竇全麗++張仁波++錢(qián)正敏++隋常玲

摘要：以革葉粗筒苣苔[Briggsia mihieri （Franch.） Craib]成熟葉片為插穗，分別用清水和50、100、150、200 mg/L的NAA、IAA、IBA溶液處理插穗，扦插于自然土∶泥炭土∶蛭石（V/V）=1∶1∶1的混合基質(zhì)中，分析不同處理對(duì)葉片插穗成活率及生根特性的影響。結(jié)果表明，革葉粗筒苣苔葉片插穗的不定芽和不定根均由愈傷組織分化產(chǎn)生，插穗的生根和生芽情況不一致，有先生根后生芽或先生芽后生根的現(xiàn)象，同一插穗上的不定芽發(fā)生時(shí)間也不一致；方差分析結(jié)果顯示，生根劑種類(lèi)、生根劑濃度及其交互作用對(duì)插穗的成活率和生根數(shù)均有顯著影響，以生根劑濃度的影響最大，但生根劑濃度對(duì)插穗平均根長(zhǎng)無(wú)顯著影響；100、150 mg/L的IAA和150 mg/L的IBA均可顯著提高插穗成活率和生根數(shù)，但僅有200 mg/L的IAA和50 mg/L的IBA可顯著提高插穗的平均根長(zhǎng)。在實(shí)際生產(chǎn)中，應(yīng)優(yōu)先考慮提高插穗的成活率，可根據(jù)實(shí)際情況選擇100、150 mg/L的IAA和150 mg/L的IBA處理插穗。

關(guān)鍵詞：革葉粗筒苣苔[Briggsia mihieri （Franch.） Craib]；葉片扦插；成活率；生根特性

中圖分類(lèi)號(hào)：Q949.778.4-61 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）16-3107-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.16.027

Rapid Propagation Test of Leaf Cuttage of Briggsia mihieri

DOU Quan-li，ZHANG Ren-bo，QIAN Zheng-min，SUI Chang-ling

（College of Biological and Agricultural Science and Technology/Key Laboratory of Regional Characteristic for Conservation and Utilization of Plant Resource in Chishui River Basin， Zunyi Normal College， Zunyi 563002， Guizhou， China）

Abstract： The cuttings of the mature leaves of Briggsia mihieri （Franch.） Craib were soaked in NAA， IAA and IBA solution at concentration of 0，50，100，150，200 mg/L and cultivated in substrates including natural soil， peat and vermiculite（1∶1∶1） to analyze the effects of different treatment on survival cuttings rate and rooting characteristics. The adventitious roots and buds of leaf cuttings were both derived from callus but at different developing processes. Some buds sprouted first while some root sprouted first. The adventitious buds sprouted at different time from the same cutting. Either 100，150 mg/L IAA or 150 mg/L IBA can significantly increase the survival rate and rooting amount. The results from multi-way ANOVA indicated that the type and concentration of rooting reagent and their interaction significantly affected the survival rate and rooting amount. The concentration of rooting reagent showed the greatest influence on the two indices but showed no significant effects on the average root length. Only 200 mg/L IAA or 50 mg/L IBA can significantly increase the average root length. It was concluded that the survival rate should be firstly considered in management； and the treatments of 100，150 mg/L IAA or 150 mg/L IBA should be also considered in the leaf cuttage of B. mihieri.

Key words： Briggsia mihieri （Franch.） Craib； leaf cuttage； survival rate； rooting characteristics

革葉粗筒苣苔[Briggsia mihieri（Franch.）Craib]為苦苣苔科（Gesneriaceae）粗筒苣苔屬（Briggsia Craib）多年生草本植物，葉片革質(zhì)，葉形狹倒卵形、倒卵形或橢圓形，頂端圓鈍，基部楔形，邊緣具波狀牙齒或小牙齒紋，聚傘花序，花冠粗筒狀，花藍(lán)紫色或淡紫色，長(zhǎng)3.2～5.0 cm，直徑1.5～2.6 cm，內(nèi)面具淡褐色斑紋，花期10月，果期11月[1]，其株形美麗，觀賞價(jià)值高，適于室內(nèi)盆栽、花壇、花境布置等方面的應(yīng)用。此外，革葉粗筒苣苔還有一定的藥用價(jià)值，全草可入藥，能治跌打損傷[1]。目前對(duì)革葉粗筒苣苔僅在苦苣苔科植物基因組大小、引種栽培和藥理等少數(shù)領(lǐng)域中有一定研究[2-5]，但對(duì)革葉粗筒苣苔的快繁研究尚未見(jiàn)報(bào)道。革葉粗筒苣苔根狀莖較短，若用于扦插，則材料較少；而葉片厚而革質(zhì)，貯藏了較多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且材料相對(duì)較多，適于扦插。因此試驗(yàn)以革葉粗筒苣苔葉片為材料，利用不同濃度的生根劑對(duì)插穗進(jìn)行預(yù)處理，篩選適合革葉粗筒苣苔扦插育苗處理?xiàng)l件，以期為革葉粗筒苣苔的引種繁殖和合理開(kāi)發(fā)利用提供參考。endprint

1 材料與方法

1.1 材料

2015年9月下旬，在貴州省習(xí)水國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)選取生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害、生長(zhǎng)較一致的革葉粗筒苣苔植株葉片作為扦插材料。生根劑有NAA、 IAA、IBA3種，由上海宇涵生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 基質(zhì) 試驗(yàn)在遵義師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院植物園苗圃?xún)?nèi)完成，所用的基質(zhì)為由自然土：泥炭土：蛭石（體積分?jǐn)?shù)）=1∶1∶1組成，用5%高錳酸鉀溶液對(duì)配好的基質(zhì)進(jìn)行消毒，7 d后倒入事先準(zhǔn)備好的花盆中，壓實(shí)平整，待用。

1.2.2 插穗處理 摘取葉色均一、無(wú)病蟲(chóng)害的革葉粗筒苣苔植株成熟葉片，洗凈，在葉片背面距葉柄上端1～3 cm處，沿葉柄上端向葉柄下端方向斜剪。

1.2.3 生根劑處理 將插穗分別放入0.2%高錳酸鉀溶液中消毒20 min，再分別用不同種類(lèi)和濃度的生根劑處理1 h。每種生根劑都設(shè)50、100、150、200 mg/L 4個(gè)濃度。插穗均以清水浸泡2 h作為對(duì)照（CK）。每處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)19片葉。

1.2.4 扦插與管理 先用小木條撬開(kāi)基質(zhì)，將待扦插葉片的葉柄插入基質(zhì)中，插后壓實(shí)，使入土葉柄與基質(zhì)充分接觸。扦插距離以葉片不能相互接觸為度。扦插完成后澆透水，并搭設(shè)拱棚，拱棚內(nèi)層覆蓋塑料薄膜，外層覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)，保持拱棚內(nèi)濕度。冬季在塑料薄膜外搭2層厚塑料膜，拱棚兩端各留一通風(fēng)口，用枝條遮蓋。

1.3 數(shù)據(jù)處理

2016年4月初，統(tǒng)計(jì)各處理插穗的成活率、平均生根數(shù)和平均根長(zhǎng)。

成活率=生根或生芽苗數(shù)/扦插數(shù)×100%。

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用Microsoft Office Excel 2007程序處理，并制表，采用SPSS 17.0軟件中一般線性模型（General Lineral Model for Univariate，GLM- Univariate）對(duì)插穗的成活率進(jìn)行單變量?jī)梢蛩胤讲罘治觥?/p>

2 結(jié)果與分析

2.1 不定根及不定芽發(fā)生特點(diǎn)

革葉粗筒苣苔葉片扦插后，不定根及不定芽的發(fā)生情況見(jiàn)圖1。從圖1可見(jiàn)，革葉粗筒苣苔葉片插穗生根型為愈傷組織生根，其過(guò)程是首先在葉柄的切口形成愈傷組織，然后愈傷組織分化形成不定根（圖1-A），試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)在皮部和葉脈生根。不定芽也是由愈傷組織分化形成的，愈傷組織生出栗褐色突起（圖1-B），隨著突起的增大，分化為內(nèi)外兩部分，外層顏色加深呈黑褐色，內(nèi)部的不定芽（紅色）逐漸增大并撐開(kāi)外層，殘留的外層仍覆蓋在葉原基處，隨著不定芽的生長(zhǎng)發(fā)育，葉原基處的外層脫落，露出紅色幼葉（圖1-C），而后展開(kāi)，呈淡紅色（圖1-D），最后下部幼葉脫落（圖1-E）；頂端紅色幼葉伸展，長(zhǎng)出葉柄，葉緣呈淺鋸齒狀，葉片逐漸變綠（圖1-D），不定芽生根（圖1-F），從而發(fā)育成一個(gè)新的植株（圖1-E）。不過(guò)此時(shí)并未與插穗脫離，并且一個(gè)插穗可形成1～4個(gè)新植株。

2.2 成活率

生根劑處理對(duì)革葉粗筒苣苔葉片插穗成活的影響情況見(jiàn)表1。從表1可見(jiàn)，革葉粗筒苣苔葉片插穗成活率最高的處理是100 mg/L的IAA，達(dá)93.86%。100、150 mg/L的IAA、50 mg/L的NAA、150 mg/L的IBA處理均比對(duì)照顯著提高了插穗的成活率（P<0.05）。而濃度為200 mg/L的3種生根劑處理均顯著降低了插穗的成活率（P<0.05）。

單變量?jī)梢蛩胤讲罘治鼋Y(jié)果表明，生根劑種類(lèi)、生根劑濃度以及生根劑種類(lèi)×生根劑濃度（兩因素交互作用）對(duì)革葉粗筒苣苔葉片插穗的成活率均有顯著影響（P<0.05）。以F值為參考，生根劑濃度對(duì)插穗成活率的影響最大（F=45.76），其次是生根劑種類(lèi)（F=10.96）。

2.3 生根數(shù)

生根劑處理對(duì)革葉粗筒苣苔葉片插穗生根的影響情況見(jiàn)表2。由表2可知，生根數(shù)最多的處理為100 mg/L 的IBA，其生根數(shù)為8.14條/株。150、200 mg/L的IAA處理和100、150、200 mg/L的IBA處理以及100、150 mg/L的NAA處理其插穗的生根數(shù)均顯著高于對(duì)照（P<0.05）；而50 mg/L的3種生根劑處理其插穗的生根數(shù)都與對(duì)照差異不顯著（P>0.05）。

單變量?jī)梢蛩胤讲罘治鼋Y(jié)果表明，生根劑種類(lèi)、生根劑濃度以及生根劑種類(lèi)×生根劑濃度對(duì)革葉粗筒苣苔葉片插穗的生根數(shù)均有顯著影響（P<0.05）。以F值為參考，生根劑濃度對(duì)插穗生根數(shù)的影響最大（F=14.62），其次是生根劑種類(lèi)（F=9.35）。

2.4 平均根長(zhǎng)

生根劑處理對(duì)革葉粗筒苣苔葉片插穗生根的平均根長(zhǎng)影響情況見(jiàn)表3。表3顯示，200 mg/L的IAA和50 mg/L的IBA處理其革葉粗筒苣苔葉片插穗的平均根長(zhǎng)均顯著高于對(duì)照（P<0.05），其他濃度的IAA和IBA處理的插穗平均根長(zhǎng)均與對(duì)照差異不顯著（P>0.05）；試驗(yàn)設(shè)置的NAA 4個(gè)濃度處理中對(duì)插穗的平均根長(zhǎng)與對(duì)照相比有3個(gè)差異不顯著（P>0.05），且高濃度的NAA會(huì)抑制插穗的平均根長(zhǎng)。

單變量?jī)梢蛩胤讲罘治鼋Y(jié)果表明，生根劑濃度對(duì)革葉粗筒苣苔葉片插穗的平均根長(zhǎng)無(wú)顯著影響（P>0.05），生根劑種類(lèi)和生根劑種類(lèi)×生根劑濃度對(duì)插穗的平均根長(zhǎng)有顯著影響（P<0.05）；以F值為參考，兩因素對(duì)插穗的平均根長(zhǎng)影響相似（F生根劑種類(lèi)=6.24，F(xiàn)生根劑種類(lèi)×生根劑濃度=6.51）。

3 討論

葉插是苦苣苔科植物扦插快繁的常用方法。劉偉等[6]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，低濃度的NAA可提高吊石苣苔（Lysionotus pauciflorus Maxim）扦插的成活率，潘春柳等[7]研究結(jié)果表明，50～200 mg/L的IAA、NAA、 IBA均可顯著提高弄崗唇柱苣苔（Chirita longgangensis W. T. Wang）葉片插穗的成活率。本試驗(yàn)中，100 mg/L的IAA處理后，革葉粗筒苣苔葉片插穗成活率最高，但對(duì)插穗生根數(shù)無(wú)顯著提高作用，150 mg/L的IAA和IBA處理其葉片插穗的成活率和生根數(shù)均顯著高于對(duì)照。鄧濤等[8]研究結(jié)果表明， 100～300 mg/L的IBA對(duì)尖萼唇柱苣苔（C. pungentisepala W. T. Wang）等5種苦苣苔科植物的根發(fā)生、不定芽發(fā)生和提前生根具有促進(jìn)作用，本試驗(yàn)結(jié)果也顯示出低濃度的IBA可促進(jìn)插穗不定根和不定芽的發(fā)生。此外，50 mg/L的NAA也可顯著提高革葉粗筒苣苔葉片插穗的成活率。endprint

在插穗平均根長(zhǎng)方面，除200 mg/L的IAA和50 mg/L的IBA處理可顯著提高平均根長(zhǎng)外，其他處理均無(wú)顯著促進(jìn)作用。另外還發(fā)現(xiàn)，革葉粗筒苣苔葉片插穗生根和生芽情況不一致，生根數(shù)多則生芽少，甚至無(wú)芽；而不定芽多，則生根數(shù)少。試驗(yàn)后期的觀察發(fā)現(xiàn)，能夠產(chǎn)生不定芽的插穗均可生根，而產(chǎn)生不定根的插穗后期也會(huì)產(chǎn)生不定芽。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，應(yīng)優(yōu)先考慮提高插穗的成活率，可根據(jù)實(shí)際情況選擇100、150 mg/L的IAA和150 mg/L的IBA來(lái)處理插穗。

潘春柳等[7]研究發(fā)現(xiàn)，合適的生根劑處理可使弄崗唇柱苣苔葉片插穗獲得較好的扦插成活率、生根效果及子株數(shù)量。本試驗(yàn)里，前期的插穗生根和生芽情況不一致，原因可能是由于革葉粗筒苣苔葉插的不定根和不定芽均由愈傷組織分化形成，兩者的發(fā)生在營(yíng)養(yǎng)供求上產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)，使得插穗出現(xiàn)先根后芽或者先芽后根的現(xiàn)象；而到試驗(yàn)后期，插穗愈傷組織和不定芽生出的不定根從基質(zhì)中吸收營(yíng)養(yǎng)后，不定根和不定芽均可正常生長(zhǎng)。試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，同一插穗上的不定芽發(fā)生時(shí)間也不一致，因統(tǒng)計(jì)結(jié)果時(shí)將所有插穗挖出，有些插穗在統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)過(guò)程中受到損傷，繼續(xù)栽植后，其不定根、不定芽生長(zhǎng)發(fā)育以及愈傷組織的分化可能受到了影響，因此在試驗(yàn)后期并未繼續(xù)統(tǒng)計(jì)插穗產(chǎn)生的不定芽數(shù)量，今后將進(jìn)一步研究影響插穗不定芽產(chǎn)生的因素、插穗不定芽和不定根發(fā)生的關(guān)系等方面內(nèi)容。

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