尹 燕， 李校天， 郭永澤， 周麗云， 王 蕾

1.承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000； 2.河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院消化科； 3.河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院病理科

1,25(OH)2D3干預(yù)IL-17通路抑制大鼠肝纖維化作用機(jī)制研究

尹 燕1， 李校天2， 郭永澤2， 周麗云3， 王 蕾2

1.承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000； 2.河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院消化科； 3.河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院病理科

目的通過(guò)檢測(cè)1,25(OH)2D3對(duì)大鼠肝組織中IL-17及其相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，探討1,25(OH)2D3抑制肝纖維化形成的作用機(jī)制。方法將60只大鼠隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、模型組(DMN鹽溶液)、藥物溶劑組(DMN鹽溶液+花生油灌胃)、治療組(DMN鹽溶液+1,25(OH)2D3油溶液灌胃)，8周后對(duì)各組大鼠肝臟行Masson染色，觀察其病理學(xué)變化，并行纖維化程度分級(jí)；免疫組化法(IHC)觀察各肝組織中IL-17的蛋白表達(dá)；Western blotting法定量檢測(cè)各組肝臟中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白表達(dá)；Real time-PCR法分析各組肝臟中IL-17、RORγt和MIP3α mRNA表達(dá)量。結(jié)果模型組及藥物溶劑組大鼠肝臟呈顯著纖維化改變，1,25(OH)2D3治療組肝臟纖維化程度較溶劑組明顯減輕；模型組和藥物溶劑組肝組織中IL-17、RORγt、MIP3α蛋白及mRNA表達(dá)量較對(duì)照組明顯升高，而治療組中三者蛋白及mRNA表達(dá)量較溶劑組顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論1,25(OH)2D3抑制肝纖維化發(fā)生、發(fā)展；1,25(OH)2D3可抑制肝組織中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白和mRNA表達(dá)，從而減輕肝纖維化，提示1,25(OH)2D3可能通過(guò)干預(yù)肝臟IL-17信號(hào)通路抑制纖維化進(jìn)程。

肝纖維化；IL-17；RORγt；MIP3α；1,25(OH)2D3

肝纖維化是各種慢性肝病發(fā)展為肝硬化甚至肝癌的中間病理過(guò)程，是細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)生成與降解失衡的結(jié)果，屬于肝臟的創(chuàng)傷愈合反應(yīng)。白介素17細(xì)胞(Helper T 17,Th17)是CD4+細(xì)胞的新亞型，已明確表達(dá)于多發(fā)性硬化、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身性免疫疾病的病變組織，近年的大量研究表明，Th17細(xì)胞參與肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，并且對(duì)肝臟纖維化起促進(jìn)作用[1]，Peng等[2]研究發(fā)現(xiàn)，Th17分泌的細(xì)胞因子經(jīng)RANTES介導(dǎo)的炎細(xì)胞浸潤(rùn)對(duì)腎纖維化起極大促進(jìn)作用，而白介素17(interleukin 17, IL-17)是其分泌的主要效應(yīng)因子。維甲酸相關(guān)核孤兒受體(retinoic-acid-related orphan receptor, RORγt)是特異性表達(dá)于人和鼠Th17細(xì)胞的主要轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控著Th17細(xì)胞的分化及IL-17的合成與分泌。巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(macrophage inflammatory protein 3 alpha, MIP3α)是一種炎性趨化因子，與Th17細(xì)胞表面的CCR6組成趨化軸將Th17等炎癥細(xì)胞趨向于局部病灶。1,25(OH)2D3是維生素D的生物活性形式，除調(diào)節(jié)鈣磷代謝等傳統(tǒng)作用外，免疫調(diào)節(jié)日益成為其作用焦點(diǎn)，目前關(guān)于1,25(OH)2D3抑制肝纖維化形成的研究已不罕見(jiàn)，但探索其作用機(jī)制的研究甚少，本研究通過(guò)觀察1,25(OH)2D3對(duì)肝纖維化大鼠肝臟中IL-17及其相關(guān)免疫蛋白表達(dá)的影響探討1,25(OH)2D3抑制肝纖維化進(jìn)程的作用機(jī)制，為活性VD3治療肝纖維化的臨床應(yīng)用提供強(qiáng)有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物分組與模型建立將60只體質(zhì)量約(200±20)g SPF級(jí)健康雄性Sprague-Dawley大鼠于室溫22～25 ℃，相對(duì)濕度40%～70%，自然光照，自由飲食水的條件下飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為4組：對(duì)照組、模型組、藥物溶劑組、治療組。模型組給予腹腔注射10 g/L二甲基亞硝胺生理鹽水溶液(DMN,1 ml/kg，3次/周)；藥物溶劑組在給予DMN鹽溶液的同時(shí)，給予花生油灌胃，1次/d，(0.3 ml/100 g)；治療組給予DMN鹽溶液皮下注射和1,25(OH)2D3(3 ng/100 g)油溶液灌胃，量同溶劑組。過(guò)程中模型組死亡2只，藥物溶劑組2只，對(duì)照組及治療組各死亡1只,故取各組13只，持續(xù)干預(yù)8周后腹腔注射過(guò)量100 g/L水合氯醛油溶液處死大鼠，取肝臟分別置于-80 ℃冰箱和40 g/L多聚甲醛溶液中待用。SD大鼠購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心(編號(hào)：1602111)，二甲基亞硝胺購(gòu)自上海麥克林生物科技有限公司，1,25(OH)2D3由美國(guó)Peprotech公司提供，花生油產(chǎn)自山東魯花花生油有限公司。

1.2病理組織學(xué)檢測(cè)及分期方法取多聚甲醛(40 g/L)浸泡組織進(jìn)行脫水、透明、浸蠟、切片、烤片等系列處理后，按說(shuō)明書(shū)步驟對(duì)各肝組織進(jìn)行Masson染色。嚴(yán)格按照肝纖維化半定量計(jì)分系統(tǒng)(SSS)[3-4]對(duì)各組肝臟行纖維化程度計(jì)分，計(jì)分公式：L+P+2×(N+W)，其中L代表靜脈周和竇周纖維帶彌漫程度；P代表匯管區(qū)有無(wú)擴(kuò)大；N代表纖維間隔數(shù)量；W代表纖維間隔寬度。計(jì)分越高，纖維化程度越重。Masson染色后選取切片四周及中央膠原纖維分布密集區(qū)域?yàn)橛^察視野，利用顯微鏡將200倍圖像輸入HI-PAS-2000型計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行灰度變換，系統(tǒng)自動(dòng)記錄著色面積和總面積。著色面積比(%)=膠原纖維面積/肝組織面積×100%。

1.3各組肝臟IL-17蛋白表達(dá)檢測(cè)運(yùn)用免疫組化SP法觀察各肝組織中IL-17表達(dá)情況，將組織蠟塊進(jìn)行切片、脫蠟后放入檸檬酸緩沖液中煮沸40 min進(jìn)行抗原修復(fù)，待自然冷卻(約30 min)后滴加一抗(稀釋濃度1∶100)，4 ℃過(guò)夜后洗滌加二抗置37 ℃孵育20 min后洗滌，應(yīng)用DAB溶液進(jìn)行顯色，蒸餾水沖洗、復(fù)染、脫水、透明后封片。由2名及以上病理專(zhuān)業(yè)資深醫(yī)師閱片確認(rèn)，并對(duì)IL-17蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞染色進(jìn)行評(píng)估。一抗購(gòu)自美國(guó)Santan cruz公司(SC-7927)；二抗及檸檬酸緩沖液購(gòu)自北京中杉生物科技有限公司。

1.4各肝組織IL-17、RORγt及MIP3α蛋白定量分析采用Western blotting法分析蛋白含量，將組織碎片研磨，按每1×105細(xì)胞150～250 μl裂解液的比例加入，勻漿、離心、取上清；配置100 g/L分離膠注入玻璃槽內(nèi)，去離子水覆蓋膠面后倒掉，拔去梳子，將玻璃夾板固定于電泳槽；向提取的總蛋白樣品與5×蛋白質(zhì)凝膠緩沖液，置于95 ℃變性10 min，加至凝膠孔中接通電泳儀電源；將樣品膠與PVDF膜裝入標(biāo)有正、負(fù)極的轉(zhuǎn)膜夾板中，連接電泳連線，將轉(zhuǎn)移膜置于封閉液中封閉后放入一抗工作液4 ℃過(guò)夜，洗膜后放入二抗工作液，洗膜、曝光及洗片。RORγt一抗購(gòu)自美國(guó)Abcam公司(批號(hào)：ab78007)，MIP3α一抗購(gòu)自美國(guó)Abcam公司提供(批號(hào)：ab9829)，二抗均購(gòu)自北京中杉生物科技有限公司。

1.5各組肝臟IL-17、RORγt及MIP3αmRNA表達(dá)檢測(cè)Real time PCR法檢測(cè)各肝組織中IL-17、RORγt及MIP3α mRNA表達(dá)，將肝臟組織與1 ml Trizol置于勻漿器進(jìn)行低溫勻漿后取上清；按0.2 ml/1 ml Trizol的量加入氯仿，吸取上層水相于新EP管內(nèi)，加入0.5 ml異丙嗪；棄上清，加1 ml 750 g/L DEPC-乙醇洗滌后，再次棄上清，待白色沉淀自然干燥，用Rnase-free water溶解沉淀；依次加入反應(yīng)體系各成分，反應(yīng)條件如下：95 ℃預(yù)變性60 s，95 ℃變性15 s，58 ℃退火15 s，72 ℃延伸45 s，主循環(huán)40次，取PCR產(chǎn)物于瓊脂糖膠凝膠中電泳，紫外投射反射分析儀分析結(jié)果。引物分別為：IL-17 F：5′-GTCAATGCGGAGGGAAAG-3′,R: 5′-CACGAAGCAGTTTGGGAC-3′；RORγt F：5′-CCTGGGCTCCTCGCCTGACC-3′,R: 5′-TCTCTCTGCCCTCAGCCTTGCCRNA-3′；MIP3α F：5′-AGTTGTCTGTGTGCGCAAATCC-3′，R: 5′-ATGTGCAAGTGAAACCTCCAACC-3′?？俁NA提取試劑盒由北京天根公司提供；Primescript RT Master Mix及SYBR Premix EX TaqⅡ均購(gòu)自上海西寶生物科技有限公司；以β-actin為內(nèi)參，引物均由上海西寶生物科技有限公司合成。

2 結(jié)果

2.1各組大鼠肝臟大體改變?cè)炷３跗诟鹘M大鼠體質(zhì)量呈逐漸增加趨勢(shì)，模型組及藥物溶劑組大鼠于3周后體質(zhì)量開(kāi)始下降，與同期正常大鼠體質(zhì)量相比有顯著性差異(P<0.05)；與同期模型組及溶劑組相較，1,25(OH)2D3治療組大鼠體質(zhì)量有所增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。肉眼觀，正常對(duì)照組大鼠肝臟表面潤(rùn)紅，柔軟光滑；模型組及藥物溶劑組大鼠肝臟縮小呈淡黃色，堅(jiān)實(shí)粗糙，表面可見(jiàn)均勻分布的小結(jié)節(jié)；治療組肝臟呈淡黃色，較模型組及溶劑組柔軟光滑，未見(jiàn)明顯小結(jié)節(jié)形成。

2.2肝組織病理染色及分期對(duì)各組大鼠肝臟切片行Masson染色可見(jiàn)，正常對(duì)照組大鼠肝細(xì)胞排列整齊，沿中央靜脈呈放射條索狀分布；模型組及藥物溶劑組肝細(xì)胞排列紊亂，肝組織內(nèi)浸潤(rùn)大量中性粒細(xì)胞、空泡細(xì)胞等，且呈現(xiàn)大量藍(lán)染膠原纖維細(xì)胞聚集形成的纖維帶，提示肝纖維化模型復(fù)制成功；1,25(OH)2D3治療組較模型組及藥物溶劑組纖維化程度減輕，中性粒細(xì)胞及空泡細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少(見(jiàn)圖1)。

2.3各組肝臟纖維化半定量計(jì)分及Masson染色組織著色面積比分別按照肝纖維化半定量計(jì)分系統(tǒng)計(jì)分及運(yùn)用HI-PAS-2000型計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行灰度變換求得各肝組織纖維化著色面積比(見(jiàn)表1)，發(fā)現(xiàn)模型組及藥物溶劑組肝臟纖維化區(qū)域較對(duì)照組明顯增多，而治療組較藥物溶劑組纖維化區(qū)域顯著減少。

圖1各組大鼠肝臟Masson染色結(jié)果(200×) A:對(duì)照組；B:模型組；C:藥物溶劑組；D:1,25(OH)2D3治療組

Fig1LiverMassonstainingresultsineachgroup(200×) A: control group; B: model group; C: drug solvent group; D: 1,25 (OH)2D3treatment group

表1各組肝臟纖維化半定量計(jì)分及Masson染色組織著色面積比(%)

Tab1SemiquantitativescoringofliverfibrosisandMassonstainingtissuecolorarearatioineachgroup(%)

分組計(jì)分著色面積比(%)對(duì)照組02模型組916藥物溶劑組8151,25(OH)2D3治療組47

2.4肝組織IL-17表達(dá)IL-17在正常肝組織僅少量陽(yáng)性表達(dá)于匯管區(qū)；模型組及藥物溶劑組較對(duì)照組表達(dá)明顯增強(qiáng)，主要表達(dá)于肝組織的纖維化區(qū)及匯管區(qū)，細(xì)胞間質(zhì)表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性，也可表達(dá)于成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及血竇內(nèi)皮細(xì)胞的胞膜及胞質(zhì)；1,25(OH)2D3治療組較模型組及藥物溶劑組表達(dá)顯著減弱(見(jiàn)圖2)。

2.5肝組織IL-17、RORγt及MIP3α蛋白表達(dá)定量分析結(jié)果模型組與藥物溶劑組中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F1=2.65，F(xiàn)2=1.93，F(xiàn)3=3.72，P>0.05)，較對(duì)照組表達(dá)量均明顯升高(F1=4.27，F(xiàn)2=5.81，F(xiàn)3=6.03，F(xiàn)4=4.30,F5=5 .18,F6=5.02，P<0.05)；1,25(OH)2D3治療組較溶劑組表達(dá)量顯著降低(F1=4.18，F(xiàn)2=5.03，F(xiàn)3=4.62，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見(jiàn)圖3、表2)。

圖2各組大鼠肝臟IL-17蛋白表達(dá)(200×) A：對(duì)照組；B：模型組；C：藥物溶劑組；D：1,25(OH)2D3治療組

Fig2ExpressionofIL-17proteininliverofratsineachgroup(200×) A： control group; B： model group, C: drug solvent group; D： 1,25 (OH)2D3treatment group

圖3各組大鼠肝臟組織中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白的定量分析

Fig3QuantitativeanalysisofIL-17,RORγtandMIP3αproteininlivertissueofratsineachgroup

2.6肝組織中IL-17、RORγt及MIP3αmRNA檢測(cè)運(yùn)用RT-PCR法對(duì)各組肝臟中mRNA表達(dá)量進(jìn)行分析顯示，與對(duì)照組相比，模型組及藥物溶劑組肝臟中IL-17、RORγt和MIP3α mRNA表達(dá)量明顯升高，而1,25(OH)2D3治療組中三者mRNA表達(dá)量較溶劑組顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表3、圖4)。

IL-17RORγtMIP3α對(duì)照組0.628±0.0640.165±0.0378.908±0.812模型組9.213±1.0280.764±0.09592.290±3.638藥物溶劑組9.233±0.9500.772±0.12692.875±2.4961,25(OH)2D3治療組4.126±0.7490.401±0.06358.620±1.071

圖4各組肝臟IL-17、RORγt及MIP3αmRNA含量情況

Fig4ExpressionsofliverIL-17,RORγtandMIP3αmRNAineachgroup

3 討論

肝纖維化是向肝硬化甚至原發(fā)性肝癌發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，屬可逆性病變。肝纖維化的始動(dòng)因素是淋巴細(xì)胞攻擊受累的肝細(xì)胞繼而引發(fā)肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells, HSC)的激活、增生，最終轉(zhuǎn)化為肌成纖維樣細(xì)胞，因此慢性肝病的免疫抑制成為肝纖維化的潛在治療靶點(diǎn)。CD4+T淋巴細(xì)胞是調(diào)節(jié)肝臟免疫應(yīng)答反應(yīng)的主要細(xì)胞，其中Th17細(xì)胞是參與肝纖維化發(fā)生、發(fā)展最主要的細(xì)胞[5]，而IL-17是Th17分泌的最主要生物活性因子，具有較強(qiáng)的促纖維化作用，其作用機(jī)制如下：(1)IL-17可直接刺激Kupffer細(xì)胞分泌IL-6、IL-23、TNF-α等炎性細(xì)胞因子，參與肝慢性炎癥反應(yīng)，激活HSC；(2)IL-17誘導(dǎo)HSC分泌大量膠原蛋白Ⅰ，繼而導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生與降解失衡。RORγt是由幼稚的CD4+細(xì)胞轉(zhuǎn)化為T(mén)h17細(xì)胞所必需的轉(zhuǎn)錄因子，IL-17是其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的有效靶基因。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，從慢性乙型肝炎肝硬化患者外周血中分離出的調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Tregs)可抑制肝星狀細(xì)胞的激活與增殖，而IL-17作用恰與之相反[6]，其中RORγt通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo)及Stat3途徑主導(dǎo)Th17細(xì)胞的極化及IL-17的合成[7]，推測(cè)RORγt通過(guò)調(diào)節(jié)Tregs/Th17的平衡介導(dǎo)肝纖維化的發(fā)生。本科研團(tuán)隊(duì)前期研究[8]發(fā)現(xiàn)了一種Th17細(xì)胞的“歸巢”現(xiàn)象，即隨著肝纖維化進(jìn)程，血清中Th17細(xì)胞漸被趨向于肝臟局部病灶，這與MIP3α具有直接關(guān)系。MIP3α又被稱(chēng)為肝臟激活調(diào)節(jié)趨化因子，與其特異性受體CCR6共同趨使中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞向肝臟局部病灶聚集。Hirota等[9]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，給予關(guān)節(jié)炎小鼠模型抗-CCR6單克隆抗體后，Th17細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)明顯下降，進(jìn)一步提示MIP3α/CCR6趨化軸參與Th17細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組肝臟中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高，且與肝纖維化程度呈正相關(guān)，印證了IL-17及其相關(guān)蛋白與肝纖維化形成密切相關(guān)。

維生素D不僅是維生素，且是重要的免疫調(diào)節(jié)劑，1,25(OH)2D3作為其活性形式，通過(guò)與細(xì)胞表面特異性受體VDR結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)活性[10]。研究發(fā)現(xiàn)，肝臟組織中存在大量VDR，甚至在Kupffer細(xì)胞及HSC表面均可見(jiàn)VDR表達(dá)[11-12]。關(guān)于1,25(OH)2D3抑制肝纖維化進(jìn)展的研究已不罕見(jiàn)，但其機(jī)制尚未明確。近年相關(guān)文獻(xiàn)[13]報(bào)道，1,25(OH)2D3可體外抑制Th17細(xì)胞的分化，表明Th17細(xì)胞同樣存在VDR。本研究中，模型組肝臟IL-17蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯增多，而1,25(OH)2D3治療組IL-17表達(dá)量較溶劑組顯著減少，同時(shí)肝纖維化程度減輕，提示1,25(OH)2D3可能通過(guò)干預(yù)Th17抑制肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。另外，本實(shí)驗(yàn)中1,25(OH)2D3治療組肝臟RORγt、MIP3α蛋白表達(dá)也隨之降低，而RORγt是Th17細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子，MIP3α是其趨化因子，從Th17的分化到趨化，1,25(OH)2D3動(dòng)態(tài)調(diào)控著肝臟局部Th17的浸潤(rùn)，決定著肝臟損傷的愈合反應(yīng)方向，影響肝臟纖維化形成。維生素D作為人體主要固有免疫調(diào)節(jié)因素之一[14]，其活化需在肝內(nèi)進(jìn)行，據(jù)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，慢性肝病患者普遍存在維生素D缺乏，至少1/3的患者嚴(yán)重缺乏[15]，而維生素D的缺乏又進(jìn)一步加重肝臟損傷，如此形成慢性肝病的惡性循環(huán)，在很大程度上加速肝纖維化形成。

本研究立足免疫學(xué)角度，充分認(rèn)識(shí)及發(fā)揮1,25(OH)2D3免疫抑制劑的作用，深度探索1,25(OH)2D3抑制肝纖維化的作用機(jī)制，繼而為1,25(OH)2D3治療肝纖維化的臨床應(yīng)用提供堅(jiān)實(shí)理論基礎(chǔ)及充分科學(xué)依據(jù)。

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(責(zé)任編輯：王全楚)

Study on the mechanism of1,25(OH)2D3inhibited hepatic fibrosis with intervention on IL-17pathway in rats

YIN Yan1, LI Xiaotian2, GUO Yongze2, ZHOU Liyun3, WANG Lei2

1.Chengde Medical College， Chengde 067000; 2.Department of Gastroenterology; 3.Department of Pathology, Affiliated Hospital of Hebei University of Engineering, China

ObjectiveTo detect the effect of 1,25 (OH)2D3on the expression of IL-17 and its associated protein in rat liver tissue, and to investigate the mechanism of 1,25 (OH)2D3in inhibiting hepatic fibrosis.MethodsSixty rats were randomly divided into 4 groups: control group, model group (DMN solution), solvent group (DMN solution + peanut oil by gavage), treatment group [DMN solution+1,25 (OH)2D3peanut oil solution orally], after 8 weeks treatment, Masson staining was used to observe the pathological change liver tissues of rats in each group, the degree of fibrosis grading was done. Immunohistochemistry (IHC) method was used to observe the expression of IL-17 protein in liver tissue; Western blotting was used to detect expressions of IL-17, RORγt and MIP3α protein; Real time-PCR was used to detect expressions of IL-17, RORγt and MIP3α mRNA.ResultsThe liver fibrosis changes were significant in model group and drug solvent group, liver fibrosis in 1,25 (OH)2D3treatment group was significantly reduced than that in solvent group; expressions of IL-17, RORγt and MIP3α protein in model group and drug solvent group were significantly higher than those in control group (P<0.05), the expressions of three indexes protein and mRNA in the therapy group were significantly lower than those in solvent group (P<0.05).Conclusion1,25 (OH)2D3can inhibite development process of liver fibrosis; the 1,25 (OH)2D3can inhibit the expressions of IL-17, RORγt and MIP3α protein and mRNA. 1,25 (OH)2D3may inhibit the process of fibrosis by interfering with the IL-17 signaling pathway in the liver.

Liver fibrosis; IL-17; RORγt; MIP3α; 1,25 (OH)2D3

10.3969/j.issn.1006-5709.2017.09.013

R575

：A

：1006-5709(2017)09-1011-05

：2016-10-05

河北省衛(wèi)生計(jì)劃生育委員會(huì)重點(diǎn)科技研究計(jì)劃(20150490)

尹燕，碩士研究生，研究方向：慢性肝病。E-mail： 923231831@qq.com

李校天，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail： xtianli@sina.com