沈黎

（安徽省阜陽市食品藥品稽查支隊(duì)，安徽 阜陽 236000）

·實(shí)驗(yàn)研究·

醋蒸五味子高效液相色譜特征指紋圖譜研究

沈黎

（安徽省阜陽市食品藥品稽查支隊(duì)，安徽 阜陽 236000）

目的 建立醋蒸五味子高效液相色譜(HPLC)特征指紋圖譜分析方法。方法 采用賽默飛Hypersil GOLD色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 m），流動(dòng)相為甲醇－水，梯度洗脫，流速為1.0 mL／min，檢測(cè)波長(zhǎng)為250 nm。在此條件下，繪制并分析不同來源10批醋蒸五味子的特征指紋圖譜。結(jié)果 10批醋蒸五味子有8個(gè)共有峰，其HPLC指紋圖譜基本一致，但共有峰面積的比值有一定差異。結(jié)論 通過HPLC法建立了醋蒸五味子的指紋圖譜分析方法，該方法穩(wěn)定、可靠，重復(fù)性好，為醋蒸五味子的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了科學(xué)依據(jù)。

醋蒸五味子；高效液相色譜法；特征指紋圖譜

醋蒸五味子為木蘭科植物五味子[1]Schisandra chinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果實(shí)的炮制品，具有收斂固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心功效，可用于治療久嗽虛喘、夢(mèng)遺滑精、遺尿尿頻、久瀉不止、自汗盜汗、津傷口渴、內(nèi)熱消渴、心悸失眠等。五味子主要含木脂素、三萜、揮發(fā)油及有機(jī)酸等化學(xué)成分，其中針對(duì)木脂素和三萜[2－4]的研究最多。醋蒸五味子的主要成分為五味子醇甲[5]，其檢測(cè)專屬性較強(qiáng)。五味子指紋圖譜文獻(xiàn)報(bào)道較多[6－12]，但未見醋蒸五味子指紋圖譜相關(guān)文獻(xiàn)。本研究中采用高效液相色譜法，以五味子醇甲為參照指標(biāo)，對(duì)10批不同來源的醋蒸五味子進(jìn)行指紋圖譜研究，并對(duì)其相似度進(jìn)行比較，從而為醋蒸五味子的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Ultimate3000型高效液相色譜儀（美國賽默飛公司）；AP205型天平（瑞士梅特勒公司，精度0.01 mg），電子分析天平（德國賽多利斯公司，精度0.1 mg）；超聲波清洗器（Elam公司）。超純水（PURELAB Ultra公司）。

五味子醇甲對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)為110726－201516，純度為99.9%）；甲醇為色譜級(jí)；其他試劑為分析純。試驗(yàn)用醋蒸五味子藥材由安徽阜陽萬生中藥飲片廠提供，編號(hào)分別為CWWZ－01－01至CWWZ－01－10，收集時(shí)間均為2016年10月，產(chǎn)地分別為遼寧、遼寧、吉林、遼寧、黑龍江、黑龍江、吉林、遼寧、遼寧、黑龍江。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：賽默飛Hypersil GOLD色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：A為甲醇，B為水，梯度洗脫(0～6 min時(shí) A為 30%～65%，6～30 min時(shí) A為65%，30～50 min時(shí)A為65% ～90%，50～60 min時(shí)A為90%)；流速：1.0 mL／min；柱溫：35.0℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2 溶液的制備

對(duì)照品溶液：稱取五味子醇甲對(duì)照品12.98 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制成每1 mL約含0.12 mg的對(duì)照品溶液。

供試品溶液：取本品粉末（過3號(hào)篩）約0.25 g，精密稱定，置20 mL容量瓶中，加甲醇約18 mL，超聲處理（功率250 W，頻率20 kHz）20 min，取出，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 方法學(xué)考察

取3號(hào)樣品6份，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)樣，測(cè)定供試品溶液中各色譜峰的保留時(shí)間，記錄色譜圖。結(jié)果表明，各主要色譜峰相對(duì)保留時(shí)間和其相對(duì)峰面積無明顯變化，以S號(hào)峰為內(nèi)標(biāo)峰，其 RSD分別為0.4%和0.2%。

取3號(hào)樣品6份，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)樣，測(cè)定供試品溶液中各色譜峰的保留時(shí)間，記錄色譜圖；并每隔一定時(shí)間測(cè)定1次峰面積積分值，直至24 h。結(jié)果表明，各主要色譜峰相對(duì)保留時(shí)間和其相對(duì)峰面積無明顯變化，以S號(hào)峰為內(nèi)標(biāo)峰，其 RSD分別為0.3%和0.1%。

圖1 醋蒸五味子的指紋圖譜

2.4 指紋圖譜的建立

2.4.1 共有峰的確定

取收集到的10批醋蒸五味子，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，10批樣品測(cè)定所得到的色譜圖，以1號(hào)樣品為參照模板分析處理。結(jié)果見圖1，共8個(gè)共有峰。10批醋蒸五味子樣品的色譜指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的指紋圖譜的相似度均在0.9以上，符合指紋圖譜研究的技術(shù)要求。

2.4.2 對(duì)照特征圖譜的建立

取醋蒸五味子1－10號(hào)樣品，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件進(jìn)行分析，即得醋蒸五味子的對(duì)照特征圖譜。結(jié)果見圖2。

圖2 醋蒸五味子對(duì)照特征圖譜（其中S峰為五味子醇甲）

3 討論

五味子是我國長(zhǎng)期使用的補(bǔ)益類中藥，其所含的木脂素類成分具有抗肝臟損傷、抗氧化作用，木脂素類成分與五味子質(zhì)量息息相關(guān)。本研究中發(fā)現(xiàn)，不同批次醋蒸五味子的特征共有峰相對(duì)保留時(shí)間基本一致，但其相對(duì)峰面積存在一定差異，說明各地區(qū)收集的五味子所含化學(xué)成分基本相同，但含量有一定差異。本試驗(yàn)以專屬性較強(qiáng)的五味子醇甲為參照指標(biāo)，建立了醋蒸五味子的指紋特征圖譜，為后續(xù)醋蒸五味子的質(zhì)量控制研究提供了一定的依據(jù)。

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HPLC Characteristic Fingerprint of Schisandra Chinensis Stir－Baked with Vinegar

Shen Li
（Fuyang Food and Drug Inspection Detachment，F(xiàn)uyang，Anhui，China 236000）

Objective To establish an HPLC characteristic fingerprintmethod for Schisandra Chinensisstir－baked with vinegar.M ethods Thermo Fisher Hypersil GOLD column（250 mm×4.6 mm，5 μm）was adopted，the mobile phase was methanol water with gradient elution，the flow rate was 1.0 mL／min，the detection wavelength was 250 nm.Under these conditions，the characteristic fingerprints of 10 batches ofSchisandra Chinensis stir－baked with vinegar were drawn and analyzed.Results 10 batches ofSchisandra Chinensis stir－baked with vinegar had a total of 8 peaks，the HPLC characteristic fingerprints were basically the same，but the ratios of the total peak area had some differences.Conclusion The method of characteristic fingerprint of Schisandra Chinensis stir－baked with vinegar is established by HPLC.The method is stable，reliable and reproducible，which can provide scientific basis for the quality evaluation of Schisandra Chinensis stir－baked with vinegar.

Schisandra Chinensis stir－baked with vinegar；HPLC；characteristic fingerprint

R284.1

A

1006－4931(2017)16－0013－02

2017－02－08)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.16.004

沈黎，大學(xué)本科，主管藥師，主要從事食品藥品稽查和檢驗(yàn)工作，(電話)0558－2183021(電子信箱)244125604＠qq.com。