劉娜 王先玉 何謝玲 覃亞斌

論 著

腦脊液EV71抗體檢測在重癥手足口病合并腦炎中的意義

劉娜 王先玉 何謝玲 覃亞斌

目的分析腦脊液腸道病毒71（EV71）抗體在早期預(yù)測重癥手足口?。℉FMD）并發(fā)腦炎中的價值。方法 選取我院2015年3月至2017年3月收治的224例重癥HFMD患兒，按照其并發(fā)腦炎情況與類型將其納入未合并腦炎對照組（n＝72）、合并細菌性腦炎組（n＝86）和合并病毒性腦炎組（n＝66），對其血清、腦脊液EV71抗體水平進行檢測，運用受試者工作特征曲線（ROC）計算EV71抗體早期預(yù)測HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度、特異度，并運用Logistic多因素回歸分析，評價血清EV71抗體對重癥HFMD并發(fā)腦炎的影響。結(jié)果細菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平均高于未合并腦炎對照組〔血清EV71抗體（μg/L）：403.5±19.6、397.1±20.8比115.9±32.4，腦脊液EV71抗體（μg/L）：427.6±48.4、430.8±49.1比125.9±31.3〕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），而細菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。ROC曲線顯示，腦脊液、血清EV71抗體預(yù)測重癥HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度（87.83%、85.16%）、特異度（90.52%、89.33%）均較高（均P＜0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，以并發(fā)腦炎為因變量，腦脊液與血清EV71抗體的影響因子均具有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論重癥HFMD并發(fā)腦炎可損傷患兒腦組織，并引發(fā)腦脊液、血清EV71抗體水平明顯上升，血清EV71抗體檢測具有簡便、創(chuàng)傷小的優(yōu)勢，有望在重癥HFMD并發(fā)腦炎的早期預(yù)測中發(fā)揮重要作用。

腦脊液EV71抗體； 重癥手足口??； 腦炎； 預(yù)測價值

手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是由腸道71型病毒（EV71）和A組柯薩奇病毒A16引發(fā)的傳染性疾病，手、足、口、臀部出現(xiàn)大量水皰疹是本病的主要臨床特征［1-2］。該病好發(fā)于學(xué)齡前兒童，通常預(yù)后良好，但重癥HFMD患兒易出現(xiàn)肺炎、腦水腫、循環(huán)障礙等并發(fā)癥，其中腦炎是重癥HFMD最為嚴重的并發(fā)癥之一，盡早識別并發(fā)腦炎風(fēng)險并予以科學(xué)診治對保證患兒生存質(zhì)量具有重要意義［3-4］。然而，目前臨床診斷重癥HFMD并發(fā)腦炎主要借助腰穿腦脊液檢查，該法操作復(fù)雜、耗時久，無法滿足早期診治需求［5-6］。本研究選取腦損傷中關(guān)鍵因子——腦脊液EV71抗體，就其早期預(yù)測重癥HFMD并發(fā)癥腦炎的價值進行了分析，旨在為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年3月至2017年3月收治的224例重癥HFMD患兒，按照其并發(fā)腦炎情況與類型分為未合并腦炎對照組（n＝72）、合并細菌性腦炎組（n＝86）和合并病毒性腦炎組（n＝66），均參照HFMD診治指南確診［7-8］，并排除合并其他類型感染與危重病例。3組患兒年齡、病程、體質(zhì)量、性別比例比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 3組患兒一般臨床資料比較

本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，并征得患兒監(jiān)護人知情同意。

1.2 檢測方法 抽取患兒入組次日（治療前）空腹肘靜脈血2 mL及腦脊液1.5 mL，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測其血清、腦脊液EV71抗體水平，試劑盒均購自上海吉泰依科賽生物科技有限公司，檢測方法參照相關(guān)文獻［9-10］方法。上述指標均由2名檢驗科醫(yī)師于雙盲條件下完成檢測，取其平均值作為測定結(jié)果。

1.3 研究方法 比較3組血清、腦脊液EV71抗體間差異，運用受試者工作特征曲線（ROC）計算EV71抗體早期預(yù)測HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度、特異度，并運用Logistic多因素回歸分析，評價腦脊液及血清EV71抗體對重癥HFMD并發(fā)腦炎的影響。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 對本研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進行分析。計數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，并采用χ2檢驗；計量資料以均數(shù)±標準差表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗；EV71抗體對重癥HFMD并發(fā)腦炎的影響研究采用Logistic多因素回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清及腦脊液EV71抗體水平比較 細菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平均明顯高于未合并腦炎對照組（均P＜0.05）；而細菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。見表2。

表2 3組患兒血清、腦脊液EV71抗體水平比較

表2 3組患兒血清、腦脊液EV71抗體水平比較

注：與未合并腦炎對照組比較，aP＜0.05

2.2 預(yù)測價值分析 ROC曲線顯示，腦脊液、血清EV71抗體預(yù)測重癥HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度、特異度均較高（均P＜0.05）。見表3。

表3 腦脊液與血清EV71抗體預(yù)測重癥HFMD合并發(fā)腦炎的臨床價值分析

2.3 影響因素分析 多因素Logistic回歸分析顯示，以并發(fā)腦炎為因變量，腦脊液與血清EV71抗體的影響因子均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表4。

表4 腦脊液與血清EV71抗體影響重癥HFMD并發(fā)腦炎的多因素回歸分析結(jié)果

3 討論

多數(shù)HFMD患兒病情呈自限性，感染后以發(fā)熱起病，1周內(nèi)即可出現(xiàn)體溫明顯下降、皮疹消退，病情恢復(fù)，但少數(shù)重癥HFMD患兒病情進展極為迅速，發(fā)病1～4 d內(nèi)即可出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎等嚴重并發(fā)癥，病死率較高且存活患兒易遺留多種后遺癥［11-12］。近年來，我國多個省份HFMD出現(xiàn)暴發(fā)流行趨勢，HFMD防治形式愈發(fā)嚴峻。

HFMD的常見致病原為EV71病毒和A組柯薩奇病毒A16，均以高度嗜神經(jīng)性為主要特點，也是導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)嚴重并發(fā)癥的主要原因［13-14］。王喆等［15］發(fā)現(xiàn)，較非重癥HFMD患兒而言，重癥HFMD患兒心動過速、嘔吐、肌肉陣攣、煩躁、嗜睡等癥狀發(fā)生風(fēng)險更高，印證了上述結(jié)論。與此同時，重癥患兒亦具有更高的腦炎發(fā)生風(fēng)險，而腦干腦炎不僅被認為是重癥HFMD進展的重要階段，也是肺水腫、肺出血甚至循環(huán)衰竭的前驅(qū)表現(xiàn)。因此，重癥HFMD并發(fā)腦炎的早期診治對于避免患兒遺留智力缺陷、肢體殘疾具有重要意義。

早期腦炎的病理生理改變以腦血管周圍神經(jīng)壞死為主，隨著病程的進展，廣泛性神經(jīng)壞死，累及相應(yīng)局部組織是造成腦膜刺激征、頭痛、發(fā)熱等臨床表現(xiàn)的主要原因，而Wormald等［11］發(fā)現(xiàn)，大量炎癥細胞只有在通過血管內(nèi)皮系統(tǒng)后方可進入腦組織并誘發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)損傷的發(fā)生發(fā)展，因此，作為調(diào)控炎癥細胞的重要因子，EV71抗體可能在腦炎的發(fā)生發(fā)展中扮演了重要角色。本研究就重癥HFMD、重癥HFDM合并不同類型腦炎患兒血清與腦脊液EV71抗體進行了比較，結(jié)果表明，無論是合并細菌性腦炎還是病毒性腦炎，患兒血清與腦脊液EV71抗體水平均明顯上升，且組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明血管內(nèi)皮受損是腦炎的重要發(fā)病機制之一，而EV71抗體可通過如下機制拮抗血管內(nèi)皮直接受損與直接受損后引發(fā)的繼發(fā)性受損：作為血管內(nèi)皮細胞內(nèi)特異性的肝素結(jié)合生長因子，EV71抗體能夠促進血管內(nèi)皮細胞分裂與增殖，誘導(dǎo)體內(nèi)新生血管生成、增強血管通透性，達到提升微小血管、側(cè)支循環(huán)建立能力的目的。因此，EV71抗體水平升高表明血管內(nèi)皮細胞受損、血腦屏障破壞嚴重，而Lteif等［13］亦指出，EV71抗體可能參與HFMD合并腦炎的發(fā)病機制，為腦炎發(fā)生風(fēng)險的早期預(yù)測提供一定參考。

通過ROC曲線與Logistic多因素回歸分析可以發(fā)現(xiàn)，血清與腦脊液EV71抗體是影響重癥HFMD并發(fā)腦炎的危險因素，且根據(jù)EV71抗體水平變化能夠預(yù)測患兒腦炎發(fā)生風(fēng)險，與陳秀麗等［7］觀點一致。同時，由于血清、腦脊液EV71抗體預(yù)測重癥HFMD并發(fā)腦炎的能力相仿，加之腰椎穿刺取腦脊液檢查痛苦大、安全性受限等弊端，血清EV71抗體檢測有望在重癥HFMD并發(fā)腦炎的預(yù)測中得到更為廣泛的關(guān)注。此外，Stammberger等［9］發(fā)現(xiàn)，血清EV71抗體水平變化與HFMD患兒病情變化存在一定相關(guān)性，為HFMD患兒病情進展的預(yù)測提供了新的思路，關(guān)于EV71抗體與HFMD患兒預(yù)后關(guān)聯(lián)性的研究，有待日后大樣本、多中心分析加以明確。

綜上所述，重癥HFMD并發(fā)腦炎患兒血清、腦脊液EV71抗體水平明顯升高，根據(jù)血清EV71抗體變化能夠有效預(yù)測患兒并發(fā)腦炎風(fēng)險，為臨床早期診治提供可靠的參考，值得進一步關(guān)注。

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The significance of cerebrospinal fluid EV71 antibody detection in severe hand-foot-mouth disease and encephalitis

Liu Na, Wang Xianyu, He Xieling, Qin Yabin.
Clinical Laboratory Center, Hunan Children's Hospital, Changsha 410007, Huan, China

ObjectiveTo analyze the value of cerebrospinal fluid enterovirus 71 (EV71) antibody in the early prediction of severe hand-foot-mouth disease (HFMD) complicated with encephalitis.MethodsA total of 224 children with severe HFMD who were treated in our hospital from March 2015 to March 2017 were selected for inclusion in the unrelated encephalitis control group (n = 72) and the combined encephalitis group (n = 86) and combined with viral encephalitis (n = 66). The serum and cerebrospinal fluid EV71 antibody levels were measured and the sensitivity of the EV71 antibody was predicted by the receiver operating characteristic curve (ROC).Specificity, and logistic multivariate regression analysis was used to evaluate the effect of serum EV71 antibody on severe HFMD complicated with encephalitis.ResultsThe level of EV71 antibody in serum and cerebrospinal fluid in patients with bacterial encephalitis and viral encephalitis was higher than that in unrelated encephalitis control group [serum EV71 antibody (μg/L): 403.5±19.6, 397.1±20.8 vs. 115.9±32.4, cerebrospinal fluid EV71 antibody (P ＜ 0.05), while the levels of EV71 antibody in the serum and cerebrospinal fluid of the bacterial encephalitis group and the viral encephalitis group were significantly higher than those in the control group (P ＜ 0.05),and the difference was statistically significant (P ＜ 0.05). The difference was not statistically significant (P ＞ 0.05).ROC curve showed that cerebrospinal fluid and serum EV71 antibody predicted the sensitivity (87.83%, 85.16%)and specificity (90.52%, 89.33%) of severe HFMD complicated encephalitis respectively (all P ＜ 0.05). Multivariate logistic regression analysis showed that the influencing factors of cerebrospinal fluid and serum EV71 antibody were statistically significant (P ＜ 0.05).ConclusionsSevere HFMD complicated with encephalitis can damage thebrain tissue of children, and cause cerebrospinal fluid, serum EV71 antibody level increased significantly. Serum EV71 antibody detection is simple and noninvasive, is expected to play an important role in the early prediction of severe HFMD concurrent encephalitis.

Cerebrospinal fluid EV71 antibody; Severe hand-foot-mouth disease; Encephalitis; Pred iction value

2017-06-21）

（本文編輯：楊程伍 李銀平）

410007 湖南長沙市，湖南省兒童醫(yī)院檢驗中心

Liu Na，Email：hunanzfq@126.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.03.011

Corresponding author: Liu Na, Email: hunanzfq@126.com