成洪杰，關(guān)宇昕，張 輝，崔培林

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院消化內(nèi)科，北京100050

長鏈非編碼RNA H19與消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后關(guān)系的Meta分析

成洪杰，關(guān)宇昕，張 輝，崔培林

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院消化內(nèi)科，北京100050

目的 探討長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA，lncRNA)H19與消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后之間的關(guān)系。方法 檢索PubMed、Embase、Web of Science、the Cochrane Library、萬方、維普及CNKI數(shù)據(jù)庫，收集2001年1月-2016年9月發(fā)表的所有研究lncRNA H19表達(dá)與消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后相關(guān)性的中英文文獻(xiàn)。采用Stata 12.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，通過合并納入研究的風(fēng)險(xiǎn)比(HR)及其95%CI評(píng)價(jià)H19表達(dá)與消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 共8篇文獻(xiàn)符合納入標(biāo)準(zhǔn)，總計(jì)801例患者。研究結(jié)果表明，H19高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)，患者總生存期(OS)和無病生存期(DFS)的HR值和95%CI分別為1.23(95%CI:1.05～1.45)和1.31(95%CI:1.05～1.64)(P＜0.05)。結(jié)論 lncRNA H19高表達(dá)是消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素。

消化系統(tǒng)惡性腫瘤;預(yù)后;長鏈非編碼RNA H19;Meta分析

長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA，lncRNA)是一類轉(zhuǎn)錄長度超過200 bp的不具有蛋白質(zhì)編碼功能的RNA 分子總稱［1］。近年來研究［2］證實(shí)，lncRNA可通過參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等過程影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后。H19基因是lncRNA中研究較多且與腫瘤關(guān)系密切的基因，有證據(jù)［3-10］表明，H19在多種腫瘤組織中存在高表達(dá)的現(xiàn)象，其中與肝癌、胃癌、膽囊癌、結(jié)直腸癌等消化系統(tǒng)惡性腫瘤關(guān)系較為密切。最近，有研究［11-12］表明，H19可以通過調(diào)節(jié)腫瘤新生血管形成、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化、G1/S期染色體遷移、腫瘤轉(zhuǎn)移等過程促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，表明H19可能與惡性腫瘤的預(yù)后相關(guān)。因此，為探討lncRNA H19與消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后之間的關(guān)系，我們進(jìn)行了這項(xiàng)Meta分析。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索

1.1.1 檢索策略:檢索 PubMed、Embase、Web of Science、the Cochrane Library、萬方、維普及 CNKI數(shù)據(jù)庫于2001年1月-2016年9月發(fā)表的所有研究lncRNA H19表達(dá)與消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者預(yù)后相關(guān)性的中英文文獻(xiàn)。英文檢索詞為“l(fā)ong noncoding RNA H19”、“H19”、“cancer or carcinoma”、“prognosis or prognostic”、“survival”、“outcome”、“recurrence”，中文檢索詞為“H19”、“癌”和“預(yù)后”。文獻(xiàn)檢索由2名研究人員采用自由詞與主題詞相結(jié)合的方式獨(dú)立進(jìn)行檢索。檢索策略遵循Cochrane系統(tǒng)評(píng)價(jià)手冊(cè)。

1.1.2 文獻(xiàn)納入與排除標(biāo)準(zhǔn):納入標(biāo)準(zhǔn):(1)對(duì)消化系統(tǒng)惡性腫瘤的研究(包括食管、胃、小腸、結(jié)直腸、肝臟、膽囊、膽管、胰腺部位);(2)明確指出H19定量檢測(cè)方法，并明確闡述H19高表達(dá)或低表達(dá)的界定標(biāo)準(zhǔn);(3)有關(guān)H19表達(dá)與總生存期(OS)、無病生存期(DFS)的相關(guān)研究;(4)能直接或間接獲取HR及95%CI的研究;(5)能獲取研究人群、研究地區(qū)、隨訪時(shí)間等詳細(xì)資料。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)非消化系統(tǒng)腫瘤;(2)綜述、報(bào)告類及未完整發(fā)表的研究;(3)重復(fù)發(fā)表、重復(fù)收錄或資料雷同的研究;(4)數(shù)據(jù)不完整且無法通過計(jì)算得到所需數(shù)據(jù)。

1.2 資料提取 由2名研究者按照獨(dú)立、有分歧經(jīng)商討再做決定的原則提取數(shù)據(jù)。納入研究需要提取的數(shù)據(jù)主要包括:第一作者姓名、文獻(xiàn)發(fā)表的時(shí)間、被研究者的國籍、腫瘤類型、樣本量、H19檢測(cè)方法、H19高表達(dá)或低表達(dá)水平的分界標(biāo)準(zhǔn)、觀察終點(diǎn)和指標(biāo)、隨訪時(shí)間、生存分析類型、風(fēng)險(xiǎn)比(HR)及其95%CI。

1.3 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià) 納入的原始研究均為觀察性隊(duì)列研究，由2名研究者分別按照Newcastle-Ottawa Scale(NOS)文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)量表［13］從研究人群的選擇、可比性和研究結(jié)果測(cè)量三個(gè)方面獨(dú)立地對(duì)納入的研究進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，總得分為9分，≥7分為高質(zhì)量研究。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Stata 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，對(duì)于原文獻(xiàn)未直接給出HR及95%CI而僅給出K-M生存曲線的，采用Engauge Digitizer 4.1軟件提取生存率進(jìn)而獲取 HR及95%CI［14］。H19表達(dá)與消化系統(tǒng)惡性腫瘤預(yù)后的相關(guān)性用HR及95%CI的效應(yīng)量評(píng)價(jià)，對(duì)各項(xiàng)研究的HR及95%CI進(jìn)行Meta分析合并，繪制森林圖。對(duì)納入的各項(xiàng)研究進(jìn)行齊性檢驗(yàn)，計(jì)算I2統(tǒng)計(jì)量評(píng)估各研究間的異質(zhì)性。若研究間存在異質(zhì)性，進(jìn)一步進(jìn)行亞組分析。對(duì)納入的研究進(jìn)行敏感性分析，并繪制漏斗圖(Begg’s funnel plot)描述發(fā)表偏倚。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻(xiàn)基本情況 初始檢索共得到232篇文獻(xiàn)，去除重復(fù)文獻(xiàn)并閱讀標(biāo)題排除217篇，剩余15篇，其中7篇不符合納入標(biāo)準(zhǔn)被排除，最終有8篇文獻(xiàn)納入研究，其中包括肝癌3篇、胃癌3篇、膽囊癌1篇、結(jié)直腸癌1篇，均為隊(duì)列研究，主要研究腫瘤組織中H19表達(dá)與總生存期(OS)、無病生存期(DFS)的關(guān)系。研究對(duì)象來自中國、韓國、日本3個(gè)國家，共801例患者，隨訪時(shí)間24～120個(gè)月。8篇文獻(xiàn)中NOS評(píng)分≥7分4篇，＜7分4篇。8篇文獻(xiàn)中有4篇可直接獲取HR和95%CI，4篇?jiǎng)t通過K-M生存曲線獲得(見表1)。

表1 納入研究的基本資料Tab 1 Basic data in the included studies

2.2 H19高表達(dá)與患者預(yù)后相關(guān)性 研究結(jié)果表明，H19高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)，患者OS和DFS的HR值和95%CI分別為1.23(95%CI:1.05 ～1.45)和 1.31(95%CI:1.05 ～1.64)(P ＜0.05)(見圖 1)。異質(zhì)性檢驗(yàn):I2=70.7%，P ＜0.05，提示研究間存在一定異質(zhì)性。為進(jìn)一步探討異質(zhì)性來源，按照研究對(duì)象樣本量大小、國籍和文獻(xiàn)質(zhì)量分為亞組進(jìn)行分析(見表2)。樣本量亞組中，樣本量≥100的研究組內(nèi)異質(zhì)性較高(I2=70.7%，P ＜0.05);樣本量 ＜100的研究組內(nèi)不存在異質(zhì)性(I2=27.5%，P＞0.05);樣本量≥100和＜100的亞組均顯示H19高表達(dá)提示不良預(yù)后。國籍亞組中，中國亞組與非中國亞組組內(nèi)比較，異質(zhì)性較小，提示國籍不同可能是研究間異質(zhì)性來源。文獻(xiàn)質(zhì)量亞組中，文獻(xiàn)質(zhì)量≥7的亞組組內(nèi)異質(zhì)性較高，大于總合并I2值;文獻(xiàn)質(zhì)量＜7的亞組組內(nèi)異質(zhì)性較低。

2.3 敏感性分析 每次剔除一個(gè)研究，結(jié)果并沒有明顯的改變，說明此Meta分析結(jié)果相對(duì)穩(wěn)定(見圖2)。

2.4 發(fā)表偏倚 Begg’s秩相關(guān)檢驗(yàn)顯示，不存在顯著性發(fā)表偏倚(P＞0.05，見圖3)。

圖1 納入研究森林圖Fig1 Forest plots of included studies

表2 納入研究亞組分析Tab 2 Subgroup analysis for the included studies

圖2 H19表達(dá)與OS的敏感性分析Fig 2 Sensitivity analysis of the pooled HR of H19 expression and OS

圖3 H19表達(dá)與OS漏斗圖Fig 3 Begg’s funnel plot of H19 expression and OS

3 討論

研究證實(shí)，lncRNA在多種腫瘤中存在異常表達(dá)的現(xiàn)象。H19基因位于人類染色體11p15.5，全長約2.3 kb，包含5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子，是不編碼蛋白質(zhì)的母源性印跡基因［15］。H19基因是第1個(gè)被發(fā)現(xiàn)的非編碼印記基因，以前一直被認(rèn)為是一種抑癌基因［16-17］。近年來，研究［18］表明，H19 在許多類型的腫瘤中呈高表達(dá)，且具有一定的致癌特性。已經(jīng)有許多研究［3-10］表明，H19在胃癌、肝癌、膽囊癌和結(jié)直腸癌等消化系統(tǒng)惡性腫瘤組織中呈高表達(dá)。最近，研究發(fā)現(xiàn)，H19可以通過調(diào)節(jié)腫瘤新生血管形成、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化、G1/S期染色體遷移、腫瘤轉(zhuǎn)移等過程促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，表明H19可能與惡性腫瘤的預(yù)后有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，H19高表達(dá)者在胃癌、肝癌、膽囊癌、結(jié)直腸癌等消化系統(tǒng)惡性腫瘤中預(yù)后不良，患者OS和DFS明顯縮短。H19高表達(dá)可作為一個(gè)提示預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

我們針對(duì)符合納入研究標(biāo)準(zhǔn)的8個(gè)研究進(jìn)行Meta分析，結(jié)果表明，H19高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)。我們依據(jù)樣本量、研究對(duì)象國籍、文獻(xiàn)質(zhì)量等因素進(jìn)行亞組分析，各亞組分析也證實(shí)了上述結(jié)論。異質(zhì)性來源分析發(fā)現(xiàn)，不同國籍各亞組合并的I2值均較小，提示納入研究者國籍不同可能是合并研究異質(zhì)性來源的主要原因。本研究論文發(fā)表偏倚評(píng)價(jià)的Begg’s漏斗圖圖形顯示基本對(duì)稱分布，Begg’s秩相關(guān)檢驗(yàn)不存在顯著性發(fā)表偏倚。

本研究尚存在一些不足之處:(1)在納入研究的8篇文獻(xiàn)中，其中4篇未能直接獲得HR值及95%CI，我們均通過K-M生存曲線間接獲得，這可能導(dǎo)致研究結(jié)果不精確;(2)不同研究對(duì)H19高表達(dá)的界定標(biāo)準(zhǔn)不一致，這可能是一個(gè)造成研究合并異質(zhì)性的因素;(3)本研究納入了一些小樣本和不同地域的研究，這可能會(huì)影響研究結(jié)果的可信度，同時(shí)也使研究結(jié)果適用人群受到一定程度的限制;(4)由于研究文獻(xiàn)的限制，本研究只納入了英文文獻(xiàn)，未納入中文文獻(xiàn)，可能會(huì)存在一定的偏倚;(5)本研究只納入了一部分消化系統(tǒng)的腫瘤，食管癌、胰腺癌等腫瘤因受到文獻(xiàn)限制未涉及，這可能會(huì)高估H19在預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后中的價(jià)值。因此，我們期待更多的研究來進(jìn)一步探討H19在不同類型腫瘤中的預(yù)后價(jià)值。

綜上所述，本研究提示，消化系統(tǒng)惡性腫瘤組織中H19表達(dá)上調(diào)與患者的不良預(yù)后有很大相關(guān)性。H19可作為一種新的預(yù)測(cè)因子用于消化系統(tǒng)腫瘤預(yù)后的判斷，對(duì)消化系統(tǒng)腫瘤的治療具有指導(dǎo)價(jià)值，有望成為腫瘤藥物治療的新靶點(diǎn)，但尚需進(jìn)一步前瞻性研究證實(shí)。

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(責(zé)任編輯:馬 軍)

《胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志》2016年審稿專家名單

王 帥 柏 愚 陳 煜 方秀才 房殿春 郭明洲 李瑜元 令狐恩強(qiáng) 羅和生 聶青和

田德安 吳云林 姚登福 張建中 張振書 鄭素軍 李文晰 王炳元 王全楚 李 健

王豪勛 馬 軍 陳香宇 肖 冰 吳 巍 呂農(nóng)華 陳旻湖 黃 錦 李 巖 張緒清

錢家鳴 楊盛力 袁 媛

Association between long noncoding RNA H19 and the prognosis of patients with digestive cancers:a Meta-analysis

CHENG Hongjie，GUAN Yuxin，ZHANG Hui，CUI Peilin
Department of Gastroenterology，Beijing Tiantan Hospital，Capital Medical University，Beijing 100050，China

ObjectiveTo investigate the association between long noncoding RNA(lncRNA)H19 and the prognosis of patients with digestive cancers.MethodsThe PubMed，Embase，Web of Science，the Cochrane Library，WanFang Data，VIP，and CNKI were searched to collect all articles revelant to the association between lncRNA H19 and the prognosis of patients with digestive cancers.The articles were published from Jan.2001 to Sep.2016.Hazard ratios(HR)with corresponding 95%CI were calculated and merged to evaluate the link between H19 and clinical prognosis by Stata 12.0 software.ResultsEight eligible studies with a total of 801 patients were matched to our inclusion criteria.The result showed that overexpression of H19 could predict poor overall survival(OS)and disease-free survival(DFS)in patients with cancers of digestive system，with HR of 1.23(95%CI:1.05-1.45)，and 1.31(95%CI:1.05-1.64)，respectively(P ＜0.05).ConclusionLncRNA H19 can be served as a risk factor，which predicts a poor prognosis in patients with digestive cancers.

Digestive cancers;Prognosis;Long noncoding RNA H19;Meta-analysis

R735

A

1006-5709(2017)08-0886-04

2016-10-18

10.3969/j.issn.1006-5709.2017.08.012

北京市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(7132084)

成洪杰，碩士研究生，研究方向:消化系統(tǒng)疾病的基礎(chǔ)和臨床研究。E-mail:bzyxychj@163.com

崔培林，主任醫(yī)師，教授，研究方向:消化系統(tǒng)疾病的基礎(chǔ)和臨床研究。E-mail:cuipl@aliyun.com