田 飛, 劉春娜，劉新宇，陳秋元,丁宇豪

(1. 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東 汕頭 515041；2. 錦州醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室，遼寧 錦州 121000)

神經(jīng)肽優(yōu)洛可定對(duì)丘腦底核神經(jīng)元自發(fā)放電影響與CRF-2R關(guān)系研究

田 飛1, 劉春娜2，劉新宇2，陳秋元2,丁宇豪2

(1. 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東 汕頭 515041；2. 錦州醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室，遼寧 錦州 121000)

目的研究神經(jīng)內(nèi)分泌生物活性肽優(yōu)洛可定(urocortin，UCN)對(duì)丘腦底核(subthalamic nucleus, STN)神經(jīng)元放電及STN中多巴胺(dopamine, DA)能、谷氨酸(glutamic acid, GLU)能神經(jīng)傳遞的影響，研究UCN在STN中是否與GLU及DA存在匯聚作用，探討UCN在帕金森疾病(Parkinson’s disease, PD)發(fā)生中可能發(fā)揮的作用。方法取40只SD大鼠，采用神經(jīng)電生理實(shí)驗(yàn)方法中的微電泳技術(shù)，在微電泳UCN過(guò)程中，觀察STN神經(jīng)元放電的波形及頻率變化，同時(shí)，微電泳Astressin(AST)及蛋白激酶 A(protein kinase A，PKA)抑制劑，觀察促皮質(zhì)素釋放因子2型受體(corticotropin releasing factor 2 receptor，CRF-2R)是否參與UCN對(duì)STN 神經(jīng)元放電的影響。另外，在微電泳DA和GLU過(guò)程中，給予UCN及AST，觀察STN神經(jīng)元放電的變化，明確是否存在DA能及GLU能與UCN的交匯作用。結(jié)果微電泳UCN過(guò)程中，82%(27/33)STN神經(jīng)元頻率減慢。STN平均放電頻率由(3.65±0.27)Hz減少到(2.05±0.33)Hz，微電泳UCN前、后STN放電頻率明顯降低(P<0.01)。另外，UCN抑制作用可被AST明顯拮抗 (P<0.01), UCN抑制作用也可被PKA阻斷劑部分阻斷。在微電泳抑制性神經(jīng)遞質(zhì)DA和興奮性GLU過(guò)程中，UCN能進(jìn)一步協(xié)同DA的抑制效應(yīng)，并明顯拮抗GLU的興奮作用(P<0.01)。結(jié)論UCN與DA能及GLU能在STN神經(jīng)元中存在匯聚作用，UCN可能是通過(guò)與CRF-2R 結(jié)合，進(jìn)而通過(guò)PKA信號(hào)通路，影響DA能、GLU能神經(jīng)遞質(zhì)活動(dòng)，抑制STN 神經(jīng)元放電。

丘腦底核；多巴胺；谷氨酸；帕金森疾病；優(yōu)洛可定；微電泳

丘腦底核(subthalamic nucleus，STN)是基底神經(jīng)節(jié)(basal ganglia，Bgl)重要的核團(tuán)之一，主要調(diào)控機(jī)體的運(yùn)動(dòng)功能及行為。蒼白球(globus pallidus，Gpe)和黑質(zhì)網(wǎng)狀部之間的重要中繼站就是STN，在調(diào)節(jié)Bgl神經(jīng)核團(tuán)之間的生理功能及病理活動(dòng)中起關(guān)鍵的整合作用[1-2]。神經(jīng)內(nèi)分泌生物活性肽優(yōu)洛可定(urocortin，UCN)是由下丘腦分泌，具有多種神經(jīng)及心血管功能[3]。目前的研究表明，UCN 在生理及病理情況下可能對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system, CNS)具有保護(hù)功能[4-5]。在本實(shí)驗(yàn)室既往的研究中發(fā)現(xiàn)，UCN對(duì)Bgl的另一個(gè)主要核團(tuán)——紋狀體(striatum, STR)的自發(fā)放電有抑制作用[6]，另外，也發(fā)現(xiàn)UCN能通過(guò)抑制STR的多巴胺(dopamine，DA)神經(jīng)元功能，同時(shí)抑制興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的興奮毒性，可能在帕金森疾病(Parkinson’s disease, PD)中發(fā)揮治療作用[7]。但目前，UCN對(duì)STN的神經(jīng)元放電的影響及對(duì)STN內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)(如興奮性神經(jīng)遞質(zhì)GLU及抑制性遞質(zhì)DA)的調(diào)節(jié)作用未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)選用神經(jīng)電生理中常用且經(jīng)典的微電泳技術(shù)，結(jié)合細(xì)胞外記錄的實(shí)驗(yàn)方法，微電泳UCN、促皮質(zhì)素釋放因子2型受體(corticotropin releasing factor 2 receptor， CRF-2R)抑制劑 Astressin(AST)，監(jiān)測(cè)兩者對(duì)STN 神經(jīng)元放電頻率及波形影響，同時(shí)監(jiān)測(cè)UCN對(duì)STN中抑制性DA能、興奮性GLU能神經(jīng)傳遞的改變，以探討STN內(nèi)興奮及抑制性神經(jīng)遞質(zhì)間的相互平衡及制約作用，及可能的神經(jīng)通路機(jī)制。目前，很多研究已明確STN是導(dǎo)致PD的重要核團(tuán)[8]。因此，本研究將為臨床治療神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)疾病，如PD的診斷及治療，提供有效而可靠的藥物作用靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與試劑Sprague-Dawley(SD)大鼠40只，由錦州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體質(zhì)量180～220 g，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(遼) 2007-0009。UCN(10-6mol·L-1)；Astressin(AST，CRF-2R的受體阻斷劑，10-6mol·L-1)；DA 0.5 mol·L-1；Cropromazine(CPM，為DA受體的阻斷劑，1.0 mol·L-1)；GLU(1.0 mol·L-1)；MK-801(NMDA受體的常用阻斷劑，1.0 mol·L-1)；PKA及H-89，上述藥品及試劑全部購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。

1.2麻醉開(kāi)顱并對(duì)STN定位取40只上述SD大鼠，烏拉坦腹腔注射(1 g·kg-1)全麻，麻醉成功后，將大鼠置于腦立體定位儀，定位STN，常規(guī)開(kāi)顱術(shù)開(kāi)顱。根據(jù)Paxions & Watson大鼠腦圖譜，確定STN的坐標(biāo)：中線旁開(kāi)2.5～3.0 mm，前囟后3.8～4.0 mm，腦表下7.0～8.0 mm。

1.3微電泳受試藥物采用神經(jīng)電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法中的微電泳技術(shù)(51-217 型微管拉制儀，美國(guó)STOELTING公司)及神經(jīng)元細(xì)胞外記錄相結(jié)合的實(shí)驗(yàn)方法。拉制的7管玻璃微電極呈傘裝，中心管直徑為4～8 μm間，中心電阻在5～12 MΩ作用。含有1%滂胺天藍(lán)的NaCl溶液(3.0 mol·L-1)灌注于中心管內(nèi)，作為本實(shí)驗(yàn)用引導(dǎo)電極；另外6個(gè)外周管的電阻均應(yīng)控制在20～100 MΩ之間，分別灌注下列受試藥物，包括UCN、AST、DA、CPM、GLU以及MK-801。1.4生物肽UCN對(duì)STN神經(jīng)元放電影響微電極推進(jìn)器將玻璃微電極接近定位的STN坐標(biāo)位置，然后緩慢插入STN， DAM80 微電極放大器采集STN神經(jīng)元單位放電，經(jīng)過(guò)濾波后，示波器上顯示STN神經(jīng)元放電波形，Spike2采集系統(tǒng)(英國(guó)CED公司)處理神經(jīng)元輸入的生物電信號(hào)。在本實(shí)驗(yàn)中，監(jiān)測(cè)STN神經(jīng)元自發(fā)放電情況，包括觀察STN放電波形、STN神經(jīng)元傳出分布的方式及頻率、是否有爆發(fā)式放電、放電的基本特征及形式。通過(guò)外周管分別微電泳不同的受試藥物，包括微電泳不同濃度神經(jīng)內(nèi)分泌生物活性肽UCN及CRF-2R阻斷劑AST，微電泳為電流40 nA，滯流的阻力電流為10 nA，微電泳時(shí)程20 s，記錄UCN及CRF-2R阻斷劑對(duì)STN 神經(jīng)元放電影響。微電泳UCN過(guò)程中給予AST，監(jiān)測(cè)UCN及CRF-2R之間的關(guān)系。

1.5生物肽UCN對(duì)STN內(nèi)的DA能、GLU能神經(jīng)傳遞的影響6個(gè)外周管實(shí)驗(yàn)前1 h灌注GLU及NMDA阻斷劑MK-801，把GLU微電泳入STN神經(jīng)元，觀察STN 內(nèi)的神經(jīng)元自發(fā)放電的變化，于微電泳GLU的41～60 s，微電泳20 s UCN，于微電泳GLU的81～100 s之間微電泳AST，20 s。監(jiān)測(cè)UCN對(duì)STN 內(nèi)GLU能神經(jīng)傳遞的影響。同上述方法，把DA及其受體阻斷劑CPM微電泳入STN神經(jīng)元，監(jiān)測(cè)STN 神經(jīng)元放電的變化，于微電泳DA的41～60 s、81～100 s之間，分別微電泳UCN和CRF-2R阻斷劑AST 各20 s，監(jiān)測(cè)UCN對(duì)STN 內(nèi)DA 能神經(jīng)傳遞的影響。最后，在微電泳CRF-2R阻斷劑AST-2B、PKA及其阻斷劑H-89，觀察UCN對(duì)STN中神經(jīng)元影響的可能信號(hào)機(jī)制。

2 結(jié)果

2.1STN神經(jīng)元自發(fā)放電情況共定位并成功觀察到STN神經(jīng)元58個(gè)，觀察受試STN神經(jīng)元的放電波形及特征。STN神經(jīng)元放電頻率比較緩慢并且規(guī)則，大多為單個(gè)神經(jīng)元放電，為單峰，未見(jiàn)雙向動(dòng)作電位(action potential, AP)，未見(jiàn)爆發(fā)式多棘放電。STN神經(jīng)元放電頻率一般在0～8 Hz之間。

2.2神經(jīng)肽UCN及AST對(duì)STN神經(jīng)元放電影響本部分實(shí)驗(yàn)中共觀察STN神經(jīng)元33個(gè)。將UCN(10-6mol·L-1, 20 nA，20 s)微電泳入受試的STN神經(jīng)元，81.81%(27/33)STN神經(jīng)元自發(fā)放電頻率被降低，對(duì)18.19%(6/33)STN神經(jīng)元無(wú)明顯改變。上述33個(gè)被觀察的STN神經(jīng)元的平均放電頻率由微電泳前的(3.65±0.27)Hz減少至(2.05±0.33)Hz，給予UCN前、后STN神經(jīng)元放電頻率降低，差異具有顯著性(P<0.01)。此外，選擇對(duì)UCN產(chǎn)生抑制作用的STN神經(jīng)元24個(gè)，給予AST(10-6mol·L-1, 20 nA，20 s)，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)79.17%(19/24)STN的放電頻率被CRF-2R阻斷劑AST明顯升高，由(3.45±0.36)Hz升高至(5.55±0.47)Hz(P<0.01)。選取對(duì)UCN產(chǎn)生抑制效應(yīng)的上述STN神經(jīng)元中的20個(gè)，微電泳UCN(20 nA，40 s)過(guò)程中給予AST(20 nA，20 s)，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)UCN的抑制效應(yīng)被AST拮抗，差異具有顯著性(P<0.01)，可翻轉(zhuǎn)85%(17/20)STN神經(jīng)元的抑制效應(yīng)，頻率由(2.11±0.34)Hz增加至(5.45±0.53)Hz。見(jiàn)Fig 1。

Fig 1 Effect of UCN on STN neuron’s spontaneous discharge

AST was used during the period of 21th-40th s in UCN.**P<0.01vsnormal group;##P<0.01vsUCN group.

2.3UCN及AST對(duì)STN中抑制性DA神經(jīng)傳遞的影響在本部分實(shí)驗(yàn)中，觀察了對(duì)DA產(chǎn)生抑制效應(yīng)的STN神經(jīng)元共計(jì)21個(gè)。發(fā)現(xiàn)DA(20 nA，20 s)可使正常的STN神經(jīng)元產(chǎn)生抑制效應(yīng)，拮抗STN神經(jīng)元的正常自發(fā)放電波形及頻率。STN放電頻率由(3.45±0.55)Hz降低至(2.17±0.32)Hz，該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)差異具有顯著性(P<0.01)。然后，選取上述對(duì)DA產(chǎn)生抑制效應(yīng)的21個(gè)STN神經(jīng)元，于微電泳DA 的21～40 s之間，外周管微電泳UCN(20 nA，20 s)，發(fā)現(xiàn)71.42%(15/21)STN中的DA神經(jīng)元的放電頻率進(jìn)一步下降，放電頻率由(2.17±0.32)Hz明顯減少至(1.45±0.29)Hz，(P<0.05)。最后，在微電泳DA的61～80 s之間，由外周管同時(shí)微電泳AST(20 nA，20 s)，使原本抑制的76.19%(16/21)STN中DA神經(jīng)元放電頻率明顯增加，放電頻率由 (1.65±0.27)Hz增加至(4.52±0.68)Hz，該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)差異具有顯著性(P<0.05)。見(jiàn)Fig 2。

Fig 2 Effects of UCN on DA-ergic neuron in STN

A: UCN affected DA-ergic neuron in STN. UCN and AST were used to observe the effects of UCN on DA; B: The effects and wave of UCN on STN’s DA-ergic neurons.**P<0.01vsnormal group;##P<0.01vsDA group.

2.4UCN及AST對(duì)STN中興奮性GLU神經(jīng)傳遞的影響在本部分實(shí)驗(yàn)中，觀察對(duì)GLU產(chǎn)生興奮效應(yīng)的STN神經(jīng)元共計(jì)18個(gè)。由外周管微電泳GLU(20n A，20 s)，77.78%(14/ 18)STN神經(jīng)元產(chǎn)生興奮效應(yīng)，其自發(fā)放電頻率明顯加快，差異具有顯著性(P<0.01)。然后，選擇上述對(duì)GLU產(chǎn)生興奮效應(yīng)的14個(gè)STN神經(jīng)元，在21～40 s之間由外周管微電泳UCN(20 nA，20 s)，STN中的78.57%(11/14)的GLU能放電頻率明顯減少(P<0.01)，放電頻率由(5.67±0.48)Hz減少至(2.93±0.77)Hz。最后，選用對(duì)GLU產(chǎn)生興奮效應(yīng)的GLU能神經(jīng)元14個(gè)，在微電泳GLU的61～80 s，于外周管微電泳CRF-2R阻斷劑AST(20 nA，20 s)，AST可明顯增加STN神經(jīng)元放電頻率(P<0.05)，放電頻率由(5.65±0.38)Hz增加至(6.65±0.47)Hz，見(jiàn)Fig 3。

Fig 3 Effects of UCN on glu-ergic neuron in STN

A: UCN affected GLU-ergic neuron in STN. UCN could inhibit the excited effects of GLU and AST could excited GLU in STN; B: The effects and wave of UCN on STN’s GLU-ergic neurons.**P<0.01vsnormal group;#P<0.05,##P<0.01vsGLU group.

2.5UCN對(duì)STN神經(jīng)元中CRF-2R及PKA通路的影響在本研究中，另選擇對(duì)PKA產(chǎn)生作用的STN神經(jīng)元16個(gè)，在提前給予PKA通路激動(dòng)劑后，再給予UCN，UCN可阻斷PKA產(chǎn)生的興奮效應(yīng)，在21～40 s之間由外周管微電泳UCN(20 nA，20 s)，STN中的75.0%(12/16)的GLU能放電頻率明顯減少(P<0.01)，放電頻率由(4.29±0.37)Hz減少至(3.02±0.33)Hz。在微電泳PKA期間，于外周管微電泳H89(20 s)，PKA 的興奮效應(yīng)消失，而給予UCN，不能繼續(xù)抑制STN神經(jīng)的放電，放電頻率由微電泳前的(3.06±0.34)Hz變化至(3.03±0.29)Hz。給予CRF-2R阻斷劑AST(20 nA，20 s)，AST也不再增加STN神經(jīng)元放電頻率，放電頻率變化為(3.07±0.33)Hz(P>0.05)。見(jiàn)Fig 4。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，神經(jīng)內(nèi)分泌生物肽UCN可明顯降低基底神經(jīng)節(jié)中的STN神經(jīng)元放電頻率及波形，給藥過(guò)程中未見(jiàn)爆發(fā)式放電，提示UCN抑制STN神經(jīng)元的放電。然而，CRF-2R阻斷劑AST明顯加快STN神經(jīng)元的放電頻率，給予AST過(guò)程中偶見(jiàn)爆發(fā)式放電。另外，微電泳UCN期間同時(shí)微電泳AST，AST翻轉(zhuǎn)UCN的抑制效應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步提示STN中存在UCN能神經(jīng)元，并且UCN 與CRF-2R結(jié)合后觸發(fā)隨后的生物學(xué)效應(yīng)，產(chǎn)生對(duì)STN的抑制作用。

Fig 4 Effects of UCN on PKA in STN

A: UCN affected CRF-2R and PKA in STN. During the period of PKA, administrated UCN, PKA and H89; B: The effects and wave of UCN on STN’s PKA and CRF-2R.**P<0.01vsnormal group;##P<0.01 vs PKA group.

本實(shí)驗(yàn)中的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，DA能在STN的神經(jīng)傳遞中起抑制效應(yīng)，而由外周管同時(shí)微電泳UCN，UCN協(xié)同了DA的抑制效應(yīng)。相反，AST產(chǎn)生興奮效應(yīng)，拮抗DA的抑制效應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，DA能與UCN在STN的神經(jīng)元中存在交匯現(xiàn)象。 DA能與UCN都對(duì)STN放電產(chǎn)生抑制效應(yīng)，進(jìn)一步提示UCN可能在PD等病理情況下，對(duì)STN神經(jīng)元起保護(hù)作用，并且這種保護(hù)作用是通過(guò)與CRF-2R結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的。

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)，GLU能神經(jīng)投射纖維對(duì)STN神經(jīng)元有明顯的興奮作用，神經(jīng)生物肽UCN可以拮抗GLU的過(guò)度興奮效應(yīng)，且同時(shí)微電泳AST 對(duì)GLU興奮效應(yīng)具有一定協(xié)同作用，提示UCN及GLU能在STN中存在匯聚作用，UCN與STN神經(jīng)元中CRF-2R結(jié)合后，拮抗STN中的GLU能神經(jīng)元的過(guò)度興奮毒性。本實(shí)驗(yàn)室既往研究發(fā)現(xiàn)，在PD病理情況下，DA能神經(jīng)元在Bgl中的黑質(zhì)(substantia nigra, SN)——STR通路中受損，這就使DA的抑制作用減弱，從而使具有興奮效應(yīng)的神經(jīng)遞質(zhì)，如乙酰膽堿能(acetyl choline，ACH)及GLU能等相對(duì)占優(yōu)勢(shì)，導(dǎo)致PD的肌張力增強(qiáng)的臨床表現(xiàn)[9-10]。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，UCN可以降低GLU能的神經(jīng)興奮性，降低PD等病理狀態(tài)下GLU過(guò)度表達(dá)所產(chǎn)生的興奮毒性，提示UCN可在PD等疾病中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)及治療作用。

UCN2與CRF-2R 結(jié)合后是如何對(duì)STN神經(jīng)元產(chǎn)生抑制效應(yīng)的呢？UCN2可能在PD中發(fā)揮保護(hù)作用機(jī)制如何呢？在本實(shí)驗(yàn)研究的最后一部分對(duì)機(jī)制進(jìn)行了初步研究。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，UCN能抑制PKA所引起的STN神經(jīng)元的抑制效應(yīng)，但UCN的抑制作用在給予PKA阻斷劑后，該效應(yīng)被取消，并且給予CRF-2R阻斷劑后，也不再發(fā)揮作用，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，UCN很可能與CRF-2R 結(jié)合后，進(jìn)而通過(guò)激活PKA而引起隨后的生物學(xué)效應(yīng)，阻斷了神經(jīng)遞質(zhì)的興奮毒性作用有關(guān)。

UCN是CRF肽類家族的一個(gè)新型的神經(jīng)內(nèi)分泌生物肽，具有抗焦慮、抗糖尿病心肌病變、降血壓、擴(kuò)血管等多種生理及藥理作用[11-12]。另外，本實(shí)驗(yàn)室既往已經(jīng)證實(shí)，在腦損傷過(guò)程中UCN具有神經(jīng)保護(hù)作用，UCN可抑制STR神經(jīng)元的過(guò)度放電，特別是在大鼠嗎啡成癮中減輕大鼠的成癮性，能明顯改善阿片類藥物的成癮及戒斷綜合癥[7, 13-14]，發(fā)揮抑制STR神經(jīng)元過(guò)度放電的神經(jīng)保護(hù)作用。但是，UCN是如何發(fā)揮其CNS的保護(hù)作用的呢？目前，其具體機(jī)制尚不明確[14]。在本實(shí)驗(yàn)中，證實(shí)UCN與CRF-2R 結(jié)合后，發(fā)揮抑制STN自發(fā)性放電的效應(yīng)，可能是UCN發(fā)揮神經(jīng)元的保護(hù)作用的初始機(jī)制，并進(jìn)一步證實(shí)UCN與CRF-2R 結(jié)合后觸發(fā)了PKA信號(hào)通路，這其中可能還涉及其他分子生物學(xué)機(jī)制，目前仍不明確，應(yīng)在今后的研究中進(jìn)一步闡述和證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，UCN通過(guò)與CRF-2R結(jié)合，進(jìn)而通過(guò)激活PKA，抑制STN神經(jīng)元放電活動(dòng)，協(xié)同DA的抑制效應(yīng)，降低STN神經(jīng)元中GLU的過(guò)度興奮性，UCN可能在生理及PD病理情況下發(fā)揮CNS保護(hù)作用。

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EffectsofneuroactivepeptideurocortinonSTNneuron’sspontaneousdischargeandrelationshipwithCRF-2R

TIAN Fei1, LIU Chun-na2, LIU Xin-yu2, CHEN Qiu-yuan2, DING Yu-hao2

(1.theSecondAffiliatedHospitalofShantouUniversity,ShantouGuangdong515041,China;2.DeptofPharmacology,JinzhouMedicalUniversity,JinzhouLiaoning121000,China)

AimTo investigate the effects of endocrinal petptide urocortin on subthalamic nucleus (STN) neuron’s discharge, also observe the convergence effect of UCN with dopamine (DA) and glutamate (GLU), so as to understand the regulation effects of UCN and its mechanism in Parkinson’s disease (PD).MethodsForty Sprague-Dawley rats were used in this experiment. Nerve electrophysiology method-microiontophoresis was used to observe the effects of UCN on STN neuron firing rates and firing wave. Astressin (AST, the blocker of CRF receptor 2), protein kinase A (PKA) were used to observe the effects of UCN whether via CRF-2R and PKA signal pathway. Moreover, given UCN during the period of DA and GLU, the effects of UCN on DA and GLU in STN neurons were determined.ResultsDuring the period of using the UCN, UCN could inhibit the firing rate of 82% (27/33) STN neuron (P<0.01), and the firing discharge rates were reduced from(3.65±0.27)Hz to (2.05±0.33) Hz (P<0.01). However, the inhibitory effects of UCN in STN could be antagonized by AST. Given UCN during the period of microiontophoresis of inhibitory neurotransmitter (DA) and excited neurotransmitter (GLU), UCN could enhance the effects of DA and attenuate the excitatory effects of GLU (P<0.01).ConclusionUCN and GLU/DA in STN, UCN play inhibitory and regulated effects on STN neurotransmitters(DA and GLU)via CRF-2 receptor and PKA signal pathway.

subthalamic nucleus; dopamine; glutamate; Parkinson’s disease; urocortin; microiontophoresis

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.10.019

A

：1001-1978(2017)10-1425-06

R-332；R322.81；R338.1；R338.24；R745.702.2；R977.6

時(shí)間：2017-9-5 9:26 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170905.0925.038.html

2017-05-20,

2017-08-25

廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究基金(No A2015085)；國(guó)家大學(xué)生創(chuàng)新基金 (No 201610160042)

田 飛(1977-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，研究方向：神經(jīng)外科學(xué)，E-mail: 30377554@qq.com； 劉春娜(1977-)，女，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：神經(jīng)藥理學(xué)，通訊作者，Tel：0416-4673465，E-mail: 30377554@qq.com