李 蒲 李 菲 魏艷林 張榮艷 莫瑞濱 紀(jì)德香

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科，江西 南昌 330000)

自體CIK聯(lián)合rhIL-2對(duì)B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者T 細(xì)胞亞群及β2 微球蛋白水平的影響

李 蒲 李 菲 魏艷林 張榮艷 莫瑞濱 紀(jì)德香

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科，江西 南昌 330000)

目的探討自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK)聯(lián)合重組人白細(xì)胞介素(rhIL)-2對(duì)B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者T 細(xì)胞亞群及β2 微球蛋白水平的影響。方法接受CIK聯(lián)合rhIL-2治療的46例B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者為觀察組，并選擇同期未接受CIK聯(lián)合IL-2治療的46例B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者為對(duì)照組。比較兩組T細(xì)胞亞群、β2 微球蛋白、生活質(zhì)量及臨床療效。結(jié)果治療后，觀察組CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+水平均比同組治療前及對(duì)照組高(P<0.05)；β2微球蛋白比同組治療前及對(duì)照組低(P<0.05)；觀察組臨床療效總緩解率高于對(duì)照組(P<0.05)；觀察組軀體功能、角色功能、認(rèn)知功能、情緒功能、社會(huì)功能得分均比同組治療前及對(duì)照組高(P<0.05)。結(jié)論在B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者中應(yīng)用自體CIK聯(lián)合rhIL-2方案效果顯著，可有效改善T細(xì)胞亞群和β2微球蛋白水平，提高生活質(zhì)量，且安全性高。

B細(xì)胞惡性淋巴瘤；細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞；白細(xì)胞介素-2；T細(xì)胞亞群；β2 微球蛋白

惡性淋巴瘤發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，與病毒或細(xì)菌感染、免疫缺陷、遺傳、環(huán)境等因素存在密切關(guān)系〔1〕。初診淋巴瘤患者大約有50%以上在65歲以上，而由于淋巴瘤致死的患者65歲以上的大約占70%〔2〕。細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK)是新類型免疫活性細(xì)胞，具有超強(qiáng)的增殖能力及細(xì)胞毒性，在抗腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療中已得到廣泛應(yīng)用〔3〕。本研究擬分析自體CIK聯(lián)合重組人對(duì)白細(xì)胞介素(rhIL)-2。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年1月至2016年1月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院接診的接受CIK聯(lián)合rhIL-2治療的46例B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者為觀察組，并選擇同期未接受CIK聯(lián)合rhIL-2治療的46例B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合B細(xì)胞惡性淋巴瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕，并經(jīng)手術(shù)及病理組織、常規(guī)免疫組化檢查確診；②觀察組同意進(jìn)行CIK細(xì)胞制備及相關(guān)治療方案；③年齡60～90歲；④在納入研究前已接受過多療程其余方案治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有其余惡性腫瘤；②伴有神經(jīng)系統(tǒng)、精神疾??；③伴有重要臟器功能、嚴(yán)重氣質(zhì)性疾病；④難以完成治療。觀察組男31例，女15例；年齡62～89〔平均(75.45±2.73)〕歲；彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤27例，黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤8例，淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤6例，霍奇金淋巴瘤5例。對(duì)照組男29例，女17例；年齡61～88〔平均(75.53±2.71)〕歲；彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤25例，黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤10例，淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤7例，霍奇金淋巴瘤4例。本研究已獲得我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，兩組性別、年齡、腫瘤類型無顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 自體CIK細(xì)胞制備方法：抽取患者54 ml清晨空腹靜脈血，將樣本中單個(gè)核細(xì)胞分離，放置無血清培養(yǎng)中，調(diào)整細(xì)胞濃度，加入2 000 U/ml的重組人干擾素(INF)-γ(規(guī)格：200萬IU/瓶，廠家：上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司，國藥準(zhǔn)字S20020040)，混勻后，放置透氣性培養(yǎng)袋中，溫度37℃，5%CO2。第2天，在培養(yǎng)液中加入rhIL-2(規(guī)格：100萬IU/瓶，廠家：北京瑞得合通藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字S10980096)1 000 U/ml及抗人T細(xì)胞CD3單克隆抗體(anti-CD3McAb)(規(guī)格：復(fù)溶后每瓶1 ml包含5 mg單克隆抗體，廠家：武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字S19990012)50 ng/ml。

觀察組在接受自體CIK聯(lián)合rhIL-2治療前1 w時(shí)，需先行胸腺五肽(規(guī)格：1 mg：1 ml，廠家：北京世橋制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20061223)的肌肉注射，20 mg/次，1次/d，連續(xù)1 w。之后調(diào)整為20 mg/次，3次/w；同時(shí)進(jìn)行CIK細(xì)胞回輸，2×109個(gè)/次，1次/w，rhIL-2皮下注射，100 mU/次，1次/d，連續(xù)10 d。2 w為1個(gè)療程，中間間隔2 w后，再次制備CIK細(xì)胞，連續(xù)治療8個(gè)療程。

1.3觀察指標(biāo) ①比較治療前后T淋巴細(xì)胞亞群及β2微球蛋白的變化；②使用歐洲癌癥研究與治療協(xié)作組生存質(zhì)量問卷-C30(EORTCQLQ-C30)〔5〕評(píng)分量表評(píng)價(jià)生活質(zhì)量，總共30個(gè)條目，包括軀體、角色、認(rèn)知、情感及社會(huì)5個(gè)鄰域，得分越高，表示生活質(zhì)量越好；③記錄觀察組治療過程中毒副反應(yīng)；

1.4療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 《實(shí)體瘤治療療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)-RECIST》〔6〕，完全緩解：病灶完全消失，維持時(shí)間≥4 w；不確定完全緩解：不能確定屬完全緩解還是部分緩解；部分緩解：腫瘤病灶得到30%以上的縮小，維持時(shí)間≥4 w；無變化：病灶縮小程度≤30%。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組治療前后T細(xì)胞亞群比較 治療前，兩組CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+水平無顯著差異(P>0.05)；治療后，觀察組均比同組治療前及對(duì)照組高(P<0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后T細(xì)胞亞群比較

與治療前比較:1)P<0.05；與對(duì)照組比較:2)P<0.05，同表3

2.2兩組治療前后β2微球蛋白比較 治療前，觀察組和對(duì)照組β2微球蛋白〔(0.43±0.09)mg/dl、(0.45±0.08)mg/dl〕無顯著差異(P>0.05)；治療后，觀察組〔(0.23±0.05)mg/dl〕比同組治療前及對(duì)照組〔(0.34±0.07)mg/dl〕低(P<0.05)。

2.3兩組治療后臨床療效比較 治療后，觀察組總緩解率高于對(duì)照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組治療后臨床療效比較〔n(%)，n=46〕

與對(duì)照組比較：1)P<0.05

2.4兩組治療后生活質(zhì)量比較 治療前，兩組生活質(zhì)量各指標(biāo)無顯著差異(P>0.05)；治療后，觀察組軀體功能、角色功能、認(rèn)知功能、情感功能、社會(huì)功能得分均比同組治療前及對(duì)照組高(P<0.05)。見表3。

表3 兩組治療后生活質(zhì)量比較

2.5觀察組毒副反應(yīng) 治療初期，3例有輕微乏力、低熱現(xiàn)象，經(jīng)對(duì)癥處理后得到緩解，患者生命體征、血常規(guī)、肝腎功能均未出現(xiàn)明顯變化。

3 討 論

近年來，有研究嘗試提高B細(xì)胞惡性淋巴細(xì)胞瘤患者對(duì)化療的敏感性和腫瘤的控制效果，但在遠(yuǎn)期療效上效果不盡人意，主要原因和老年患者對(duì)大劑量化療藥物、化療產(chǎn)生的毒性耐受性較差有關(guān)，降低了腫瘤控制效果〔7〕。目前較多研究將B細(xì)胞惡性淋巴瘤的研究重心轉(zhuǎn)向生物治療、免疫治療等特殊治療方案〔8〕。

CIK細(xì)胞主要是由患者自體外周血單個(gè)核心細(xì)胞經(jīng)過rhINF-γ、rhIL-2、anti-CD3McAb共同誘導(dǎo)而成的一群異質(zhì)細(xì)胞，其主要的效應(yīng)細(xì)胞可共同表達(dá)2種膜蛋白分子(CD3、CD56)，因此，在進(jìn)行回輸自體CIK細(xì)胞后，可同時(shí)產(chǎn)生自然殺傷(NK)細(xì)胞的強(qiáng)大非組織相容性復(fù)合體(MHC)限制性消滅腫瘤效果和T淋巴細(xì)胞的強(qiáng)效抗腫瘤效果，可準(zhǔn)確定位到腫瘤細(xì)胞上并將其殺死，對(duì)于惡性腫瘤細(xì)胞化療后殘留細(xì)胞效果顯著，可有效防止腫瘤細(xì)胞復(fù)發(fā)，提高機(jī)體免疫力〔9〕。周毅〔10〕在非小細(xì)胞肺癌患者中應(yīng)用CIK聯(lián)合rhIL-2可上調(diào)機(jī)體免疫力，使CIK細(xì)胞活性增加。王若天等〔11〕在直腸和結(jié)腸癌患者中應(yīng)用該方式也顯示出該方式和提高免疫功能，緩解化療不良反應(yīng)，提高治療效果和生活質(zhì)量。但目前在B細(xì)胞惡性淋巴瘤中應(yīng)用CIK聯(lián)合rhIL-2的報(bào)道仍較少。本研究結(jié)果提示，該方式在清除微小殘留灶、提高疾病緩解率上具有明顯優(yōu)勢(shì)，并且證實(shí)自體CIK細(xì)胞回輸后，可增加T細(xì)胞亞群免疫活性細(xì)胞的比例，這也是CIK細(xì)胞所產(chǎn)生的抗腫瘤效應(yīng)、提高機(jī)體免疫力的關(guān)鍵因素。

β2微球蛋白是種相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)，是細(xì)胞膜上完整組織相容性抗原中的部分。在人體中，β2微球蛋白水平十分恒定，容易通過腎小球?yàn)V過膜，大多數(shù)是由近曲小管以胞飲形式攝取，在局部被代謝降解，成為氨基酸〔12〕。β2微球蛋白和腫瘤負(fù)荷之間存在密切關(guān)系，有研究指出，廣泛病變的患者β2微球蛋白水平明顯比局限性病變的患者高，在排除肝、腎、自身免疫性疾病后，β2微球蛋白水平的增加可能提示骨髓存在浸潤情況〔13〕。有學(xué)者提出，β2微球蛋白水平的持續(xù)增加，提示病情惡化，而腫瘤患者治療后β2微球蛋白水平下降的患者，病情多已穩(wěn)定〔14〕。本研究結(jié)果提示，在B細(xì)胞惡性淋巴瘤患者中應(yīng)用自體CIK聯(lián)合rhIL-2方案效果顯著，可有效改善T細(xì)胞亞群和β2微球蛋白水平，提高生活質(zhì)量，且安全性高。

1中國臨床腫瘤學(xué)會(huì),中華醫(yī)學(xué)會(huì)血液學(xué)分會(huì),中國醫(yī)師協(xié)會(huì)腫瘤醫(yī)師考核委員會(huì),等.淋巴瘤免疫化療乙型肝炎病毒再激活預(yù)防和治療中國專家共識(shí)〔J〕.中國實(shí)用內(nèi)科雜志,2014;34(1):32-9.

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紀(jì)德香(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事急性白血病、惡性淋巴瘤研究。

李 蒲(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事急性白血病、惡性淋巴瘤研究。

R73

A

1005-9202(2017)20-5068-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.20.051

〔2017-03-20修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)