李志軍，路冬云，周玉新，杜樹山

(1.河南宏力醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453400；2.新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000；3.河南大學(xué) 中藥研究所，河南 開封 475004；4.北京師范大學(xué)資源學(xué)院 教育部資源藥物工程研究中心，北京 100875)

·中藥工業(yè)·

GC測(cè)定大活絡(luò)丸中麝香酮的含量

李志軍1，路冬云2，周玉新3，杜樹山4*

(1.河南宏力醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453400；2.新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000；3.河南大學(xué) 中藥研究所，河南 開封 475004；4.北京師范大學(xué)資源學(xué)院 教育部資源藥物工程研究中心，北京 100875)

目的：建立大活絡(luò)丸中麝香酮的氣相色譜(GC)含量測(cè)定方法。方法：采用氣相色譜法，色譜柱為19091J-413 HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；流動(dòng)相為氮?dú)?，流速?.0 mL·min-1，F(xiàn)ID檢測(cè)器；進(jìn)樣口溫度為250 ℃；檢測(cè)器溫度為220 ℃。結(jié)果：麝香酮在0.12～0.72 μg呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系(r=0.999 9)，加樣回收率為99.23%，RSD為2.59%。結(jié)論：該方法快速、簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性較好，結(jié)果可靠，可用于控制大活絡(luò)丸制劑的質(zhì)量。

大活絡(luò)丸；麝香酮；氣相色譜法；含量測(cè)定

大活絡(luò)丸是紅參、何首烏、蘄蛇、麝香、制草烏等48味藥材組成的中藥復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、除濕化痰、活絡(luò)止痛之功能。麝香酮是該藥的主要有效成分，故以麝香酮為指標(biāo)進(jìn)行含量測(cè)定，控制該藥品的質(zhì)量。參照《中華人民共和國藥典》2015年版一部[1]，本文建立大活絡(luò)丸中麝香酮的GC含量測(cè)定方法，該方法快速、簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性較好，結(jié)果可靠。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 6890N氣相色譜儀；KQ-250型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)；Mettler Toledo AG135十萬分之一電子分析天平(梅特勒-托利多)；檢測(cè)器：FID；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；檢測(cè)器溫度：220 ℃；理論板數(shù)按麝香酮峰計(jì)算，應(yīng)不低于5000。

1.2 試藥

對(duì)照品麝香酮(中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110719-200410，供含量測(cè)定用)；無水乙醇(北京化工廠，分析純，批號(hào)：090523)；大活絡(luò)丸(長春經(jīng)開藥業(yè)有限公司，批號(hào)分別為071108，071109，071110)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性

色譜柱：19091J-413 HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；載氣：氮?dú)?；流速?.0 mL·min-1；爐溫：190 ℃；進(jìn)樣口：250 ℃；檢測(cè)器：FID；檢測(cè)器溫度：220 ℃。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 取麝香酮對(duì)照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成質(zhì)量濃度為0.07 mg·mL-1的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 樣品溶液的制備 取大活絡(luò)丸適量，與硅藻土按6∶4比例粉碎并均勻混合成中粉，取上述粉末3.5 g，精密稱定，置50 mL具塞錐形瓶中，加無水乙醇10 mL，密塞，振搖，靜置1 h，濾過，取續(xù)濾液作為樣品溶液。

2.2.3 缺麝香陰性對(duì)照溶液的制備 根據(jù)本品藥材組成，依法制備了缺人工麝香的陰性對(duì)照樣品。按樣品制備法測(cè)定，結(jié)果見圖1。結(jié)果顯示，麝香酮對(duì)照品與大活絡(luò)丸中麝香酮的保留時(shí)間基本一致，陰性樣品溶液在麝香酮色譜峰位置處無相應(yīng)的峰出現(xiàn)，陰性無干擾。

注：A.麝香酮對(duì)照品；B.大活絡(luò)丸供試品；C.陰性對(duì)照樣品。圖1 大活絡(luò)丸氣相色譜圖

2.3 線性關(guān)系考察

精密稱取麝香酮對(duì)照品16.67 mg，置10 mL量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取上述對(duì)照品溶液0.6、1.0、1.2、2.0、2.4、3.6 mL，分別在25 mL量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。再分別精密吸取各比例溶液3 μL，注入氣相色譜測(cè)定儀，測(cè)定。以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)(X)，計(jì)算線性回歸?；貧w方程為Y=787.15X-5.94(r=0.999 9)。經(jīng)測(cè)定，在0.12～0.72 μg麝香酮峰面積與進(jìn)樣量(μg)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn)

分別精密吸取質(zhì)量濃度為0.067 mg·mL-1的麝香酮對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，每次3 μL，按照色譜條件測(cè)定，記錄峰面積，測(cè)定結(jié)果顯示，麝香酮峰面積的RSD為1.6%，精密度較好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一樣品溶液，分別于0、2、4、6、8 h按照色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰面積，結(jié)果顯示，麝香酮峰面積的RSD為1.66%，表明大活絡(luò)丸樣品溶液在8 h內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取同一批大活絡(luò)丸(批號(hào)：071108)，按樣品溶液的制備方法制備供試液共6份，并在上述色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，樣品中麝香酮的平均含量為0.143 mg/丸，RSD為2.38%，重復(fù)性較好。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

取本品已知準(zhǔn)確含量的樣品(批號(hào)：071108)1.75 g，精密稱定，置50 mL具塞錐形瓶中。精密加入麝香酮對(duì)照品溶液(0.583 5 mg)，按樣品項(xiàng)下方法測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果(n=6)

結(jié)果顯示，麝香酮的加樣回收率在95%～105%，符合規(guī)定。

2.8 樣品含量測(cè)定

精密稱取3批不同批號(hào)大活絡(luò)丸制劑，每批平行測(cè)定3份，按樣品溶液的制備方法制備供試液，并在上述色譜條件下測(cè)定，計(jì)算樣品中麝香酮的含量，結(jié)果見表2。

表2 3批大活絡(luò)丸中麝香酮含量測(cè)定結(jié)果(n=3) mg/丸

結(jié)果顯示，3批大活絡(luò)丸中每丸含麝香以麝香酮計(jì)算平均值為0.140 mg/丸。

3 討論

3.1 提取溶劑量的考察

取本品混合后中粉，精密加入不同體積(5、10、15 mL)的無水乙醇比較，結(jié)果顯示，10 mL即可提取完成。

3.2 提取時(shí)間的考察

取本品混合后中粉，精密稱定，分別靜置20、40、60、80 min分析比較，結(jié)果顯示，放置提取60 min提取完全。

3.3 色譜柱條件考察

色譜柱考察選用DB-5毛細(xì)血管柱[2]、氣相色譜柱Rtx-Wax(30 m×0.25 mm×0.25 μm)[3]、日本SHMADZU CBP1-M25-0.25石英毛細(xì)管[4]、HP-5柱(30 mm×0.32 mm×0.25 μm)[5]、sPBTM-1FUSED SILICA Capillary Column (30 m×0.32 mm×1.0 μm)毛細(xì)管柱[6]、安捷倫公司19091J-413 HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)，采用的色譜柱以氮?dú)鉃檩d氣對(duì)本品進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果選用色譜柱為安捷倫公司19091J-413 HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)所得色譜圖的分離度最好，保留時(shí)間較合適，理論塔板數(shù)在20 000以上。

3.4 用GC測(cè)定揮發(fā)性成分是常用的分析方法

大活絡(luò)丸中麝香酮的含量測(cè)定，樣品用量少、提取方法簡便、測(cè)定快速，加樣回收率試驗(yàn)的平均值為99.23%，表明該方法可以采用。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[2] 白靜，劉鐵軍，郝鵬彬，等.GC法測(cè)定人工麝香酮含量[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2013，9(8)：27-28.

[3] 徐國兵.GC法同時(shí)測(cè)定復(fù)方麝香注射液中薄荷腦、龍腦、百秋李醇和麝香酮的含量[J].中成藥，2008，30(6)：855.

[4] 張電光，曾凡，葉雁波.氣相色譜法測(cè)定心寶丸中麝香酮的含量[J].中藥材，2008，31(8)：1261-1262.

[5] 唐洪梅，黃櫻華，李得堂，等.氣相色譜法測(cè)定人工麝香中麝香酮的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007，13(9)：4-5.

[6] 張電光，曾凡，吳冬玲.氣相色譜法測(cè)定心力丸中麝香酮的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，25(1)：31-32.

DeterminationofMusconeinDahuoluoPillsbyGC

LIZhijun1，LUDongyun2，ZHOUYuxin3，DUShushan4*

(1.HenanHonlivHospital，HenanXinxiang453400，China；2.Thefirstpeople’shospitalofXinxiang，HenanXinxiang453000，China；3.InstituteofChinesetraditionalmedicineofHenanUniversity，Henankaifeng475004，China；4.CollegeofResourcesScience&Technology，CenterforNaturalMedicineEngineeringMinistryofEducationChina，BeijingNormalUniversity，Beijing100875，China)

Objective：To establish an accurate method for the determination of muscone in Dahuoluo Pills by GC.Methods：The GC system consisted of capillary column：19091J-413 HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)，with a mobile phase consisting of N2and the flow rate was 1.0 mL·min-1，F(xiàn)ID as the detector，The inlet temperature was 250 ℃.The detect temperature was 220 ℃.Results：The linear ranges of muscone was a good linear relation within the scope in the range of 0.12-0.28 μg.The average recovery was 99.23%，RSD=2.59%.Conclusion：The method is simple and accurate，and can be used for the quality control of Dahuoluo Pills.

Dahuoluo Pills；muscone；GC；quantitative determination

2016-09-09)

*

杜樹山，副教授，研究方向：中藥及民族藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究；Tel：(010)62208032，E-mail：dushushan@bnu.edu.cn

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.3.026