馬新福 劉 梅 戈 銳 趙久達(dá)

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科，青海 西寧 810000)

結(jié)直腸癌中血小板反應(yīng)蛋白-1和生存素的表達(dá)及臨床意義

馬新福 劉 梅1戈 銳 趙久達(dá)2

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科，青海 西寧 810000)

目的檢測(cè)結(jié)直腸癌中血小板反應(yīng)蛋白(TSP)-1和生存素(Survivin)的表達(dá)，探討二者在腫瘤中的關(guān)系及意義。方法確診為結(jié)直腸癌患者62例為觀察組，正常結(jié)腸黏膜組織21例為對(duì)照組，均留取術(shù)后蠟塊組織，切片后應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)TSP-1和Survivin的表達(dá)。結(jié)果觀察組TSP-1表達(dá)陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組，Survivin表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組。觀察組中TSP-1和Survivin表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤最大徑、脈管累犯相關(guān)，Survivin表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中TSP-1和Survivin無(wú)明顯相關(guān)性。結(jié)論結(jié)直腸癌中TSP-1低表達(dá)、Survivin高表達(dá)對(duì)腫瘤形成和進(jìn)展有一定促進(jìn)作用，二者無(wú)明顯協(xié)同作用。

結(jié)直腸癌；血小板反應(yīng)蛋白-1；生存素；免疫組化

結(jié)直腸癌好發(fā)于中老年人，病變形成中上皮細(xì)胞異型增生，呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，可以對(duì)局部組織形成破壞，部分患者伴有轉(zhuǎn)移〔1〕。腫瘤形成中相關(guān)蛋白出現(xiàn)明顯異?！?〕。血小板反應(yīng)蛋白(TSP)-1是TSPs家族A亞組中的成員，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞活動(dòng)、細(xì)胞骨架組織和細(xì)胞分化的過(guò)程〔3〕。生存素(Survivin)是被發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白家族中最小的新成員，具有強(qiáng)大的抗凋亡作用〔4〕。研究顯示Survivin表達(dá)升高對(duì)腫瘤形成和進(jìn)展中有一定的促進(jìn)作用〔5〕。本文關(guān)注TSP-1和Survivin在結(jié)直腸癌中的表達(dá)特征及相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年1月至2016年7月青海大學(xué)附屬醫(yī)院確診為結(jié)直腸癌患者62例為觀察組，均經(jīng)手術(shù)治療，并經(jīng)術(shù)后病理醫(yī)師閱片確診，其中男33例，女29例；年齡37～79(平均56.8)歲；其中高分化20例，中分化27例，低分化15例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近3個(gè)月有嚴(yán)重感染；②有先天性疾?。虎酆喜⑵渌鞴賽盒阅[瘤。正常結(jié)腸黏膜組織21例為對(duì)照組，其中男11例，女10例；年齡40～76(平均53.6)歲。兩組一般臨床資料無(wú)明顯差異，具有可比性。

1.2免疫組化檢測(cè)TSP-1和Survivin的表達(dá) 術(shù)后組織均經(jīng)甲醛溶液固定，常規(guī)取材，脫水，石蠟包埋，切片后應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)TSP-1和Survivin的表達(dá)，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均由病理科主管技師進(jìn)行操作，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，做好質(zhì)量控制工作。

1.3TSP-1和Survivin的判讀 TSP-1和Survivin的陽(yáng)性部位是細(xì)胞質(zhì)，以出現(xiàn)淡黃到棕黃色顆粒為陽(yáng)性。先在低倍鏡下選擇上皮細(xì)胞集中的區(qū)域進(jìn)行觀察，再在高倍鏡下選擇5個(gè)視野進(jìn)計(jì)數(shù)，取平均值。陽(yáng)性率<10%為陰性，≥10%為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線(xiàn)性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組TSP-1和Survivin陽(yáng)性率比較 觀察組較對(duì)照組TSP-1明顯低表達(dá)，Survivin明顯高表達(dá)(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組TSP-1和Survivin陽(yáng)性表達(dá)率比較〔n(%)〕

2.2觀察組TSP-1和Survivin表達(dá)陽(yáng)性率在不同臨床病理特征中的比較 觀察組中TSP-1和Survivin表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤最大徑、脈管累犯相關(guān)；Survivin表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

2.3觀察組TSP-1和Survivin相關(guān)性 TSP-1和Survivin無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。

表2 觀察組中TSP-1和Survivin表達(dá)的陽(yáng)性率在不同臨床病理特征中的比較〔n(%)〕

3 討 論

結(jié)直腸癌病變形成中涉及較多的遺傳易感因素、基因組學(xué)和蛋白組學(xué)的表達(dá)異常〔6〕，研究顯示其與癌基因、抑癌基因、血管生成、凋亡等腫瘤形成因素均相關(guān)〔7〕。TSP-1是最早于1971年發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管生成抑制因子，在調(diào)節(jié)組織細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的黏附、遷移及增殖方面可能有一定作用〔8〕。TSP-1可以抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的遷移、增殖，能可以減少血管內(nèi)皮細(xì)胞形成細(xì)胞索并發(fā)展成血管腔的能力〔9,10〕。由于TSP-1可以抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)及運(yùn)動(dòng)，因此TSP-1高表達(dá)也可以抑制腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。Survivin基因定位于染色體17q25，全長(zhǎng)14.7 kb，由3個(gè)內(nèi)含子和4個(gè)外顯子組成，其表達(dá)的蛋白編碼142個(gè)氨基酸〔11,12〕。Survivin在正常組織中的表達(dá)極少，而在生長(zhǎng)活躍的胚胎組織和腫瘤組織中表達(dá)升高〔13〕。Survivin表達(dá)具有周期依賴(lài)性，只在細(xì)胞周期的G2/M期表達(dá)，腫瘤組織中Survivin表達(dá)升高使惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞能突破凋亡的調(diào)控點(diǎn)處于分裂的狀態(tài)中，促進(jìn)腫瘤性增殖及腫瘤生長(zhǎng)〔14,15〕。賴(lài)?yán)ぬm等〔16〕發(fā)現(xiàn)Survivin在結(jié)腸癌中表達(dá)升高，認(rèn)為Survivin表達(dá)升高是轉(zhuǎn)移的重要提示因素，同時(shí)患者預(yù)后差。

本研究提示TSP-1發(fā)揮的是抑癌作用，主要機(jī)制與對(duì)血管生成抑制有明顯關(guān)聯(lián)，也可能與對(duì)VEGF表達(dá)下調(diào)有關(guān)。本文提示Survivin發(fā)揮的是癌基因樣的作用，這與Survivin本身對(duì)凋亡的拮抗有關(guān)，此時(shí)凋亡細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞處于增殖狀態(tài)，細(xì)胞生存持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。TSP-1和Survivin二者異常表達(dá)時(shí)腫瘤處于生長(zhǎng)活躍狀態(tài)，此時(shí)腫瘤體積增大，對(duì)周?chē)M織的侵襲破壞能力增強(qiáng)〔17,18〕。本文結(jié)果提示二者均可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞對(duì)脈管的侵犯，使腫瘤細(xì)胞易于播散。Survivin參與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤內(nèi)在分化過(guò)程中，由于分化是細(xì)胞由幼稚到成熟的多種階段的表現(xiàn)，此時(shí)的腫瘤細(xì)胞停滯于較幼稚狀態(tài)，惡性程度增加。雖然腫瘤中TSP-1和Survivin異常表達(dá)均為促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的因素，但是二者的通路不在同一水平上。TSP-1對(duì)血管的影響是抑制作用，Survivin對(duì)血管的影響是促進(jìn)作用，因此二者是拮抗的，但是其表達(dá)的平衡不協(xié)調(diào)〔19,20〕，二者通過(guò)各自的調(diào)節(jié)途徑發(fā)揮各自的作用。TSP-1表達(dá)下調(diào)或丟失、Survivin的表達(dá)升高使腫瘤細(xì)胞易于侵襲周?chē)M織和鄰近臟器，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、血管生成和遷移。

1李曉霞,逯曉波,劉建利,等.1 075例結(jié)腸癌患者臨床病理分析〔J〕.中華胃腸外科雜志,2005;8(6):484-6.

2鄭豐平,袁世珍.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)與結(jié)直腸癌血管生成、轉(zhuǎn)移的關(guān)系〔J〕.中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2002;23(1):73-5.

3張春麗,楊 敏.血小板反應(yīng)蛋白-1、E-Cadherin表達(dá)與大腸癌血管生成關(guān)系〔J〕.腫瘤學(xué)雜志,2009;15(2):112-4.

4Xiang Y,Yao H,Wang S,etal.Prognostic value of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Laryngoscope,2006;116(1):126-30.

5Ku JH,Kwak C,Lee HS,etal.Expression of survivin,a novel inhibitor of apoptosis,in superficial transitional cell carcinoma of the bladder〔J〕.J Urol,2004;171(1):631-5.

6Ishigami SI,Arii S,Furutani M,etal.Predictive value of vascular endothelial growth factor(VEGF) in metastasis and prognosis of human colorectal cancer〔J〕.Briti J Cancer,1998;78(10):1379-84.

7Bettstetter M,Woenckhaus M,Wild PJ,etal.Elevated nuclear maspin expression is associated with microsatellite instability and high tumour grade in colorectal cancer〔J〕.J Pathol,2005;205(5):606-14.

8駱元斌,顧立萍,黃小玲.TSP-1、Survivin、VEGF表達(dá)在骨肉痛肺轉(zhuǎn)移中的意義〔J〕.西部中醫(yī)藥,2012;25(6):102-5.

9Wakiyama T,Shinohara T,Shirakusa T,etal.The localization of thrombospondin-1(TSP-1),cysteine-serine-valine-threonine-cysteine-glycine(CSVTCG) TSP receptor,and matrix metalloproteinase-9(MMP-9) in colorectal cancer〔J〕.Histol Histopathol,2001;16(2):345-51.

10Tang D,Nagano H,Yamamoto H,etal.Angiogenesis in cholangiocellular carcinoma:expression of vascular endothelial growth factor,angiopoietin-1/2,thrombospondin-1 and clinicopathological significance〔J〕.Oncol Reports,2006;15(3):525-32.

11Sutton CD,O′Byrne K,Goddard JC,etal.Expression of thrombospondin-1 in resected colorectal liver metastases predicts poor prognosis〔J〕.Clin Cancer Res,2005;11(18):6567-73.

12Miyanaga K,Kato Y,Nakamura T,etal.Expression and role of thrombospondin-1 in colorectal cancer〔J〕.Anticancer Res,2002,22(6C):3941-8.

13朱紅霞,王益華,周翠琦,等.抗凋亡基因survivin在食管癌中的表達(dá)及其意義〔J〕.中華腫瘤雜志,2005;27(1):22-4.

14Ito T,Shiraki K,Sugimoto K,etal.Survivin promotes cell proliferation in human hepatocellular carcinoma〔J〕.Hepatology,2000;31(5):1080-5.

15Muzio LL,Pannone G,Staibano S,etal.Survivin expression in oral squamous cell carcinoma〔J〕.Brit J Cancer,2003;89(12):2244-8.

16賴(lài)?yán)ぬm,鄒繼彬.Paxillin和Survivin在結(jié)腸癌中的表達(dá)及其意義〔J〕.實(shí)用醫(yī)技雜志,2008;15(11):1404-5.

17文 衛(wèi),楊連粵,黃耿文,等.TSP-1和VEGF在肝細(xì)胞癌新生血管生成中的作用〔J〕.中華肝膽外科雜志,2005;11(1):17-9.

18Takai N,Miyazaki T,Nishida M,etal.Expression of survivin is associated with malignant potential in epithelial ovarian carcinoma〔J〕.Int J Mol Med,2002;10(2):211-6.

19陶紅光,于東風(fēng),李紅春.TSP-1和VEGF在胃癌微血管生成中的調(diào)控作用及其臨床意義〔J〕.中華解剖與臨床雜志,2010;15(4):246-9.

20Karam JA,Lotan Y,Ashfaq R,etal.Survivin expression in patients with non-muscle-invasive urothelial cell carcinoma of the bladder〔J〕.Urology,2007;70(3):482-6.

〔2017-06-15修回〕

(編輯 苑云杰)

R735

A

1005-9202(2017)19-4817-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.19.057

1 青海大學(xué)附屬醫(yī)院急救中心 2 青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科

趙久達(dá)(1977-)，男，碩士，主任醫(yī)師，主要從事胃癌研究。

馬新福(1973-)，男， 副主任醫(yī)師，主要從事胃腸疾病研究。