付雪嬌，孟令文

馬鈴薯品種遼薯6號(hào)莖尖脫毒及快繁技術(shù)研究

付雪嬌，孟令文

（遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，遼寧 沈陽 110161）

以馬鈴薯品種遼薯6號(hào)為試材，研究不同消毒方法、不同濃度激素配比的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、不同莖尖大小、不同培養(yǎng)條件對(duì)莖尖脫毒和成苗效果的影響。結(jié)果表明：自來水沖洗1～2 min，0.05%次氯酸鈉溶液浸泡10 min后用無菌水沖洗3～5次，可達(dá)到理想的消毒效果；莖尖分生組織0.3～0.4 mm（帶2個(gè)葉原基）、誘導(dǎo)培養(yǎng)基：“MS＋1.0 mg/L BA＋0.05 mg/L NAA＋30 g/L蔗糖＋7 g/L瓊脂”、光照時(shí)長14 h/d、光照強(qiáng)度2 000 lx條件下培養(yǎng)溫度28℃時(shí)成苗效果最好。

馬鈴薯；莖尖脫毒；快繁

遼薯6號(hào)是遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院選育的鮮食型馬鈴薯品種。該品種薯塊橢圓形，黃皮黃肉，食味較好，一般產(chǎn)量2 500 kg/667m2左右，是遼寧省的主栽品種之一。但是近幾年由于馬鈴薯受病毒侵染導(dǎo)致種性退化，造成了該品種的產(chǎn)量下降、品質(zhì)嚴(yán)重受損，給該品種的開發(fā)利用造成較大影響。目前，最有效的防治方法是采用馬鈴薯莖尖脫毒技術(shù)。本研究以遼薯6號(hào)為試材，探索影響馬鈴薯莖尖分生組織培養(yǎng)和試管苗快繁的有關(guān)因素，為馬鈴薯的工廠化育苗提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)材料為遼薯6號(hào)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 不同消毒方法比較

2017年4月初，選擇健康薯塊進(jìn)行催芽，用刀片切取2～3 cm的壯芽作為莖尖接種材料，對(duì)莖尖表面進(jìn)行消毒處理。試驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理：處理1（先用自來水沖洗30 m in，再用70%乙醇浸30 s，然后用 0.1%NaClO溶液浸15 min，無菌水沖洗3～5次）；處理2（自來水沖洗 1～2 min，70%乙醇浸30 s，0.1%NaClO溶液浸10 min，無菌水沖洗3～5次）；處理 3（自來水沖洗 1～2 m in，0.1%Na-ClO溶液浸10 m in，無菌水沖洗3～5次）；處理4（自來水沖洗 1～2 m in，0.05%NaClO溶液浸泡10 m in，無菌水沖洗3～5次）。

1.2.2 莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)基

采用MS為基本培養(yǎng)基，添加瓊脂7 g/L，蔗糖30 g/L，加入兩種不同濃度的激素（見表1），調(diào)節(jié)pH值為5.8。

在無菌環(huán)境下，剝離馬鈴薯莖尖0.2～0.4 mm，接種在不同激素濃度的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，每個(gè)處理3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)接種20個(gè)莖尖。培養(yǎng)室溫度 28℃，每日光照 14 h，光照強(qiáng)度2 000 lx。接種后調(diào)查馬鈴薯莖尖分化生長的情況，60 d后統(tǒng)計(jì)芽的生長情況和成苗率。

1.2.3 剝離莖尖大小對(duì)莖尖成苗率

將接種材料消毒后，剝離帶有1個(gè)葉原基（0.1～0.2 mm）、帶2個(gè)葉原基（0.3～0.4 mm）、帶3個(gè)葉原基（0.6～0.7 mm）的莖尖接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)60 d，統(tǒng)計(jì)單莖尖芽數(shù)、成苗率、脫毒率。

1.2.4 不同溫度對(duì)脫毒苗生長的影響

馬鈴薯莖尖經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)18 d后轉(zhuǎn)入快繁培養(yǎng)基中，放置于不同培養(yǎng)溫度（22℃、25℃、28℃、31℃）下進(jìn)行培養(yǎng)，光照時(shí)長14 h/d，光照強(qiáng)度2 000 lx，觀察記載馬鈴薯莖尖的生長情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同消毒方法對(duì)莖尖存活率的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，各處理對(duì)接種材料都能起到很好的消毒作用，但不同消毒方法的污染率與莖尖存活率之間存在差異，其中處理1的污染率最低，但成活率不高；處理4的存活率最高，適于馬鈴薯莖尖分生組織培養(yǎng)（表2）。將接種材料自來水沖洗1～2 min，0.05%NaClO溶液浸泡10 min，無菌水沖洗3～5次，即可達(dá)到理想的消毒效果。

2.2 不同濃度激素配比對(duì)馬鈴薯莖尖分生組織成苗率的影響

從表3可以看出，隨著6-BA濃度逐漸升高，成苗率先增加后降低，且以1 mg/L為好。在6-BA濃度達(dá)到1.5 mg/L時(shí)，莖尖分成組織出現(xiàn)大塊的愈傷組織，成苗率也逐漸降低?？梢娪鷤M織的過度生長，對(duì)芽的生長有抑制作用，對(duì)成苗是不利的。本試驗(yàn)條件下，遼薯6號(hào)誘導(dǎo)培養(yǎng)基的最佳方案為：MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA＋30 g/L蔗糖＋7 g/L瓊脂，成苗率最高。

2.3 剝離莖尖大小對(duì)馬鈴薯成苗率的影響

從表4可以看出，馬鈴薯成苗率與莖尖大小成正比，莖尖越大，成苗率越高；而脫毒率與莖尖大小成反比，莖尖越大，脫毒效果越差。綜合考慮，處理2（2個(gè)葉原基）的大小比較適宜。

2.4 不同溫度對(duì)脫毒苗生長的影響

從表5可以看出，在光照時(shí)長14 h/d、光照強(qiáng)度為2 000 lx條件下，不同溫度對(duì)脫毒苗的生長有顯著影響。隨著溫度的升高，株高逐漸增大再降低，溫度在28℃條件下，株高最高；葉片數(shù)隨著溫度的升高逐漸增加再降低，溫度在28℃條件下，葉片數(shù)最多；節(jié)間長隨著溫度的升高逐漸增長，溫度在31℃條件下，節(jié)尖數(shù)最長；鮮重隨著溫度的升高逐漸增加再降低，溫度在28℃條件下，鮮重最重。綜合考慮，當(dāng)溫度在28℃條件下，莖尖分生組織株高、單株葉片數(shù)、單株鮮重都高于其它處理，脫毒苗生長健壯。因此，最適宜遼薯6號(hào)脫毒苗培養(yǎng)的溫度為28℃。

表1 不同濃度激素配比

表2 不同處理對(duì)莖尖存活率的影響

表3 不同濃度激素配比對(duì)馬鈴薯莖尖分生組織成苗率的影響

表4 剝離莖尖大小對(duì)馬鈴薯成苗率的影響

表5 不同培養(yǎng)溫度對(duì)脫毒苗生長的影響

3 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，遼薯6號(hào)莖尖消毒處理的最適方法為自來水沖洗1～2 min，0.05%次氯酸鈉溶液浸泡10 m in，然后用無菌水沖洗3～5次；遼薯6號(hào)的莖尖成苗培養(yǎng)基的最佳配比為：MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA＋30 g/L蔗糖＋7 g/L瓊脂，pH值為5.8。遼薯6號(hào)的最佳剝離莖尖的大小為0.3～0.4 mm（即2個(gè)葉原基），成苗率、脫毒率比較高；光照時(shí)長14 h/d，光照強(qiáng)度2 000 lx條件下遼薯6號(hào)的脫毒苗快繁最佳培養(yǎng)溫度為28℃。

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S531.01

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1002-1728（2017）05-0085-03

10.3969/j.issn.1002-1728.2017.05.022

2017-02-19

沈陽市重點(diǎn)科技研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（17-154-300）

付雪嬌（1982-），女，主要從事馬鈴薯、甘薯新品種及配套栽培技術(shù)研究。

孟令文（1963-），男，研究員，主要從事作物高產(chǎn)高效栽培技術(shù)研究。E-mail：Lnsm lw2004@163.com