范子梁，金冰慧，徐霞芳，蔣巧穎，徐荷林

（溫州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 溫州 325035）

·論 著·

包載姜黃素納米膠束的制備與體外抗腫瘤評價

范子梁，金冰慧，徐霞芳，蔣巧穎，徐荷林

（溫州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 溫州 325035）

目的：構(gòu)建載姜黃素納米膠束，體外評價其對C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長抑制作用。方法：合成新型十一烯酸-接枝-ε-多聚賴氨酸（ε-PLL-UNA）聚合物，并對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，采用芘熒光探針法對其臨界膠束濃度進(jìn)行測定；以ε-PLL-UNA為材料，采用透析法制備載姜黃素納米膠束，以動態(tài)光散射和透射電鏡對其粒徑、形態(tài)進(jìn)行表征，以動態(tài)透析法測定藥物釋放行為，以激光共聚焦顯微鏡觀察體外細(xì)胞攝取性，以腫瘤球模型考察其體外抗腫瘤作用。結(jié)果：1H-NMR和FT-IR結(jié)果表明ε-PLL-UNA聚合物成功合成，其臨界膠束濃度為0.19 g/L，能自發(fā)組裝成膠束；載姜黃素納米膠束載藥量能達(dá)到12.22%±2.13%、包封率則高達(dá)85.12%±3.64%，平均粒徑為（60.6±2.1）nm、Zeta電位為（28.2±5.6）mV，具有球形微觀結(jié)構(gòu)；該納米膠束48 h釋放84%的姜黃素，體外快速被C6細(xì)胞攝取；與姜黃素溶液相比，該納米膠束能明顯抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞球的生長。結(jié)論：ε-PLL-UNA聚合物膠束對姜黃素具有較高的載藥量，粒徑小于100 nm、分布均勻，體外緩慢釋放藥物，提高了C6細(xì)胞對姜黃素的攝取，而且對C6細(xì)胞球具有有效的殺傷作用。

姜黃素；膠束；聚賴氨酸；十一烯酸；神經(jīng)膠質(zhì)瘤；細(xì)胞球

Abstract: Objective:To prepare a novel polymer micelles encapsulating curcumin (CUR) and evaluate its anti-tumor effect on glioma in vitro.Methods:A novel polymer, undecenoic acid-grafted-ε-polylysine (ε-PLLUNA), was synthesized, and its chemical structure was confirmed by1H-NMR and FT-IR. The CAC value of ε-PLL-UNA polymer was also detected by pyrene fluorescence probe. CUR-loaded micelle was prepared by dialysis method using ε-PLL-UNA as materials, and its particle size and morphology were also studied under dynamic light scattering (DLS) and transmission electron microscope (TEM), respectively. Furthermore, in vitro drug release profiles from CUR-Micelles were explored by dynamic dialysis method. Finally, the cellular toxicity against C6 cells spheroids and the cellular uptake of CUR-Micelles were evaluated.Results:ε-PLL-UNA polymer was successfully synthesized and able to self-assemble into micelles above its CAC value of 0.19 g/L. CUR-loaded micelle had a mean diameter of (60.6±2.1)nm, and zeta potential of (28.2±5.6)mV, exhibiting the spherical shape determined by TEM. Drug loading content and drug loading efficiency for CUR-loaded micelle were high up to 12.22%±2.13% and 85.12%±3.64%, respectively. About 84% of CUR were released from the micelles in 48 hours. CUR-loaded micelle can promote the cellular uptake of its encapsulated CUR by C6 cells, displaying a significantly higher cytotoxicity against C6 cells. Besides, the growth of C6 cells spheroids was significantly inhibited by CUR-loaded micelle.Conclusion:CUR is efficiently encapsulated in ε-PLL-UNA micelles with a particle size of less than 100 nm, which improved the cellular uptake of C6 cells. The sustained-release of CUR from CUR-loaded micelle is also observed. More importantly, CUR-Micelles has superior growth inhibition against C6 cells spheroids.

Key words:curcumin; micelles; polylysine; undecylenic acid; glioma; cells spheroids

姜黃素（curcumin，CUR）是一種天然酚類色素，廣泛存在于姜黃屬植物姜黃、莪術(shù)、郁金等的根莖中，是姜黃的重要活性成分。姜黃素對機(jī)體各系統(tǒng)作用廣泛，具有較好的抗氧化、抗炎、抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤等藥理作用，且毒性低、不良反應(yīng)小[1]。但姜黃素存在水溶性差、難吸收、易降解等缺點，限制了其在臨床上的推廣應(yīng)用。為克服以上不足，可將其制成磷脂復(fù)合物、固體分散體、包合物和聚合物膠束等[2]。本實驗室以ε-聚賴氨酸（ε-polylysine，ε-PLL）為親水嵌段、十一烯酸（10-Undecenoic acid，UNA）為疏水嵌段合成新型十一烯酸-接枝-ε-多聚賴氨酸（ε-PLL-UNA）聚合物。以該聚合物為納米材料，自發(fā)組裝成膠束，裝載姜黃素，制備載姜黃素納米膠束，評價其體外抗腫瘤效果。

1 材料與儀器

1.1 材料 ε-PLL-UNA（鏈段分子量：ε-PLL為5 000 Da，UNA為184 Da）、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽（EDC）、N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）、姜黃素（98%）、芘熒光探針（分析標(biāo)準(zhǔn)品）購自上海阿拉丁公司；DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清購自美國Gibco公司，2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2，4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽（CCK-8）購自日本株式會社同仁化學(xué)研究所，DAPI購自美國Sigma公司。1.2 儀器 FD-1C冷凍干燥機(jī)（北京天德佑有限公司），JEOLJEM-2000EX透射電鏡（transmission electron microscope，TEM）（日本JEOL公司），SpectraMax M3酶標(biāo)儀（美國Molecular Devices公司），馬爾文納米粒度電位儀Zetasizer Nano ZSP（英國Malvern公司），Bruker Tensor 27紅外光譜儀、Bruker AV-600核磁共振儀（德國Bruker公司），Nikon A1R/A1激光共聚焦顯微鏡（日本Nikon公司）。

2 方法

2.1 ε-PLL-UNA聚合物的合成與結(jié)構(gòu)確證 稱取2 g的聚賴氨酸溶于20 mL DMSO溶液中，超聲1 h直至完全溶解。另取1 mL UNA先溶于6 mL DMSO中，加入0.750 g EDC和0.120 g NHS室溫攪拌溶解，活化UNA的羧基。將UNA/DMSO溶液緩慢滴加到ε-PLL溶液中，室溫攪拌反應(yīng)24 h后，用1 L蒸餾水透析48 h（每隔8 h，換水1次），凍干得到固體粉末。

真空干燥的ε-PLL-UNA聚合物粉末約5 mg與200 mg KBr粉末充分研磨混合，壓片制樣，KBr空白片扣除背景，掃描范圍4 000～400 cm-1。分辨率為4 cm-1，譜峰讀數(shù)精度為0.01 cm-1。ε-PLL-UNA的核磁共振氫譜鑒定在Bruker AV-600核磁共振儀上完成，所有樣品經(jīng)過DMSO-d6處理。

2.2 臨界膠束濃度測定 熒光探針芘標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液的配制（6×10-6mol/L）：用分析天平準(zhǔn)確地稱取0.0012 g芘，燒杯中用適量丙酮溶解后轉(zhuǎn)入1 L容量瓶中，用丙酮定容并搖勻，配制得到濃度為6×10-6mol/L的芘丙酮貯備溶液，使用時在膠束水溶液中保持6×10-7mol/L的最終濃度。

膠束系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：分別取1 mL配制的芘丙酮溶液于8個燒瓶中，讓其完全揮發(fā)備用。再稱取100 mg凍干材料粉末于1 L容量瓶中，加水溶解定容，取不同量上述膠束溶液進(jìn)行稀釋，配制8個不同的溶液濃度，分別為0.72、0.36、0.144、0.072、0.036、0.0144、0.0072、0.0036 g/L；將不同濃度的膠束水溶液分別取10 mL，分別加入上述含芘的燒瓶中。

2.3 載姜黃素納米膠束的制備 稱取8～16 mg姜黃素以及100 mg ε-PLL-UNA聚合物，溶于6 mL DMSO中，磁力攪拌使其完全溶解；在劇烈攪拌下，將4 mL姜黃素DMSO溶液緩慢滴入聚合物溶液中，室溫避光攪拌5 min，混合均勻，將混勻后液體轉(zhuǎn)移至透析袋內(nèi)（透析膜截留分子量為3 500 Da），對蒸餾水透析24 h，開始每隔12 h換水1次除去有機(jī)溶劑，5 000 r/min離心除去藥物沉淀，得上清液，即為載姜黃素納米膠束（CUR-Micelles）。選取不同總投藥量（8、10、12、14、16 mg），固定材料每次用量為100 mg，以考察最大載藥量和包封率。

2.4 載姜黃素納米膠束的表征 聚合物納米粒水溶液過0.45 μm膜，經(jīng)適當(dāng)稀釋后，于常溫條件下固定激光波長為632.8 nm、散射角90°，使用動態(tài)光散射激光粒度測定儀（dynamic light scattering，DLS）測定納米膠束粒徑和Zeta電位；TEM檢測納米膠束形態(tài)，取載藥納米膠束滴于鋪有碳膜的銅網(wǎng)上，以無纖維濾紙從銅網(wǎng)邊緣吸掉多余液體，滴入2%磷鎢酸染色，自然晾干2 d，置于TEM中以100 kV加速電壓檢視、拍照。

2.5 載姜黃素納米膠束體外釋放 取1 mL載藥量為200 μg姜黃素納米膠束加至透析袋內(nèi)（截留分子量為3 500 Da），扎緊密封兩端，放置在含有0.5%吐溫80的10 mL pH 7.4 PBS釋放介質(zhì)中，置水浴搖床于37 ℃，120 r/min震搖，不同時間點用全新的10 mL釋放介質(zhì)替換原有的介質(zhì)，用紫外分光光度計測定姜黃素在431 nm的吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線換算濃度，計算累積釋放率，繪制釋放曲線。以DMSO溶解的姜黃素溶液劑（CUR solution）作為對照，采用同樣的方法進(jìn)行體外釋放實驗。

2.6 載姜黃素納米膠束的載藥量及包封率測定

2.6.1 紫外分光光度法測定姜黃素濃度方法的建立：準(zhǔn)確移取150 μg/mL姜黃素儲備液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.7 mL于10 mL容量瓶中，用DMSO定容，搖勻，待測。用紫外分光光度計在431 nm波長下測定吸光度，根據(jù)所得的吸光度A和相應(yīng)的濃度C作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

精密量取空白納米膠束1 mL（20 mg/mL）置于10 mL量瓶中，分別加入姜黃素儲備液0.3、0.5、0.7 mL，配制成質(zhì)量濃度為4.5、7.5、10.5 μg/mL的溶液，每個濃度水平3份，加DMSO超聲波（240 W，40 kHz）處理20 min，DMSO稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾后，紫外檢測431 nm的吸光度，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成濃度。

2.6.2 載藥量及包封率測定：取0.2 mL載藥納米膠束至10 mL容量瓶中，加入DMSO定容至刻度線，用紫外分光光度計在431 nm處測定吸光度。按照下列公式計算載藥量及包封率：

2.7 載姜黃素納米膠束的體外抗腫瘤效果

2.7.1 C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的培養(yǎng)：C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞（上海生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所）使用含有10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基，待培養(yǎng)皿細(xì)胞融合率達(dá)85%，用含有0.25% EDTA的胰酶至培養(yǎng)箱中消化30 s，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

2.7.2 CCK8法細(xì)胞毒性實驗：將對數(shù)生長期的C6細(xì)胞消化后，用培養(yǎng)液稀釋至4×103個/mL細(xì)胞密度，吹打后以100 μL/每孔將細(xì)胞懸液接種在96孔板中，將96孔板置細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24 h使細(xì)胞貼壁。待貼壁后，加入100 μL含有游離藥物或載藥納米膠束的新鮮培養(yǎng)介質(zhì)以及不做任何處理的空白對照，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，將96孔板取出，吸出所有培養(yǎng)基，用PBS清洗1次，每個孔加入100 μL新鮮培養(yǎng)基后再加入10 μL/每孔CCK8試劑，置培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育2 h后，酶標(biāo)儀測定450 nm處吸光度。按照如下公式計算細(xì)胞存活率（%）。以改良寇氏計算法計算抑制50%細(xì)胞生長時的藥物濃度，即IC50值。

Atest為測試組的吸光度，Acontrol為對照組的吸光度

2.7.3 細(xì)胞攝取實驗：C6細(xì)胞以1×105個/mL密度，接種1 mL在激光共聚焦顯微鏡專用培養(yǎng)皿中，置細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 h使細(xì)胞貼壁后，移去培養(yǎng)液，加入1 mL含有游離藥物或載藥納米膠束的細(xì)胞培養(yǎng)液（相當(dāng)于2 μg/mL姜黃素），繼續(xù)置細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育1 h或4 h。移去含藥細(xì)胞培養(yǎng)液，加入4 ℃的PBS終止細(xì)胞攝取，PBS沖洗細(xì)胞3次，4%多聚甲醛固定細(xì)胞20 min，PBS沖洗3次，加入100 μL DAPI試劑，避光染色細(xì)胞核10 min，PBS沖洗3次，加入100 μL抗熒光猝滅劑封閉細(xì)胞，將培養(yǎng)皿置于激光共聚焦顯微鏡中拍照。

2.7.4 腫瘤球抑制實驗：取對數(shù)生長期的C6細(xì)胞，0.25%胰酶消化后吹打成單細(xì)胞懸液，用無血清培養(yǎng)基、含青霉素100 U/mL、鏈霉素100 μg/mL、EGF 20 ng/mL、bFGF 20 ng/mL以及B27添加物（1×）的DMEM/F12培養(yǎng)液（serum-free medium，SFM）重懸，以每孔104個細(xì)胞的濃度分別接種于低吸附塑料48孔板，于37 ℃、5% CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長的速度及培養(yǎng)液的顏色變化更換培養(yǎng)液。待細(xì)胞球直徑生長到200 μm左右時，移除培養(yǎng)基，加入0.5 mL含有游離藥物或載藥納米膠束的細(xì)胞培養(yǎng)液（相當(dāng)于2 μg/mL姜黃素），觀察3 d后細(xì)胞球形態(tài)變化。

2.8 統(tǒng)計學(xué)處理方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以 ±s表示，2組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析。 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果與討論

3.1 ε-PLL-UNA的合成 從聚賴氨酸、十一烯酸和產(chǎn)物的1H-NMR譜中，可以看到在1.1 ppm和4.0 ppm之間的峰屬于聚賴氨酸的專屬峰，峰值在3.77、3.09、1.74和1.35～1.47 ppm分別屬于聚賴氨酸骨架中次甲基[CO-CH（NH2）-]、次甲基末端（CH2NH-）和亞甲基（-CH2-CH2-）峰[3]。在十一烯酸圖譜中的1.25～1.45、2.01、2.18、4.92和5.80 ppm分別是亞甲基（-CH2-CH2-），雙鍵旁邊的亞甲基（CH2=CHCH2-），羧基旁邊的亞甲基（COOH-CH2-），次甲基（CH2=CH-）以及雙鍵末端亞甲基（CH2=CH-）。除此之外還有在11.99 ppm處有明顯特異性的羧基峰。見圖1A。而產(chǎn)物中峰都能在反應(yīng)物中找到相應(yīng)的歸屬，除了十一烯酸羧基峰消失，說明十一烯酸的羧基已和聚賴氨酸的氨基進(jìn)行了反應(yīng)從而導(dǎo)致其消失[4]。

對反應(yīng)前后的紅外圖譜進(jìn)行分析，結(jié)果如圖1B所示，PLL中3 238 cm-1處的強(qiáng)寬峰為締合氨基（N-H）伸縮振動峰，在1 671 cm-1與1 561 cm-1的2個峰分別是酰胺I帶和I I帶；UNA的2 923 cm-1和1 706 cm-1處的吸收峰分別是烯烴的C-H和羧基的C=O的伸縮振動。產(chǎn)物中出現(xiàn)的2 925、1 676 cm-1吸收峰與十一烯酸的特征峰相一致，同樣的3 247、1 681、1 570 cm-1這3個吸收峰也與聚賴氨酸的（N-H）伸縮振動峰、酰胺I帶和I I帶相對應(yīng)。

圖1 十一烯酸-接枝-ε-多聚賴氨酸的1H-NMR圖譜（A）和紅外圖譜（B）

3.2 臨界膠束濃度測定 芘增溶于不同濃度的膠束溶液中的熒光發(fā)射光譜結(jié)果表明，隨著膠束濃度增加，芘的第一峰與第二峰熒光強(qiáng)度之比（I1/I2）依次降低，當(dāng)濃度增大到一定值時曲線會發(fā)生突變，芘熒光特性的突變表明其所處環(huán)境極性的變化，即開始形成膠團(tuán)（見圖2A）。I1/I2的擬合曲線結(jié)果顯示，2條擬合曲線的交點就是臨界膠束濃度（critical micelle concentration，CMC）值，ε-PLL-UNA膠束的CMC值為0.19 g/L（見圖2B）。

3.3 載姜黃素納米膠束的表征

圖2 芘在不同濃度膠束溶液中的熒光發(fā)射光譜（A）和I1/I2比值隨膠束濃度變化圖（B）

3.3.1 載藥量與包封率：透析法為制備嵌段聚合物納米膠束的經(jīng)典方法，該方法制備的納米膠束載藥量和包封率等容易受處方和工藝因素的影響。通過固定工藝因素，考察嵌段聚合物的最大載藥量、包封率。紫外分光光度法測定載藥量與包封率，結(jié)果表明，姜黃素在1.5～10.5 μg/mL范圍內(nèi)，吸光度A與濃度C呈線性，曲線方程A=0.13826C-0.0021，線性相關(guān)良好（R2≥0.998）。經(jīng)回收率實驗表明，姜黃素低、中、高3種濃度回收率均大于95%，達(dá)到準(zhǔn)確測定的要求。當(dāng)投藥量與聚合物的比例為1∶8時，可以獲得最大載藥量和包封率，分別高達(dá)12.22%±2.13%和85.12%±3.64%。

3.3.2 載姜黃素納米膠束的表征：以最佳處方制備空白納米膠束、載藥納米膠束，分別測定其粒徑和Zeta電位結(jié)果?？瞻准{米膠束平均粒徑為（53.7±3.4）nm和Zeta電位為（30.7±4.2）mV，姜黃素裝載對納米膠束粒徑有一定的影響，姜黃素裝載后納米膠束粒徑增大，Zeta電位基本沒有變化，其粒徑為（60.6±2.1）nm，呈現(xiàn)窄的粒徑分布（見圖3A），Zeta電位為（28.2±5.6）mV。

2%磷鎢酸負(fù)染后，TEM觀察納米膠束形態(tài)結(jié)果表明載藥納米膠束呈白色的球形粒子且分布均勻，TEM測量的粒徑為55 nm，比DLS測定的水合直徑稍有偏低（見圖3B）。這是因為TEM測定前需對樣品進(jìn)行干燥、脫水和抽真空等處理，使載藥納米膠束水化層皺縮，納米膠束粒徑縮小[5]。

圖3 載姜黃素納米膠束的粒徑分布（A）和透射電鏡觀察（B，×100 000）

3.4 體外藥物釋放 在pH 7.4條件下，姜黃素從CUR solution和CUR-Micelles中的釋放曲線結(jié)果可以看出姜黃素從納米膠束制劑中釋放的速率明顯比溶液劑緩慢，其在溶液劑中于12 h內(nèi)釋放達(dá)98%，而在納米膠束制劑中需延長至48 h釋放才到84%，見圖4。3.5 細(xì)胞毒性和細(xì)胞攝取 空白材料（ε-PLL-UNA）、CUR solution和CUR-Micelles的細(xì)胞生長抑制結(jié)果表明，ε-PLL-UNA組在整個測試濃度范圍內(nèi)細(xì)胞存活率大于90%，表明其不影響細(xì)胞存活；CUR solution組在測試濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞生存率大于89%，IC50為（21.5±0.43）μg/mL；而CUR-Micelles組對C6細(xì)胞的存活率隨著姜黃素濃度的升高而下降，其IC50為（1.95±0.12）μg/mL，明顯低于CUR solution組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=8.46，P＜0.05），見圖5A。據(jù)報道包裹在聚合物納米膠束中藥物，一般是以內(nèi)吞機(jī)制進(jìn)入細(xì)胞，因而使得藥物更有效的作用在細(xì)胞內(nèi)，殺傷腫瘤細(xì)胞[3]。這一假設(shè)從細(xì)胞攝取結(jié)果中得到進(jìn)一步確證。

在CUR濃度為2 μg/mL時，C6細(xì)胞與CUR solution和CUR-Micelles孵育1 h和4 h后，細(xì)胞攝取結(jié)果表明CUR solution組不管是在1 h還是4 h，細(xì)胞內(nèi)的熒光都明顯比CUR-Micelles組低；除此之外CUR-Micelles組熒光甚至分布在細(xì)胞核內(nèi)，細(xì)胞核DAPI熒光也可以發(fā)現(xiàn)CUR-Micelles組的細(xì)胞核有很多明顯的皺縮[6]。見圖5B。以上兩個方面也解釋了CUR-Micelles殺傷作用顯著的原因。

圖5 ε-PLL-UNA、CUR solution和CUR-Micelles對C6細(xì)胞的毒性（A）和C6細(xì)胞對不同制劑的攝取結(jié)果（B，×200）

3.6 腫瘤球生長抑制 近年來有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤組織的無限增殖與自我更新可能與腫瘤組織內(nèi)部的腫瘤干細(xì)胞有關(guān)，研究報道細(xì)胞成球培養(yǎng)能使腫瘤干細(xì)胞富集[7]。姜黃素被報道具有腫瘤干細(xì)胞抑制作用[8]。因此我們進(jìn)一步構(gòu)建了3D膠質(zhì)瘤細(xì)胞球，以空白對照組和CUR solution組對比，體外考察了CUR-Micelles組對腫瘤球生長的抑制作用。結(jié)果表明，相比CUR solution，CUR-Micelles培育3 d后，與0 d對比，腫瘤球體積顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=6.74，P＜0.05），見圖6，表明納米膠束制劑能夠有效地增加姜黃素對腫瘤干細(xì)胞的殺傷作用，其具體機(jī)制可能與增加藥物的穿透有關(guān)[9]。

圖6 空白對照組、CUR solution組和CUR-Micelles組處理3 d后，膠質(zhì)瘤細(xì)胞球的顯微圖（A，×200）和腫瘤球體積大?。˙）比較

4 結(jié)論

本研究利用十一烯酸為疏水基，聚賴氨酸為親水骨架構(gòu)建一個新型接枝聚合物ε-PLL-UNA，實現(xiàn)對疏水性姜黃素裝載，初步探索其對C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制效果。結(jié)果表明該接枝聚合物膠束實現(xiàn)對姜黃素具有一定的載藥量和包封率。載藥納米膠束能顯著延緩藥物的釋放，延長藥物作用時間。藥物攝取實驗表明，該聚合物膠束有效促進(jìn)姜黃素被C6細(xì)胞攝取，甚至能深入到細(xì)胞核，有效殺傷腫瘤細(xì)胞。體外腫瘤球?qū)嶒炓脖砻鬟@種新型膠束能有效地抑制C6腫瘤細(xì)胞球的生長。為了進(jìn)一步確定該載藥納米膠束對動物模型的效果，接下來需要進(jìn)行體內(nèi)藥動學(xué)以及藥效學(xué)的研究。

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（本文編輯：賈建敏）

Preparation and in vitro antitumor evaluation of curcumin-loaded micelles

FAN Ziliang, JIN Binghui,XU Xiafang, JIANG Qiaoying, XU Helin. School of Pharmaceutical Sciences, Wenzhou Medical University,Wenzhou, 325035

R94

A

10.3969/j.issn.2095-9400.2017.09.001

2017-03-10

國家自然科學(xué)基金青年基金資助項目（81603036）；浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃項目（2016KYA136）；浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動計劃暨新苗人才計劃項目（2017R413059）。

范子梁（1994-），男，安徽合肥人，碩士生。

徐荷林，碩士生導(dǎo)師，Email：xhlpharm1214@126.com。