潘 靜，徐 妍，傅 楊，東 琴，劉潤(rùn)峰，高敬雨，金鼎俊

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15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸異辛酯可分散油懸浮劑高效液相色譜分析

潘 靜1，徐 妍1，傅 楊2，東 琴1，劉潤(rùn)峰1，高敬雨1，金鼎俊2

(1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 102206；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南 650201)

采用高效液相色譜法，以乙腈和水(0.05%磷酸水溶液)為流動(dòng)相，使用C18反相柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，在230 nm波長(zhǎng)下對(duì)15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸異辛酯可分散油懸浮劑進(jìn)行分離和定量分析。結(jié)果表明，該分析方法對(duì)有效成分唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯的線性相關(guān)系數(shù)分別為0.999 3和0.999 5，標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.12和0.17，變異系數(shù)分別為1.92%和1.83%，平均回收率分別為99.32%和99.57%。

唑啉草酯；氯氟吡氧乙酸異辛酯；高效液相色譜；分析

唑啉草酯，英文名稱：pinoxaden，CAS號(hào)：243973-20-8，分子式：C23H32N2O4，化學(xué)名稱：8-(2,6-二乙基-4-甲苯基)-1,2,4,5-四氫-7-氧-7吡唑[1,2-d] [1,4,5]氧二唑頻-9-基-2,2-二甲基丙酸酯。唑啉草酯是瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司開發(fā)的一種新型除草劑[1]。該劑屬新苯基吡唑啉類除草劑，為乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抑制劑，可以阻止脂肪酸的合成，使細(xì)胞生長(zhǎng)分裂停止，破壞細(xì)胞膜的含脂結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致雜草死亡。唑啉草酯具有內(nèi)吸傳導(dǎo)性，主要用于防除多種一年生禾本科雜草，如燕麥屬、黑麥草屬、藕草屬和狗尾草屬等屬的重要禾本科雜草[1-3]。

氯氟吡氧乙酸異辛酯，英文名稱：fluroxypyr-meptyl，CAS號(hào)：81406-37-3，分子式：C15H21Cl2FN2O3，化學(xué)名稱：4-氨基-3,5-二氯-6-氟-2-吡啶氧乙酸異辛酯。氯氟吡氧乙酸異辛酯由美國(guó)陶氏益農(nóng)公司開發(fā)生產(chǎn)，是有機(jī)雜環(huán)類選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型苗后除草劑，施藥后很快被植物吸收，使敏感植物出現(xiàn)典型激素類除草劑的反應(yīng)，植株畸形，扭曲，最終枯死。該劑適用于小麥、大麥、玉米、葡萄、果園、牧場(chǎng)、林地、草坪等地防除闊葉雜草，如豬殃殃、卷莖蓼、馬齒莧、龍葵、田旋花、蓼、莧等，對(duì)禾本科雜草無效。氯氟吡氧乙酸異辛酯對(duì)作物安全，在土壤中易降解，半衰期較短，不會(huì)對(duì)后茬作物造成藥害[4]。

藥效試驗(yàn)證明，唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸異辛酯復(fù)配適用于防除小麥田一年生禾本科、闊葉雜草，速效性好，殺草譜廣。唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸異辛酯單劑的分析方法已有報(bào)道[2,4,5]。有關(guān)唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸異辛酯油懸浮劑的液相色譜分析，目前尚未見公開報(bào)道。

本文采用反相高效液相色譜法。使用C18反相柱，紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，對(duì)有效成分進(jìn)行分離和定量分析。此方法同時(shí)適用唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸異辛酯原藥及制劑的分析，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好的特點(diǎn)[2,5]，適用于大生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)品質(zhì)量的檢測(cè)分析。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：Agilent 1260，具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜數(shù)據(jù)處理工作站；色譜柱：150 mm×4.6 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝ZORBAX SB-C18填充物，粒徑5 μm；過濾器：濾膜孔徑0.45 μm；進(jìn)樣器：50 μL；超聲波清洗器。

乙腈：色譜純；磷酸：分析純；水：新蒸二次蒸餾水；唑啉草酯標(biāo)準(zhǔn)樣品：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%(沈陽化工研究院)；氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)準(zhǔn)樣品：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%(沈陽化工研究院)；15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸異辛酯油懸浮劑(江蘇明德立達(dá)作物科技有限公司)。

1.2 液相色譜操作條件

流動(dòng)相：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)=75+25(體積比)；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣體積：10 μL；保留時(shí)間：唑啉草酯約：3.6 min，氯氟吡氧乙酸異辛酯約：9.8 min。唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯的液相色譜圖見圖1、圖2。

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取唑啉草酯標(biāo)樣約10 mg、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)樣約15 mg(精確至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，搖勻后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取試樣約163 mg(精確至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，搖勻后離心，取上清液備用。

1.3.3 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯響應(yīng)值相對(duì)變化小于1.5%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1-唑啉草酯；2-氯氟吡氧乙酸異辛酯

1-唑啉草酯；2-氯氟吡氧乙酸異辛酯

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)1(%)按下式計(jì)算：

式中：1——標(biāo)樣溶液中唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積的平均值；2——試樣溶液中唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積的平均值；1——唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)樣的質(zhì)量，g；2——試樣的質(zhì)量，g；——標(biāo)樣中唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

通過紫外可見分光光度計(jì)UV-1800在190~400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描選擇，發(fā)現(xiàn)唑啉草酯在200.20~230.00 nm和255.00~275.00 nm均有較大吸收，氯氟吡氧乙酸異辛酯在210.40~240.00 nm均有較大吸收，但考慮到溶劑及助劑對(duì)吸收的影響和樣品中兩組分的峰高及峰面積盡量接近，最終選定了230 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)(圖3、圖4)。

圖3 唑啉草酯紫外掃描圖

圖4 氯氟吡氧乙酸異辛酯紫外掃描圖

色譜柱選擇常規(guī)的ZORBAX SB-C18反相柱。根據(jù)唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯物化性質(zhì)，用乙腈作為溶劑溶解樣品，并選擇乙腈和磷酸水溶液作為流動(dòng)相。為了得到更好的分離效果和峰形，將流動(dòng)相按不同的比例在色譜柱上進(jìn)行選擇比較試驗(yàn)，最終確定流動(dòng)相為乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)。當(dāng)流速控制在1.0 mL/min時(shí)，有效成分與雜質(zhì)能很好地分離，峰形對(duì)稱，基線平穩(wěn)，保留時(shí)間短。綜合以上因素，最終選定乙腈、水(0.05%磷酸水溶液)作為流動(dòng)相，體積比為75︰25。

2.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)

按1.3.1中方法配制不同濃度的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述色譜條件操作，每個(gè)濃度重復(fù)進(jìn)樣2次，并且相鄰2針的峰面積相對(duì)偏差小于1%，求其峰面積平均值。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得唑啉草酯線性方程為=10.123 3－6.004 1，相關(guān)系數(shù)2=0.999 3，表明線性關(guān)系良好(圖5)；氯氟吡氧乙酸異辛酯的線性方程為=16.450 7+52.090 2，相關(guān)系數(shù)2=0.999 5，表明線性關(guān)系良好(圖6)。

圖5 唑啉草酯線性關(guān)系圖

圖6 氯氟吡氧乙酸異辛酯線性關(guān)系圖

2.3 分析方法的精密度試驗(yàn)

選取有代表性的15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸異辛酯OD試樣一個(gè)，在上述色譜操作條件下平行測(cè)定5次，計(jì)算唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸異辛酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.12、0.17，變異系數(shù)分別為1.92%、1.83%，結(jié)果見表1。

表1 分析方法的精密度測(cè)定結(jié)果

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

采用標(biāo)準(zhǔn)添加法，在測(cè)得質(zhì)量分?jǐn)?shù)的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯試樣中加入一定量的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)準(zhǔn)品，再按上述色譜操作條件進(jìn)行分析，測(cè)得唑啉草酯的平均回收率為99.32%，氯氟吡氧乙酸異辛酯的平均回收率為99.57%，結(jié)果見表2。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

3 結(jié) 論

本文提出的15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸異辛酯可分散油懸浮劑中有效成分唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯的分析方法，同時(shí)適用于唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯原藥及制劑的分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸異辛酯在測(cè)試濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，方法準(zhǔn)確度和精密度較高，具有操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、可靠及分離效果好的優(yōu)點(diǎn)，是產(chǎn)品質(zhì)量控制和應(yīng)用研究中較為理想的分析方法。

[1] 《農(nóng)藥科學(xué)與管理》編輯部. 唑啉草酯[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2010, 31(11): 59－60.

[2] 武鵬, 于榮. 5%唑啉草酯乳油高效液相色譜分析方法研究[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2016, 37(4): 48－50.

[3] 葉萱. 唑啉草酯[J]. 世界農(nóng)藥, 2014, 36(1): 60－61.

[4] 劉長(zhǎng)令. 世界農(nóng)藥大全(除草劑卷)[M]. 1版. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2008: 47－50, 109－110, 206－208.

[5] 王海霞,高曉暉. 高效液相色譜法測(cè)定氯氟吡氧乙酸異辛酯的含量[J]. 農(nóng)藥, 2014, (1): 31－33.

Analysis of Pinoxaden + Fluroxypyr-meptyl 15% OD by HPLC

PAN Jing, XU Yan, FU Yang, DONG Qin, LIU Runfeng, GAO Jingyu, JIN Dingjun

(1.Beijing Mindleader Agroscience Co., Ltd, Beijing 102206,China; 2.Yunnan Agricultural University, Yunnan 650201,China)

A method for separation and quantitative analysis of pinoxaden + fluroxypyr-meptyl 15% OD by HPLC with acetonitrile and 0.05% phosphoric acid solution as mobile phase, ZORBAX SB-C18column and UV-absorbance detector at 230 nm wavelength was established. The results showed that the linears correlation coefficient of pinoxaden and fluroxypyr-meptyl were 0.999 3 and 0.999 5, the standard deviations were 0.12 and 0.17, the variation coefficients were 1.92% and 1.83%, and average recoveries were 99.32% and 99.57%, respectively.

pinoxaden; fluroxypyr-meptyl; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.03.09

TQ450.7

A

1009-6485(2017)03-0052-04

云南省科技惠民計(jì)劃專項(xiàng)(2016RA007)“防除云南高原麥田惡性虉草農(nóng)藥新制劑配方研究與示范”

潘靜(1974—)，女，安徽鳳陽人，工程師，主要從事農(nóng)藥質(zhì)量分析與檢測(cè)工作。Tel: 010-56071481，E-mail：panjing@mdldagro.com。

2016-12-31。