張震++趙玉璽++閆躍飛++皇超英++趙新芳++薛永康++閆磊

摘要：闡述了犢牛腹瀉的病因、致病機(jī)理、樣品的采集、實(shí)驗(yàn)室診斷方法與防控措施，以期對(duì)犢牛腹瀉的防控以及犢牛生產(chǎn)有指導(dǎo)意義。

關(guān)鍵詞：犢牛腹瀉；病因；機(jī)理；診斷；防控措施

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.23 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2017）08-0029-04

在阿爾及利亞開(kāi)展的流行病學(xué)研究表明，犢牛腹瀉是在每次產(chǎn)犢期后發(fā)生的，發(fā)病率、死亡率和治療以及臨床疾病造成的不良生長(zhǎng)問(wèn)題可直接導(dǎo)致重大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。據(jù)美國(guó)有關(guān)報(bào)道，在1991～2007年間，未斷奶犢牛因腹瀉死亡總數(shù)占犢牛死亡總數(shù)的50%[2]。據(jù)國(guó)內(nèi)有關(guān)報(bào)道，15日齡內(nèi)犢牛腹瀉總數(shù)占牛群腹瀉總數(shù)的80%，月平均發(fā)病率達(dá)14.10%，死亡率為8.03%[3]。

1 病因及致病機(jī)理

1.1 細(xì)菌性腹瀉

引起犢牛腹瀉的細(xì)菌主要有大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、彎曲桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌及芽孢桿菌等。大腸桿菌和沙門(mén)氏菌是引起犢牛腹瀉的主要病原菌。

1.1.1 大腸桿菌 可引起新生犢牛腹瀉最常見(jiàn)的是大腸桿菌K99+（E.coli，K99+）和熱穩(wěn)定腸毒素的腸毒素性大腸桿菌（ETEC）[4]。犢牛出生前4 d對(duì)ETEC 是極其敏感的，此時(shí)感染犢牛糞便呈水樣。

ETEC感染小腸上皮細(xì)胞并且在腸絨毛膜腸細(xì)胞中增殖，這是由于在小腸的末端部分提供了細(xì)菌生長(zhǎng)良好的環(huán)境和適宜的pH（小于6.5）。感染導(dǎo)致小腸腸絨毛萎縮和小腸固有層的損傷。大腸桿菌表達(dá)的抗原K99與細(xì)菌的吸附有關(guān)[5]。在消化道上皮細(xì)胞定繁后ETEC產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素上調(diào)，氯化物向腸道中分泌，由于滲透壓的作用水分進(jìn)入腸道，導(dǎo)致水樣腹瀉的發(fā)生。

1.1.2 沙門(mén)氏菌 腸炎沙門(mén)氏菌的鼠傷寒血清型和都柏林血清型是引起牛腹瀉的主要病原菌。沙門(mén)氏菌感染可以呈現(xiàn)一系列臨床癥狀，從無(wú)癥狀到嚴(yán)重感染。鼠傷寒沙門(mén)氏菌與嚴(yán)重的腹瀉有關(guān)而都柏林沙門(mén)氏菌與全身癥狀有關(guān)。10日齡至3周齡的犢牛易感染沙門(mén)氏菌，糞便以纖維蛋白和水樣、黏液樣帶有血液為特點(diǎn)。

沙門(mén)氏菌入侵小腸上皮細(xì)胞在巨噬細(xì)胞存活，引起腸道致病。沙門(mén)氏菌定殖于M細(xì)胞、腸細(xì)胞和扁桃體組織，淋巴組織被感染后沙門(mén)氏菌通過(guò)單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分散至全身。沙門(mén)氏菌毒力島1（SPI-1）和SPI-5影響Ⅲ型分泌系統(tǒng)，在沙門(mén)氏菌引起的犢牛腹瀉中起重要作用[6]。SPI-2與第2種Ⅲ型分泌系統(tǒng)有關(guān)，并對(duì)微生物在細(xì)胞間的生存起主要作用。

1.2 病毒性腹瀉

引起犢牛病毒性腹瀉常見(jiàn)的病原體有輪狀病毒、冠狀病毒、黏膜病毒和類(lèi)冠狀病毒，但主要由輪狀病毒和冠狀病毒引起。

1.2.1 牛輪狀病毒（BRV） BRV是引起1～2周齡犢牛腹瀉的一個(gè)重要病原。BRV屬于呼腸孤病毒科輪狀病毒屬，無(wú)囊膜，擁有11個(gè)雙鏈RNA片段（16～21 kb）。根據(jù)中等蛋白質(zhì)衣殼（VP6）的抗原和基因的相似性可以將其分為7個(gè)血清群（A～G）[7]。A群輪狀病毒是引起家養(yǎng)動(dòng)物感染的主要病原。A群輪狀病毒，基于VP4（蛋白酶敏感蛋白）的遺傳和抗原相似性類(lèi)型和VP7（糖蛋白）構(gòu)成病毒粒子的外殼誘導(dǎo)抗病毒中和抗體生產(chǎn)，可進(jìn)一步分為P型或G型。BRV多為G1型、G6型、G8型或G10型。據(jù)報(bào)道，G6和G10型在牛中普遍存在。

BRV的VP4、VP6和VP7蛋白在維持病毒結(jié)構(gòu)、吸附、抗原性起重要作用。非結(jié)構(gòu)蛋白4（NSP4）起病毒腸毒素作用，NPS4通過(guò)提高Ca2+進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)的濃度來(lái)干擾細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)[8]。加快了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和水通過(guò)小腸上皮細(xì)胞的速度。BRV在小腸絨毛上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中復(fù)制導(dǎo)致絨毛成熟腸細(xì)胞的破壞，受損細(xì)胞的血管活性成分激活腸神經(jīng)系統(tǒng)，分泌病毒性腸毒素（NSP4）。NSP4會(huì)加劇輪狀病毒感染引起的消化不良、吸收不良腹瀉。病毒感染通常會(huì)影響到小腸的基底部，并引起腸絨毛的萎縮。

1.2.2 牛冠狀病毒（BCoV） BCoV是有囊膜的單股正鏈RNA病毒（大小為27～32 kb），病原體屬于乙型冠狀病毒屬（乙型冠狀病毒1型），以前被歸為冠狀病毒屬2a群。BCoV感染牛只后呈現(xiàn)3種明顯的臨床癥狀（a，b，c），a引起1～2周齡犢牛腹瀉；b成年牛冬季出血性痢疾；c引起犢牛和成年牛呼吸道疾病[9]。

病毒的纖突蛋白（S）除了有中和抗體作用，在病毒的入侵和致病機(jī)理中起著重要的作用[10]。S蛋白包含S1和S2兩個(gè)亞基，在病毒—宿主相互作用過(guò)程中起重要作用，S1可以與病毒宿主細(xì)胞受體結(jié)合，S2可以使病毒的囊膜與宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜相互融合[11]。病毒感染始于小腸，通過(guò)整個(gè)小腸和結(jié)腸傳播。通過(guò)顯微鏡可以觀察到，受影響的小腸絨毛和結(jié)腸隱窩變得萎縮，固有層壞死。最初，S蛋白和病毒附著血凝素—酯酶（HE）蛋白融合到腸上皮細(xì)胞。病毒在腸細(xì)胞中復(fù)制，子代病毒通過(guò)正常的分泌機(jī)制和細(xì)胞裂解作用釋放出來(lái)，成熟的腸道絨毛上皮細(xì)胞是病毒的目標(biāo)，但是隱窩腸道細(xì)胞也受到破壞，所以動(dòng)物的臨床癥狀會(huì)持續(xù)較長(zhǎng)一段時(shí)間。

1.3 原蟲(chóng)

微小隱孢子蟲(chóng)是一種原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)，與人和動(dòng)物胃腸道疾病有關(guān)。犢牛感染隱孢子蟲(chóng)有的沒(méi)有臨床癥狀，有的則為嚴(yán)重的腹瀉并伴有脫水癥狀。隱孢子蟲(chóng)大約有24種，犢牛易感染微小隱孢子蟲(chóng)、牛隱孢子蟲(chóng)、賴氏隱孢子蟲(chóng)和安德森隱孢子蟲(chóng)。微小隱孢子蟲(chóng)被認(rèn)為是犢牛腹瀉的重要病原，并且是潛在人獸共患病的病原體[12]。

微小隱孢子蟲(chóng)經(jīng)口傳染犢牛后，卵囊通過(guò)脫囊作用釋放孢子體滲透腸細(xì)胞。脫囊的微小隱孢子蟲(chóng)通過(guò)無(wú)性生殖產(chǎn)生大配子體并通過(guò)有性生殖來(lái)產(chǎn)生小配子體。小配子體使大配子體受精后產(chǎn)生可以自體感染的薄壁卵囊，隨后被宿主排出體外。薄壁卵囊在不良的環(huán)境條件下（如高溫、低水分、紫外線輻射）能存活一個(gè)月。對(duì)大多數(shù)的消毒液有抵抗力[13]。

微小隱孢子蟲(chóng)入侵腸細(xì)胞誘導(dǎo)腸細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的變化，造成腸道微絨毛萎縮和柱狀上皮細(xì)胞的縮短[14]。對(duì)腸道的損傷會(huì)導(dǎo)致?tīng)倥I(yíng)養(yǎng)吸收不良，會(huì)引起長(zhǎng)期的營(yíng)養(yǎng)不良，導(dǎo)致感染的牛只生長(zhǎng)率下降，給奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)造成巨大的損失。endprint