高媛

哈藥集團(tuán)制藥總廠 150000

淺析注射用頭孢地嗪鈉質(zhì)量檢測(cè)方法

高媛

哈藥集團(tuán)制藥總廠 150000

頭孢地嗪鈉這種藥物能夠在很大程度上促進(jìn)醫(yī)療質(zhì)量的提升，且藥物在抗菌方面有著極為突出的作用。在實(shí)際使用過程之中，雖然頭孢地嗪鈉已經(jīng)引起了人們的重視，但是關(guān)于藥品各個(gè)方面的質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)還是存在著一定的不足之處，需要技術(shù)人員進(jìn)行積極的研究，提升藥物質(zhì)量檢驗(yàn)的效果。本文就注射用頭孢地嗪鈉的質(zhì)量檢驗(yàn)方法進(jìn)行了研究。

醫(yī)療；注射藥品；質(zhì)量檢驗(yàn)

頭孢菌素類藥物的出現(xiàn)，在很大程度上滿足了人們對(duì)于抗菌、抑菌的需求。在人類歷史不斷發(fā)展的進(jìn)程中，頭孢菌素類藥物挽救了大量人的生命，而在醫(yī)藥領(lǐng)域相應(yīng)研究成果不斷涌現(xiàn)的現(xiàn)今，人們對(duì)于頭孢菌素類藥物提出了更高的要求。而頭孢地嗪鈉正是在醫(yī)療研究領(lǐng)域不斷發(fā)展的過程中出現(xiàn)的第三代頭孢廣譜抗菌素，頭孢地嗪也正是其相應(yīng)的音譯名稱。通過這種藥物的使用，能夠在短時(shí)間之內(nèi)，使人體內(nèi)的免疫系統(tǒng)得到顯著的增強(qiáng)，并且在藥物的研究過程中，人們對(duì)藥物的具體作用效果進(jìn)行分析研究，在將這種藥物作用到動(dòng)物模型之中，以及作用到人體內(nèi)的時(shí)候，就能夠有效的激活生物體內(nèi)的巨噬細(xì)胞，并且在藥物的持續(xù)作用之下，就能夠切實(shí)有效的提升吞噬細(xì)胞相應(yīng)的活性，這種藥物可以提升被感染動(dòng)物相應(yīng)的存活時(shí)間，當(dāng)這種作用出現(xiàn)在人體之中的時(shí)候，就能夠爭(zhēng)取到寶貴的搶救時(shí)間。而在實(shí)際的使用過程中，這種藥物不僅能夠有效的抵抗各種病菌的侵襲，更為重要的是通過這種藥物的使用，還能夠在一定程度上對(duì)相應(yīng)的免疫活性進(jìn)行調(diào)節(jié)，并在治療的過程中保持較小的副作用。

1.測(cè)試驗(yàn)

1.1 試驗(yàn)用品以及對(duì)照用品

儀器：AE-240型分析天平（瑞士梅特勒公司）；PHS-2C型pH計(jì)（上海）；DIONEXP680高效液相色譜儀（美國(guó)）；DL-18型全自動(dòng)水分測(cè)定儀（瑞士梅特勒公司）

試劑：磷酸二氧鉀、無水磷酸氫二鈉為分析純、色譜純乙腈。

對(duì)照品：頭孢地嗪（批號(hào)：130520-200902，含量：88.6%），中國(guó)食品藥品檢定研究院

樣品：注射用頭孢地嗪鈉（批號(hào)：160201、160202、160203，規(guī)格：1.0/g支）

1.2 試驗(yàn)相應(yīng)內(nèi)容以及最終結(jié)果

1.2.1 性狀

按中國(guó)藥典本品應(yīng)為白色至微黃色的粉末或結(jié)晶性粉末；無臭或稍有特異性氣味。本品在水中極易溶解，在無水乙醇或乙醚中幾乎不溶。

試驗(yàn)樣品為白色粉末，且均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

1.2.2 鑒別方法

（1）在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，取試驗(yàn)樣品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1毫升中約含頭孢地嗪0. lmg的溶液，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20微升注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取頭孢地嗪對(duì)照品適量，同法測(cè)定。供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

檢測(cè)結(jié)果，試驗(yàn)樣品符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

（2）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集 922圖）一致。

檢測(cè)結(jié)果，試驗(yàn)樣品符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

1.3 有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)

1.3.1 檢測(cè)方法

有關(guān)物質(zhì)I：臨用新制。取本品約25毫克，置50毫升量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1毫升，置100毫升量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm，精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20微升，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的6倍，供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.5倍。

有關(guān)物質(zhì)II：臨用新制。取本品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1毫升中含頭孢地嗪0.5毫克的溶液，作為供試品溶液;另取頭孢地嗪對(duì)照品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1毫升中約含5微克的溶液，作為對(duì)照溶液。照分子排阻色譜法測(cè)定。用球狀親水硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液（pH 7.0）-乙腈（95 : 5）為流動(dòng)相，流速為每分鐘0.8毫升。檢測(cè)波長(zhǎng)為231mn。取供試品溶液10毫升加0. lmol/L氫氧化鈉溶液1毫升，室溫放置10分鐘，再加0. lmol/L鹽酸溶液1ml，搖勻，取20微升注入液相色譜儀，記錄色譜圖；頭孢地嗪峰與其前相鄰降解雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求。精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20微升，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖；供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，按外標(biāo)法以頭孢地嗪峰計(jì)算，保留時(shí)間小于頭孢地嗪峰的雜質(zhì)峰的總量不得過1.5%。

1.3.2 專屬性試驗(yàn)

（1）酸破壞：取頭孢地嗪鈉樣品至容量瓶中，加配置好的酸性溶液，放置 20分鐘，用堿中和后，加流動(dòng)相溶解至刻度，取20微升注入液相色譜儀，記錄色譜圖。降解產(chǎn)物峰能有效地分離，且與主成分峰也能有效分離。

（2）堿破壞：取頭孢地嗪鈉樣品至容量瓶中，加配置好的堿性溶液，放置 15分鐘，用酸中和后，加流動(dòng)相溶解至刻度，取20微升注入液相色譜儀，記錄色譜圖。降解產(chǎn)物峰能有效地分離，且與主成分峰能有效地分離。

1.4 最小檢測(cè)限

精密稱取頭孢地嗪對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并逐級(jí)稀釋成一系列濃度的溶液，分別進(jìn)樣，計(jì)算信噪比。頭孢地嗪最小檢測(cè)限為0.68ng。

1.5 小結(jié)

以上測(cè)定結(jié)果表明，在該色譜條件下，各降解物質(zhì)峰均能有效分離，且均能與主成分峰有效的分離。

2.注射用頭孢地嗪鈉的無菌試驗(yàn)方法驗(yàn)證

2.1 樣品：自制注射用頭孢地嗪鈉，批號(hào)：160201、160202、160203，規(guī)格：1.0/g支

方法：中國(guó)藥典無菌檢查法。

2.2 試驗(yàn)所用的菌種：（1）金黃色葡萄球菌；（2）枯草芽孢桿菌；（3）銅綠假單胞菌；（4）生孢梭菌；黑曲霉菌

2.3 培養(yǎng)基：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)肉湯、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。

2.4 菌液的制備：分別取金黃色葡萄球菌少量、枯草芽孢奸菌少量、銅綠假單胞菌的新制培養(yǎng)物少量接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，生孢梭菌的新制培養(yǎng)物少量接種到硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，溫度控制在 34攝氏度，在此條件下培養(yǎng) 24小時(shí)。分別取此條件培養(yǎng)后的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌的肉湯培養(yǎng)物，加入生理鹽水，稀釋到濃度，培養(yǎng)的活菌用來計(jì)數(shù)。

取生孢梭菌的新制培養(yǎng)物少量接種到改良馬丁培養(yǎng)基中，在34攝氏度溫度條件下培養(yǎng)，經(jīng)過24小時(shí)后，取培養(yǎng)物1毫升，加適量生理鹽水，加倍稀釋、培養(yǎng)的活菌用來計(jì)算。

取白色念珠菌的新制培養(yǎng)物接種到改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25攝氏度溫度條件，培養(yǎng)7天，等大量的菌株成熟后。取經(jīng)此條件下培養(yǎng)的白色念珠菌培養(yǎng)物，加入生理鹽水沖洗，用刻度吸管吸出并轉(zhuǎn)移至空試管作為原液，稀釋，培養(yǎng)的活菌用來計(jì)算。

2.5 供試品制備：取自制注射用頭孢地嗪樣品10支，每支加入適量適宜溶液溶解。

2.6 試驗(yàn)方法

活菌計(jì)數(shù)：每種菌液做平行2皿，加入上述4種細(xì)菌菌液各1毫升，注入營(yíng)養(yǎng)瓊脂約15-20毫升待凝固后，34攝氏度倒置培養(yǎng)（生孢梭菌注入100毫升硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基）48小時(shí)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。取白色念珠菌懸液、黑曲霉菌懸液各1毫升分別注入玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基15-20毫升，25攝氏度培養(yǎng)，72小時(shí)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。

薄膜過濾：將頭孢地嗪供試液按薄膜過濾法過濾，用經(jīng)滅菌的氯化鈉蛋白胨緩沖液沖洗，每次使用100毫升，逐漸加入試驗(yàn)菌少于 100CFU，取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或改良馬丁培養(yǎng)基中。按規(guī)定培養(yǎng)15天。

陽性對(duì)照：取一裝有同樣體積培養(yǎng)基的試管，不加頭孢地嗪供試品，操作完全同上，加入相同量的試驗(yàn)菌，作為其陽性對(duì)照，按規(guī)定溫度培養(yǎng)15天。

陰性對(duì)照：以氯化鈉蛋白胨溶液代替菌液和供試品，接入規(guī)定培養(yǎng)基中培養(yǎng)15天。

2.7 結(jié)果

細(xì)菌和真菌數(shù)計(jì)數(shù)結(jié)果見表1

3.結(jié)論

經(jīng)驗(yàn)證，該高效液相色譜法可作為注射用頭孢地嗪鈉的有關(guān)物質(zhì)檢查法；該薄膜過濾法可作為注射用頭 査孢地嗪鈉的無菌檢法，對(duì)照菌液為金黃色葡萄球菌。

[1]熊雯,鄭萍,羅塬.兩種HPLC法測(cè)定注射用頭孢地嗪鈉有關(guān)物質(zhì)的方法學(xué)研究[J].國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè)).2016(04)

[2]鐘瑩,周衛(wèi)軍,楊放,王健松,朱少璇.HPLC梯度洗脫法測(cè)定注射用頭孢地嗪鈉的有關(guān)物質(zhì)[J].中國(guó)抗生素雜志.2014(01)

R473.5

A

1672-5018（2017）03-216-02