河南省濮陽市紅十字中心血站（457000）馮蘭潔

血站對于血液樣本中抗原進(jìn)行檢驗(yàn)的方法主要有酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)和核酸檢驗(yàn)兩種，本研究以2016年2月～2016年6月期間我站的200例血液樣本為研究對象，先后采用酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)和核酸檢驗(yàn)，并對其準(zhǔn)確性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，同時(shí)對于影響檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的因素進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年2月～2016年6月期間在我站成功完成自愿獻(xiàn)血的200例獻(xiàn)血者作為考察對象，對其血液樣本進(jìn)行檢測。其中男性為109例，女性為91例；最小年齡為26歲，最大年齡為54歲，平均年齡為（42.46±2.15）歲。

1.2 檢測方法 先對200例患者進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)，再進(jìn)行核酸檢驗(yàn)。具體方法如下：酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)：將真空抗凝管中的血液樣本取出5ml放入離心機(jī)進(jìn)行離心，并分離出血漿，采用STAR全自動加樣儀（煙臺澳斯邦生物工程有限公司）進(jìn)行加樣，再采用FAME全自動酶免分析儀（煙臺澳斯邦生物工程有限公司）進(jìn)行分析，檢驗(yàn)人員記錄檢驗(yàn)結(jié)果。核酸檢驗(yàn)：AmpliSTAR全自動核酸提取純化儀和ABI7500熒光PCR擴(kuò)增儀組成的核酸檢測系統(tǒng)對患者血液進(jìn)行檢測，將真空抗凝管中的血樣取出5ml，放入AmpliSTAR全自動核酸提取純化儀中進(jìn)行時(shí)長為20分鐘的離心純化，溫度以室溫為宜，隨后將經(jīng)過離心的血樣至于5℃的冰箱內(nèi)進(jìn)行保存，如果血常規(guī)檢查時(shí)血液樣品顯示合格，便可將它置于加樣儀樣品條架上，并于B號96孔深孔板中加入A、B洗液以及洗脫液各100ul，于A號96孔深孔板中加入磁珠50ul和結(jié)合液600ul，對血液樣本進(jìn)行裂解，裂解完成之后，采用三級核酸提取程序?qū)⒑怂崽崛〕鰜?，配置孔增核酸反?yīng)液。采用四級核酸擴(kuò)增程序?qū)⒔Y(jié)合液置于八聯(lián)管中，最后放入PCR儀器中進(jìn)行擴(kuò)增，并采用乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒(1+2型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光法)等試劑進(jìn)行檢測，最后將結(jié)果進(jìn)行記錄，確定陽性血液樣本數(shù)量。

附表1 采用酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)陽性率（n/%）

附表2 采用核酸檢驗(yàn)陽性率（n/%）

1.3 檢驗(yàn)準(zhǔn)確性觀察指標(biāo) 觀察采用兩種方法對于血液樣本進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，檢查樣本中抗原的陽性率。酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)主要篩查HBsAg、抗-HCV和抗-HIV陽性獻(xiàn)血者，再對陰性獻(xiàn)血者采用核酸進(jìn)行抗-HBV、抗-HCV和抗-HIV篩查。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 將研究數(shù)據(jù)采用SPSS17.0分析，計(jì)量資料采用（±s）表示，并采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用n表示，并采用x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在本次研究中，采用酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)HBsAg，抗-HCV，抗-HIV的陽性例數(shù)分別為13例、12例和13例，共38例，見附表1；將陽性患者篩除后，再對162例陰性獻(xiàn)血者采用核酸檢驗(yàn)，抗-HBV，抗-HCV，抗-HIV的陽性例數(shù)分別為32例、0例、0例，見附表2。

3 討論

血站中的無償獻(xiàn)血是醫(yī)院急救中的重要血源，但是獻(xiàn)血人員混雜，血液的安全性得不到保證，如果將未經(jīng)過檢驗(yàn)的血液直接輸入患者體內(nèi)，可能會導(dǎo)致患者遭受病毒的感染，引發(fā)醫(yī)患糾紛。因此在收集血液之后，應(yīng)先對血液的安全性進(jìn)行檢驗(yàn)，將帶有病毒的血液剔除，避免病毒通過血液流入患者體內(nèi)[1]。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，血液檢驗(yàn)標(biāo)本檢測技術(shù)得到了很大的發(fā)展，成為臨床上對于疾病診斷的重要依據(jù)，為臨床診斷做出了較大的貢獻(xiàn)[2]。但是在實(shí)際情況下，送檢血液常由于種種原因成分發(fā)生改變，造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確的問題，漏檢的血液被輸入到患者的體內(nèi)時(shí)，患者就會感染上病毒，最終引發(fā)醫(yī)患糾紛[3]。因此，我們應(yīng)該給予血液標(biāo)本采集工作足夠的重視，提高檢測工作的效率，提高血站血液的安全性。目前血站中常用于血液樣本檢驗(yàn)的方法主要有酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)法和核酸檢驗(yàn)法兩種，酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)的工作原理為讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，然后通過顯色來檢測血液中的病毒。核酸檢驗(yàn)方法則先采用洗脫液以及洗液將樣本裂解，并將核酸提取出來，再采用先進(jìn)的技術(shù)將核酸進(jìn)行擴(kuò)增，從而分析血液中的相關(guān)抗原與抗體，該方法程序更為詳細(xì)。為分析兩種檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性，本研究特以我站接受血液檢驗(yàn)的200例血液樣本為考察對象，先后采用酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)方法與核酸檢驗(yàn)方法對于血液樣本進(jìn)行檢驗(yàn)，先采用酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)方法篩查出血液樣本中HBsAg，抗-HCV，抗-HIV的陽性例數(shù)，再對陰性樣本采用核酸檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，并對影響檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的因素進(jìn)行討論[4]。

在酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)中，檢出HBsAg，抗-HCV，抗-HIV的陽性總例數(shù)為38例，而核酸檢驗(yàn)中檢出抗-HBV陽性例數(shù)為32例。通過分析可知，在檢驗(yàn)過程中影響檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的因素主要有以下幾點(diǎn)：①血液采集量：血液采集量對于檢驗(yàn)結(jié)果也具有一定的影響。一般來說，過多或者過少的采集量都會影響血凝效果，從而影響檢測的準(zhǔn)確性。但是在實(shí)際操作中，部分采血人員對于采血量沒有給予足夠的重視，導(dǎo)致采血量不合規(guī)格，影響血液檢驗(yàn)的結(jié)果。②血液保存時(shí)間過長：當(dāng)血液保存時(shí)間過長時(shí)，部分病毒會發(fā)生變異，在檢驗(yàn)過程中就會出現(xiàn)漏檢的情況。③免疫沉默：在檢驗(yàn)過程中，部分抗體會出現(xiàn)免疫沉默的情況，也會導(dǎo)致漏檢。因此在對于血液樣本進(jìn)行檢測的過程中，應(yīng)該嚴(yán)格遵循相關(guān)的程序，各種樣品要進(jìn)行嚴(yán)格匹配，避免檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差[5]。

研究結(jié)果表明，與單純采用酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)方法相比，聯(lián)合核酸檢驗(yàn)的陽性率更高。因此在血站血液檢驗(yàn)工作中，除了通過控制血液采集量、血液保存時(shí)間等因素之外，可采用兩種檢驗(yàn)方法進(jìn)行聯(lián)合使用來提高血液檢驗(yàn)標(biāo)本檢測的準(zhǔn)確性，對于提高血液的安全性、緩解醫(yī)患關(guān)系具有非常積極的意義。