵母可以從人類的痰、鼻咽、陰道、直腸和血中分離出來[13-16]，在新生兒痤瘡、手足癬、尿布皮炎和指甲真菌病，以及引起動物狗皮膚感染等很可能扮演在一個重要角色[16-18]。但目前針對梅奇酵母致病性的研究相對較少，本病例報告首次高度提示梅奇酵母在人體存在致病性，至于梅奇酵母的來源以及對梅奇酵母的致病性的檢測及治療需要進一步探討，為臨床工作對罕見真菌的診治提供新的研究方向。

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本文編輯：李 豆endprint