劉娜，扎木則仁,吳騰,常建軍

（內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司質(zhì)量安全管理系統(tǒng)中心實(shí)驗(yàn)室，呼和浩特011517）

食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉檢測(cè)方法

劉娜，扎木則仁,吳騰,常建軍

（內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司質(zhì)量安全管理系統(tǒng)中心實(shí)驗(yàn)室，呼和浩特011517）

使用毛細(xì)管色譜柱-氣相色譜儀檢測(cè)食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的質(zhì)量濃度。將樣品稱取后放置在冰水浴中先加氯化鈉搖勻，再加入三氯乙酸溶液輕輕搖勻,然后加入亞硝酸鈉溶液冰浴衍生，用正己烷提取后，用氣相色譜儀氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)。該方法檢測(cè)環(huán)己基氨基磺酸鈉回收率范圍在86.07%～109.33%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.16%～7.38%之間。該方法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好，可進(jìn)行食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉質(zhì)量濃度的檢測(cè)。

環(huán)己基氨基磺酸鈉；三氯乙酸；氣相色譜儀；毛細(xì)管色譜柱

0 引 言

環(huán)己基氨基磺酸鈉的商品名稱為甜蜜素（Sodi?um Cyclamate），是一種人工合成的食品添加劑[1]。是一種高甜度、無(wú)熱值、安全衛(wèi)生，并能代替蔗糖的新型食品添加劑，是不被人體吸收的低熱能甜味劑[2]，但長(zhǎng)期食用過(guò)量的甜蜜素會(huì)加重肝臟負(fù)擔(dān),并對(duì)腎臟有一定的毒副作用[3];近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),甜蜜素因在胃腸道內(nèi)轉(zhuǎn)化為環(huán)己胺,可能具有潛在的致癌性,能誘發(fā)膀胱癌[4]。因此我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB2760《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》嚴(yán)格規(guī)定了甜蜜素的使用范圍及用量。

目前環(huán)己基氨基磺酸鈉氣相檢測(cè)方法的前處理主要用亞硝酸鈉溶液和硫酸溶液在冰水中進(jìn)行衍生化反應(yīng)產(chǎn)物環(huán)己醇亞硝酸酯進(jìn)行檢測(cè)，方法的穩(wěn)定性差、準(zhǔn)確度低等不足的地方較多。本方法在國(guó)標(biāo)方法的基礎(chǔ)上，使用三氯乙酸溶液代替硫酸溶液提供酸性條件比較安全，提高方法的準(zhǔn)確度、精密度以及穩(wěn)定性。另一目的是通過(guò)前處理方法衍生化過(guò)程中先加入氯化鈉，然后先加三氯乙酸溶液后加亞硝酸鈉溶液的方式提高方法的穩(wěn)定性以及準(zhǔn)確度。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料與試劑

本研究所使用的樣品均為市場(chǎng)上購(gòu)買；環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品：DR.Ehrenstorfer純度99.0%、正己烷色譜純，其他藥品均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

三氯乙酸溶液質(zhì)量濃度10%（10 g三氯乙酸溶于100 mL水中），亞硝酸鈉水溶液質(zhì)量濃度50 g/L

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜儀:VARIAN GC-450,氫火焰離子化檢測(cè)器。

氣相毛細(xì)管色譜柱:VF-1ms（30m×0.32mm×0.25 μm）。

IKATM MS 3 basic旋渦混和器，Heal Toledo離心機(jī)，MettlerToldeo XP205萬(wàn)分之一電子天平。

1.3 測(cè)定方法

樣品稱取后放置在冰水浴中先加氯化鈉搖勻，再加入三氯乙酸溶液輕輕搖勻,然后加入亞硝酸鈉溶液冰浴衍生，用正己烷提取樣品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉；氣相毛細(xì)管色譜柱分析，外標(biāo)法定量[5]。

1.4 方法

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱取環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品0.25 g（精確至0.0001 g），25.00 mL容量瓶中用水溶解定容至刻度。2～8℃冰箱內(nèi)保存2個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)工作液：使用前從標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液中取0.1，0.2，0.4，0.8，1.6 mL至50 mL離心管中再加10 mL水，準(zhǔn)確配置環(huán)己基氨基磺酸鈉的質(zhì)量濃度分別為0.1，0.2，0.4，0.8 g/L和1.0 g/L的待測(cè)液，其他按照樣品預(yù)處理步驟進(jìn)行操作，分別測(cè)定待測(cè)液中環(huán)己基氨基磺酸鈉，并繪制濃度-峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4.2 樣品預(yù)處理、衍生及提取

主要稱取的樣品放置在冰水浴中先加1.0 g氯化鈉搖勻放置5.0 min，然后加入5 mL 10%三氯乙酸溶液輕輕搖勻，再加入5 mL質(zhì)量濃度為50 g/L亞硝酸鈉溶液,搖勻。在冰浴中放置40 min,并經(jīng)常搖動(dòng),再準(zhǔn)確加入10 mL正己烷及5 g氯化鈉,搖勻后置旋渦混合器上振動(dòng)1 min或搖80次充分提取衍生物,有乳化現(xiàn)象的樣品進(jìn)行5 000 r/min離心5 min,待靜止分層后吸出正己烷層待上機(jī)。取上清液及時(shí)上機(jī)；環(huán)己基氨基磺酸鈉衍生物易揮發(fā)不太穩(wěn)定[6]。

1.4.3 結(jié)果計(jì)算

外標(biāo)法定量，按下式進(jìn)行計(jì)算：

式中：X為待測(cè)樣品環(huán)已基氨基磺酸鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（g/kg）；A為樣品測(cè)定液中環(huán)已基氨基磺酸鈉的質(zhì)量濃度（g/L）；V為樣品定容體積（mL）；f為樣液的稀釋因子；m為樣品稱量質(zhì)量（g）。

1.5 儀器參考條件

色譜柱：VF-1（30m ×0.32mm ×0.25μm）毛細(xì)管色譜柱或相等性能的毛細(xì)管色譜柱；檢測(cè)器溫度300℃，氣化溫度260℃,柱溫50℃,保持0 min,10℃/min升溫到120℃,保持2 min；載氣(N2)2.0 mL/min,氫氣流量30 mL/min,空氣流量300 mL/min,分流比20:1,尾吹流量(N2)25 mL/min。

2 結(jié)果與討論

2.1氯化鈉對(duì)比實(shí)驗(yàn)

（1）稱取5.0 g含有環(huán)己基氨基磺酸鈉的蜜餞肉加10.0 mL純水，在加入不同稱量的氯化鈉對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖1所示。

圖1 加入不同稱量的氯化鈉對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響實(shí)驗(yàn)

由圖1可以看出：其他條件相同的情況下對(duì)蜜餞質(zhì)控樣品中加入不同量NaCl固體，加入量1.20 g時(shí)檢測(cè)結(jié)果最大，因考慮實(shí)際操作故選擇1.00 g左右時(shí)最佳。

（2）含有環(huán)己基氨基磺酸鈉的蜜餞肉質(zhì)控樣品中添加NaCl和不添加NaCl對(duì)比實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表1所示。

表1 NaCl添加和不添加對(duì)比實(shí)驗(yàn) g/kg

2.2 本方法對(duì)不同基質(zhì)精密度和準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

表2 對(duì)不同基質(zhì)精密度和準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)（n=6）

在不同樣品中加入不同濃度水平的環(huán)己基氨基磺酸鈉進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn)，回收率范圍在86.07%～109.33%之間，RSD在3.16%～7.38%之間。

3 結(jié)論

本文在國(guó)標(biāo)的基礎(chǔ)上建立了測(cè)定食品中環(huán)已基氨基磺酸鈉的檢測(cè)，先加入1.0 g氯化鈉能夠保持試樣的溫度較低，衍生化反應(yīng)過(guò)程中容易產(chǎn)熱，并且充分釋放試樣中溶進(jìn)物，（如：蜜餞中的添加劑環(huán)己基氨基磺酸鈉，腌制脫水原理）提高準(zhǔn)確度。三氯乙酸的添加不僅能夠?yàn)檠苌磻?yīng)提供酸性條件，而且基于三氯乙酸能夠在不同pH值條件下都能夠沉淀蛋白質(zhì)的特性[7]，利用三氯乙酸能夠較充分地沉淀蛋白質(zhì)，容易釋放目標(biāo)物。本方法的回收率范圍在82.37%～109.15%之間、RSD范圍在2.43%～5.02%之間方法的精密度和準(zhǔn)確度比較好，此方法可以快速、高效、準(zhǔn)確檢測(cè)食品中的環(huán)已基氨基磺酸鈉。

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[7]CHEUNG C K,MAK Y T,SWAMINATHAN R.Automated tri?chloroacetic acid precipitation method for urine total protein[J].Ann Clin Biochem.,1987,24:140-144.

Research of cyclamate detection method in food product

LIU Na，Zhamuzeren,WU Teng,CHANG Jianjun

(Inner Mongolia Mengniu Dairy Industrial Co.Ltd.,Hohhot 011517,China)

The paper established a method to detect cyclamate in food using capillary column-gas chromatograph.Sample of the said after taking place in the ice water bath,firstly adding sodium chloride and shaking,and the supernatant solution was added aqueous solution of tri?chloroacetic acid and aqueous sodium nitrite solution in ice bath,finally the target substance was extracted with n-hexane and detected by gas chromatography.The recoveries of the method was between 86.07%～109.33%,relative standard deviations between 3.16%～7.38%.The test results of this method are accurate and reliable.

cyclamate;trichloroacetic acid;gas chromatograph;capillary column

TS252.7

A

1001-2230（2017）08-0051-02

2016-12-13

劉娜（1986-），女，碩士研究生，從事乳品檢測(cè)方面的研究。