劉 然 楊向輝 胡金鑫 郝景雯

（1國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)天津站，天津300462） （2天津量信檢驗(yàn)認(rèn)證技術(shù)有限公司，天津300462）

·食品分析·

應(yīng)用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)液態(tài)食用香精中3種鄰苯二甲酸酯類化合物的測(cè)定

劉 然1，2*楊向輝1，2胡金鑫1，2郝景雯1，2

（1國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)天津站，天津300462） （2天津量信檢驗(yàn)認(rèn)證技術(shù)有限公司，天津300462）

鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)（phthalic acid easters，PAEs）又稱酞酸酯類物質(zhì)，是鄰苯二甲酸酐和特定醇酯化而成的衍生物，它是塑化劑類物質(zhì)的重要組成。鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)常用于日常和工業(yè)產(chǎn)品中，如食品包裝材料等，它是一種不易揮發(fā)、穩(wěn)定性高且易溶于多數(shù)有機(jī)試劑的油溶性黏稠狀液體，由于其與塑料間特殊的結(jié)合方式，使其自身保持較為獨(dú)立的化學(xué)性質(zhì)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，PAEs很容易從塑料制品中遷移到周圍環(huán)境中。日常生活中，大部分油脂制品采用塑料材質(zhì)包裝，而PAEs有較強(qiáng)的油溶性，這就容易造成PAEs向含油食品中遷移。眾所周知，塑化劑具有生殖毒性、免疫毒性和發(fā)育毒性，有致畸和致癌性，很多國(guó)家對(duì)其嚴(yán)格控制并將其列為優(yōu)先控制污染物。

目前測(cè)定PAEs的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法和氣相色譜質(zhì)譜法等。氣相色譜法對(duì)于待測(cè)目標(biāo)物的定性分析不全面，遇到性質(zhì)相似的待測(cè)物質(zhì)分離度較差；高效液相色譜測(cè)定PAEs的特異性和靈敏度較低；高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定目標(biāo)物的分離度較差；氣相色譜質(zhì)譜法相較于上述方法，具有靈敏度高、分離度高、定性準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用較為廣泛。液態(tài)食用香精中的脂溶性成分對(duì)PAEs具有較好的溶解性，所以此類液態(tài)香精存在被PAEs污染的風(fēng)險(xiǎn)。本研究建立了固相萃取-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定液態(tài)食用香精中鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP） 和鄰苯二甲酸二（2-乙基）乙酯（DEHP）的方法，并選取多個(gè)液態(tài)香精樣品進(jìn)行檢測(cè)，旨在為液態(tài)食用香精中PAEs的污染控制提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 塑化劑標(biāo)準(zhǔn)溶液

16種PAEs塑化劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度為1000 mg/L，其混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中包含本研究所需的鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）、鄰苯二甲酸二丁酯 （DBP） 和鄰苯二甲酸二 （2-乙基） 乙酯（DEHP），上海安譜公司。

1.2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

將質(zhì)量濃度為1000 mg/L的16種PAEs塑化劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋，最終將其稀釋成質(zhì)量濃度分別為0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3 試劑及材料

正己烷、乙酸乙酯、乙腈，農(nóng)殘級(jí)，迪馬公司；LC-Florisil固相萃取柱（1 g/6mL），上海安譜公司。

1.4 儀器

PE Clarus500氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀；Elite-5MS色譜柱，30 m×0.25 mm×0.25 μm；漩渦振蕩器，昆山市超聲儀器有限公司；LG10-2.4A高速離心機(jī)，北京時(shí)代北利有限公司；CP224S萬(wàn)分之一天平，賽多利斯。

1.5 試驗(yàn)方法

1.5.1 樣品處理

準(zhǔn)確稱取0.5 g混合均勻的樣品于10mL玻璃比色管中，加入5mL乙腈，渦旋震蕩2min，超聲1min，4000 r/min離心2min后取上清液于另一個(gè)10mL玻璃比色管中，40℃氮吹至近干，加入2mL正己烷，震蕩混勻后凈化。

先用4mL乙酸乙酯-正己烷溶液（體積比為2∶8） 將佛羅里硅藻土固相萃取柱進(jìn)行活化處理，待活化液全部排盡后，將上述2mL正己烷樣液加到固相萃取柱中收集，而后再用4mL乙酸乙酯-正己烷溶液洗脫并收集，將凈化后的流出液在40℃氮吹至近干，最后準(zhǔn)確吸取1.0mL乙腈于近干的比色管中，渦旋震蕩2min，5000 r/min離心5min，取上清液供GC-MS分析。同時(shí)做試劑空白。

1.5.2 儀器條件

GC分析條件：色譜柱為Elite-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm，非極性（5%-苯基） -甲基聚硅氧烷毛細(xì)管柱，載氣為高純度氦氣（純度≥99.999%），進(jìn)樣口溫度250℃，色譜柱程序升溫，初始溫度60℃，保持1min，再以20℃/min升溫到220℃，保持1min，再以5℃/min升溫至280℃，保持4min，載氣流速0.8mL/min，進(jìn)樣量0.5 μL。

質(zhì)譜條件：傳輸線溫度280℃，EI離子源溫度230℃，溶劑延遲5min，檢測(cè)方式為全離子掃描（TIC）。表1為DIBP、DBP和DEHP保留時(shí)間、定量離子和定性離子。

表1 DIBP、DBP和DEHP保留時(shí)間、定量離子和定性離子

2 結(jié)果與討論

2.1 方法的線性方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限

本方法為外標(biāo)法定量分析，針對(duì)檢出物響應(yīng)值大小來(lái)配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列（0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L），以目標(biāo)檢出物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，特征離子峰面積為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算這3種檢出物的回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限，結(jié)果見表2。由表2可知，DIBP、DBP和 DEHP在 0.5 mg/L～10 mg/L范圍均出現(xiàn)了較好的線性，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，按信噪比 （S/N） 為 3計(jì)算該方法的檢出限（LOD），結(jié)果為 0.040 mg/kg～0.136 mg/kg。由 16種PAEs化合物的GC-MS全離子掃描圖（圖略）可知，本方法所測(cè)得的目標(biāo)檢出物分離度強(qiáng)，響應(yīng)值高，多次試驗(yàn)中保留時(shí)間穩(wěn)定，在目標(biāo)物周圍幾乎不出現(xiàn)干擾峰，并且具有良好的重復(fù)性。

表2 3種PAES化合物的線性范圍、回歸方程和檢出限

2.2 加標(biāo)回收試驗(yàn)和精密度

稱取不含目標(biāo)檢出物的油脂進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)，向樣品中分別添加1.0mg/kg、5.0 mg/kg和10.0mg/kg混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行試驗(yàn)，前處理同1.5.1，計(jì)算回收率，并且平行6次試驗(yàn)測(cè)出精密度（RSD），結(jié)果見表3。

表3 回收率與標(biāo)準(zhǔn)偏差

由表3可知，3種塑化劑的回收率在86.6%～102.5%之間，精密度在1.6%～6.5%之間，均小于10%，由此可知該方法具有較好的精密度，可應(yīng)用于油脂樣品的定量分析。

2.3 對(duì)液態(tài)食用香精中3種PAEs塑化劑分析

本試驗(yàn)選取21種液態(tài)食用香精進(jìn)行測(cè)定分析，結(jié)果表明，在這21個(gè)樣品中，DBP和DIBP在其中7種香精中被檢出，試樣中DIBP、DBP和DEHP的測(cè)定結(jié)果見表4。

表4 檢出樣品中DIBP、DBP和DEHP的分析結(jié)果

由表4可知，DBP最高含量為34.2 mg/kg，DIBP最高含量為29.2mg/kg，DEHP僅在一種食用香精中被檢出，含量為4.2mg/kg。本試驗(yàn)所選用的香精香料均為油質(zhì)樣品，一般來(lái)講，塑化劑在含油樣品或油脂中比較容易溶出，并且此種塑化劑溶出現(xiàn)象不僅僅來(lái)源于其塑料外包裝，在生產(chǎn)、運(yùn)輸及貯藏環(huán)節(jié)都有遷移。此外，某些天然香精香料，本身就含有大量的PAEs成分。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)建立了固相萃取-GC/MS測(cè)定液態(tài)食用香精中3種PAEs塑化劑的方法，并且對(duì)選取的21種油質(zhì)香精進(jìn)行分析。結(jié)果表明，3種PAEs塑化劑在0.5 mg/L～10 mg/L范圍內(nèi)出現(xiàn)了良好的線性，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，信噪比（S/N） 為3時(shí)，該方法的檢出限為0.040 mg/kg～0.136 mg/kg，平均回收率在86.6%～102.5%之間，精密度RSD均小于6.5%，該方法的精密度和回收率均能滿足油質(zhì)樣品的定量分析；DBP和DIBP在7種香精中被檢出，其中DBP最高含量為34.2 mg/kg，DIBP最高含量為29.2 mg/kg，DEHP在1個(gè)樣品中有所檢出，含量為4.2 mg/kg，統(tǒng)計(jì)香精香料產(chǎn)品中PAEs物質(zhì)的含量，對(duì)指導(dǎo)該類別產(chǎn)品在食品中的安全使用方法及添加量具有指導(dǎo)性意義。

［1］呂曉靜.食品和食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估［D］.青島：青島大學(xué)，2014.

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［3］牛增元，羅忻，葉曦雯.色譜質(zhì)譜技術(shù)在消費(fèi)品安全檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)展［J］.檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊，2011，21（4）:1-5.

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Determination ofthree kinds ofphthalic acid esters in liquid edible essence by GC/MS

LIU Ran1，2*YANG Xianghui1，2HU Jinxin1，2HAO Jingwen1，2

1（Tianjin unit ofnational light industrial food qualitysupervision and inspection，Tianjin 300462，China）

2（Tianjin liang-xin testing&certification technologyCo.,Ltd，Tianjin 300462，China）

建立了氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定液態(tài)食用香精中3種鄰苯二甲酸酯類塑化劑（phthalic acid easters，PAEs） 的方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，目標(biāo)檢出物在0.5 mg/L～10 mg/L范圍內(nèi)有很好的線性相關(guān)性（R2≥0.9979），方法檢出限為0.040 mg/kg～0.136 mg/kg（S/N=3），平均回收率在86.6%～102.5%之間，精密度RSD均小于6.5%，該方法的精密度和回收率滿足液態(tài)香精的定量分析。應(yīng)用此方法對(duì)多種樣品進(jìn)行測(cè)定分析，結(jié)果表明，鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基） 乙酯（DEHP）在試樣中均有不同程度的檢出。

氣相色譜-質(zhì)譜；鄰苯二甲酸酯；液態(tài)食用香精

To establish a method for the determination of 3 PAEs in edible essence by GC/MS,the method was linear over the range from0.5 mg/Lto10 mg/Lwith correlation coefficients(R2≥0.9979)，the limits ofdetection of3 kinds of PAEs were from 0.040 mg/kg to 0.136 mg/kg（S/N=3） ,the average recovery was 86.6%to 108%and the precision was less than 6.5%,soit can be used for the quantitative analysis；This method is applied toanalyze the samples,the results showed that the DBP,DIBP and DEHP were detected in the liquid edible essence.

gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS）；phthalic acid esters（PAEs）；liquid edible essence

TS207.3

A

1673-6044（2017）01-0048-04

10.3969/j.issn.1673-6044.2017.01.014

*劉然，女，1975年出生，2010年畢業(yè)于天津科技大學(xué)食品工程專業(yè)，高級(jí)工程師。

2016-09-30