邱娟

（陜西理工大學(xué)體育學(xué)院，陜西漢中723000）

白靈菇多糖對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)大鼠抗疲勞和抗氧化作用研究

邱娟

（陜西理工大學(xué)體育學(xué)院，陜西漢中723000）

經(jīng)測(cè)定對(duì)照組大鼠、運(yùn)動(dòng)疲勞大鼠與力竭運(yùn)動(dòng)休息12 h后大鼠肝組織和線粒體相關(guān)指標(biāo)，研究白靈菇多糖對(duì)機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力及抗疲勞和提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)后恢復(fù)能力的影響。取100只Wistar雄性大鼠，將其分為5組：對(duì)照組（A）、力竭組（B）、力竭休息組（C）、白靈菇多糖力竭組（D）、白靈菇多糖力竭休息組（E）。根據(jù)試驗(yàn)要求，使5組大鼠做30 d跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，D、E每天按一定劑量服用白靈菇多糖，末次運(yùn)動(dòng)后，將A組于安靜情況下處死，檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)；使另外4組做劇烈運(yùn)動(dòng)后力竭，將B、D組處死測(cè)相關(guān)指標(biāo)；使C、E組大鼠休息12 h后，處死測(cè)指標(biāo)。結(jié)果表明：大鼠經(jīng)灌胃白靈菇多糖后，GSH-Px（谷胱甘肽過(guò)氧化物酶）活力、SOD活力和-SH含量顯著上升，MDA（丙二醛）含量明顯下降。說(shuō)明白靈菇多糖能夠增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。休息12 h后，NOS（一氧化氮合酶）能力、NO（一氧化氮）含量指標(biāo)同運(yùn)動(dòng)前指標(biāo)一致，由此可知服用白靈菇多糖能夠增強(qiáng)機(jī)體的恢復(fù)能力，抗疲勞能力增強(qiáng)。灌胃白靈菇多糖可加強(qiáng)大鼠的抗疲勞能力和抗氧化功能，增強(qiáng)大鼠運(yùn)動(dòng)能力，提高運(yùn)動(dòng)疲勞后恢復(fù)能力。

白靈菇多糖；抗疲勞；抗氧化

白靈菇（Pleurotus nebrodensis）又名阿魏蘑、阿魏側(cè)耳、阿魏菇，其口感細(xì)嫩，味道可口，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，被稱為“草原上的牛肝菌”，廣受人們歡迎。白靈菇在真菌界具有盛名，因其含有重要的活性因子，有藥理功能[1-3]。研究表明，白靈菇多糖是從白靈菇中浸提的含有極高價(jià)值的活性成分，生理活性強(qiáng)，具有降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)血脂等功效[4-5]。白靈菇還具有藥用價(jià)值，有研究表明其具有消炎、止咳、預(yù)防腫瘤等功效。運(yùn)動(dòng)學(xué)專家指出，大量的力竭訓(xùn)練不僅對(duì)身體沒(méi)有積極作用，還會(huì)產(chǎn)生大量的自由基影響機(jī)體，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體某些功能產(chǎn)生障礙，線粒體能力減弱，呼吸急促，導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生疲勞速度加快，若不清理自由基，會(huì)使運(yùn)動(dòng)能力下降，影響機(jī)體正?；顒?dòng)[6-8]。本文旨在測(cè)定正常大鼠、運(yùn)動(dòng)疲勞后大鼠以及力竭休息后大鼠肝組織和線粒體，研究白靈菇多糖對(duì)大鼠抗疲勞，增強(qiáng)機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力和提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)后恢復(fù)能力的影響，對(duì)白靈菇運(yùn)動(dòng)保健產(chǎn)品開(kāi)發(fā)有一定參考價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

健康Wistar雄性大鼠100只，質(zhì)量為140 g～160 g，購(gòu)自吉林大學(xué)動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK-（吉）2016-0003，自由飲水、攝食，自然光照適應(yīng)性喂養(yǎng)。

白靈菇：蘭考金菇園食品有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、巰基-SH、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）、鈣鎂離子三磷酸腺苷酶（Ca2+/Mg2+-ATPase）、鈉鉀離子三磷酸腺苷酶（Na+/K+-ATPase）試劑盒：南通戴爾諾斯生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

RE型蒸發(fā)器：上海鷹迪儀器設(shè)備有限公司；UV7502PCS型分光光度計(jì)：上?？茣钥茖W(xué)儀器有限公司；TD型離心機(jī)：常州市偉嘉儀器制造有限公司；GM-33A型真空抽濾泵：天津市美飛科技有限公司；HH-4型恒溫水浴鍋：常州市萬(wàn)合儀器制造有限公司。

1.3 方法

1.3.1 白靈菇多糖的制備

按規(guī)定量稱取白靈菇子實(shí)體，進(jìn)行清洗，于40℃烘干，粉碎至160目，利用濃度為95%的乙醇對(duì)其脫脂，加入純凈水，100℃下浸提2 h，過(guò)濾，濃縮。然后加入乙醇置于4℃的冰箱使多糖沉淀，離心30 min，采用Sevage法除蛋白質(zhì)，進(jìn)行濃縮并凍干，待用[9-11]。

1.3.2 動(dòng)物分組

取Wistar雄性大鼠，將其隨機(jī)分成5組，每組20只：模型組（A）、力竭組（B）、力竭休息組（C）、白靈菇多糖力竭組（D）、白靈菇多糖力竭休息組（E）。白靈菇多糖組每天服用多糖水溶液80 mg/d，A、B、C組分別灌胃生理鹽水，連續(xù)灌胃30 d，末次灌胃30 min后檢測(cè)。

1.3.3 運(yùn)動(dòng)模型的建立

隨機(jī)抽取大鼠，使其做30 d跑臺(tái)訓(xùn)練，根據(jù)Bedford模型進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練（見(jiàn)表1），首先，應(yīng)先進(jìn)行準(zhǔn)備活動(dòng)，速度為15 m/min。按照規(guī)定對(duì)大鼠灌胃生理鹽水和白靈菇多糖80 mg/kg·體重。30 d后，將A組于安靜時(shí)處死，做為對(duì)照組；B、D組大鼠運(yùn)動(dòng)至力竭并處死，作為對(duì)照；C、E組力竭并恢復(fù)12 h后處死[12-14]。

表1 大鼠運(yùn)動(dòng)方案Table 1 Rats exercise program

1.3.4 樣品的制取

大鼠進(jìn)行處死前必須禁止飲食，時(shí)間為8 h，被處理后，大鼠應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，取適量肝組織于燒杯中，進(jìn)行破碎，得到肝勻漿，并于溫度4℃、轉(zhuǎn)速2 000 r/min的條件下離心20 min，除去沉淀部分，再次對(duì)上清液進(jìn)行處理，離心速度3 000 r/min，時(shí)間20 min，得到沉淀為肝組織，應(yīng)用超聲波儀器進(jìn)行破碎處理，待用[15-16]。

1.3.5 指標(biāo)的測(cè)定

力竭時(shí)間的測(cè)定應(yīng)從運(yùn)動(dòng)開(kāi)始計(jì)算時(shí)間，直至力竭所用的全部時(shí)間。判斷是否力竭應(yīng)觀察大鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)，速度降低，臀部在籠體后壁，后肢體隨皮帶自然轉(zhuǎn)動(dòng)達(dá)30 s，利用電刺激方法沒(méi)有效果，可判斷為力竭。GSH-Px、NOS、-SH、MDA、NO、SOD、Ca2+/Mg2+-ATPase、Na+/K+-ATPase的測(cè)定均參照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，通過(guò)SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其中P≤0.05代表有顯著性差異，P≤0.01為具有極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 白靈菇多糖對(duì)大鼠抗氧化能力的影響

白靈菇多糖對(duì)大鼠抗氧化能力的影響結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠肝組織抗氧化能力的比較（，n＝20）Table 2 Antioxidant capacity of hepatic tissue in the rats from each group（，n=20）

表2 各組大鼠肝組織抗氧化能力的比較（，n＝20）Table 2 Antioxidant capacity of hepatic tissue in the rats from each group（，n=20）

注：a.同A 組相比，差異顯著（P＜0.05）；b.同 B組相比，差異顯著（P＜0.05）；c.同 C 組相比，差異顯著（P＜0.05）；d.同 D 組相比，差異顯著（P＜0.05）。

組別 -SH含量/（μmol/g）SOD活力/（U/mL）A 92.45±7.43 1.64±0.13 116.14±10.98 365.09±12.09 B 64.75±7.42a 6.08±0.25a 80.23±9.76a 224.76±15.09aC 72.34±5.32a 5.54±0.26a 86.53±9.09a 242.54±17.25aD 81.87±7.64b 4.63±0.22b 109.34±9.32b 286.74±18.17bE 88.01±7.41bc 3.17±0.14bcd 144.76±9.45bc315.35±19.23bcMDA含量/（nmol/mL）GSH-Px活力/（U/mL）

SOD和GSH-Px是非常重要的抗氧化酶類，具有清除機(jī)體內(nèi)自由基的作用。-SH作為體內(nèi)重要物質(zhì)，能夠維持機(jī)體活力，并能夠有效地防止自由基對(duì)機(jī)體的破壞。MDA含量的大小能夠表示出機(jī)體內(nèi)物質(zhì)被氧化程度。根據(jù)表2可知，大鼠運(yùn)動(dòng)力竭后，B組肝組織中GSH-Px活力、SOD活力和-SH含量顯著比A組低（P＜0.05），MDA含量顯著比A組高（P＜0.05）。C組肝組織中GSH-Px活力、SOD活力和-SH含量同樣也比A組低（P＜0.05），MDA 含量比 A 組高（P＜0.05）。根據(jù) D組試驗(yàn)結(jié)果，同B比較，各項(xiàng)指標(biāo)有明顯恢復(fù)，但比對(duì)照組略差，E組抗氧化指標(biāo)要比B、C組有顯著提高，與對(duì)照組相當(dāng)。故由結(jié)果可知，白靈菇多糖能夠增強(qiáng)肝組織抗氧化能力，并能加快運(yùn)動(dòng)疲勞后的恢復(fù)。

2.2 白靈菇多糖對(duì)大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響

白靈菇多糖對(duì)大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠肝組織NO-NOS和肝線粒體ATPase活性的比較（，n＝20）Table 3 NO-NOS in hepatic tissue and ATPase activity in hepaticmitochondria of rats（，n=20）

表3 各組大鼠肝組織NO-NOS和肝線粒體ATPase活性的比較（，n＝20）Table 3 NO-NOS in hepatic tissue and ATPase activity in hepaticmitochondria of rats（，n=20）

注：a.同A組相比，差異顯著（P＜0.05）；b.同 B 組相比，差異顯著（P＜0.05）；c.同 C 組相比，差異顯著（P＜0.05）；d.同 D 組相比，差異顯著（P＜0.05）。

組別 Na+/K+-ATPase活力/（U/mg）NOS活力/（U/mg）A 88.46±6.76 73.54±5.47 0.95±0.02 1.57±0.24 B 61.92±7.87a 62.32±6.35a 0.36±0.04a 0.87±0.23aC 69.58±6.44a 70.64±6.31a 0.37±0.02a 1.43±0.09aD 75.56±6.44ab 79.57±6.54ab 0.76±0.05a 1.65±0.34aE 87.56±5.34bcd 87.56±4.46bcd 0.95±0.04bcd1.98±0.15bcdCa2+/Mg2+-ATPase活力/（U/mg）NO含量/（μmol/g）

NO能夠加強(qiáng)機(jī)體內(nèi)血管的舒張能力，改善機(jī)體組織代謝，可加強(qiáng)體內(nèi)物質(zhì)的輸送能力。由表3可得出，大鼠力竭后，肝組織NOS活力及NO含量、肝線粒體活力顯著下降；休息12 h，肝組織中NOS活力及NO含量、肝線粒體活力加強(qiáng)，但仍不能恢復(fù)原始狀態(tài)。服用白靈菇多糖大鼠力竭后，肝組織中NOS活力及NO含量、線粒體Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力與A 比較要低（P＜0.05），比 B 組高（P＜0.05）；休息 12 h后，肝組織中NOS活力、NO含量和線粒體指標(biāo)達(dá)到A組水平，和B組相比顯著升高（P＜0.01），和C、D組相比顯著升高（P＜0.05）。因此，白靈菇多糖可提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力，同時(shí)能夠加強(qiáng)對(duì)機(jī)體運(yùn)動(dòng)后的恢復(fù)能力。

2.3 白靈菇多糖對(duì)耐力訓(xùn)練大鼠跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)力竭時(shí)間的影響

白靈菇多糖對(duì)耐力訓(xùn)練大鼠跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)力竭時(shí)間的影響結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 大鼠力竭時(shí)間比較（，n＝20）Table 4 Rats exhaustive time（，n=20）

表4 大鼠力竭時(shí)間比較（，n＝20）Table 4 Rats exhaustive time（，n=20）

注：#.D組與B組比較，差異顯著（P＜0.05）。

組別 力竭時(shí)間/min 力竭時(shí)間延長(zhǎng)度/%B 76.54±12.54 D 96.69±11.04# 24.00

根據(jù)表4可知，白靈菇多糖力竭組D組服用白靈菇多糖大鼠運(yùn)動(dòng)后力竭時(shí)間顯著比力竭組B組高，力竭時(shí)間延長(zhǎng)24%，差異顯著（P＜0.05）。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果，大鼠灌胃白靈菇多糖后力竭時(shí)間顯著延長(zhǎng)，因此得出白靈菇多糖能夠增強(qiáng)機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力，延遲運(yùn)動(dòng)疲勞，能夠延長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)時(shí)間。

3 結(jié)論

根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果可得，大鼠灌胃白靈菇多糖后，GSH-Px活力、SOD活力和-SH含量有顯著提高，MDA含量顯著下降，因此，白靈菇多糖可增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。肝組織線粒體Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力顯著增強(qiáng)；恢復(fù)12 h后，肝組織中NOS活力、NO含量恢復(fù)原指標(biāo)，可知白靈菇多糖能夠加強(qiáng)機(jī)體的恢復(fù)能力。灌胃白靈菇多糖后大鼠力竭時(shí)間顯著延長(zhǎng)，說(shuō)明白靈菇多糖具有延緩疲勞，延長(zhǎng)機(jī)體運(yùn)動(dòng)時(shí)間的功能。

[1]盛偉,方曉陽(yáng),吳萍.白靈菇、杏鮑菇、阿魏菇多糖體外抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技,2008(5)：103-105,109

[2]馬淑鳳,陳利梅,徐化能,等.白靈菇胞外多糖的分離純化及其抗氧化活性的研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010(1)：157-162

[3]馬淑鳳,王利強(qiáng),胡志超,等.酶法提取白靈菇深層發(fā)酵菌絲體多糖的研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),2006(9)：198-201

[4]馬淑鳳,陳利梅,徐化能,等.白靈菇多糖的分離純化及清除自由基研究[J].食品科學(xué),2009(19)：109-113

[5]孫靈慧,錢珍,劉曉宇.白靈菇和紅椎菌的成分分析研究[J].食品科技,2009(11)：101-104

[6]李正鵬,吳萍.白靈菇胞外多糖抗氧化活性研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2009(10)：85-88

[7]李靖,陳偉,程芳,等.靈芝-白靈菇酸奶配方的優(yōu)化及其營(yíng)養(yǎng)成分分析[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2012(6)：122-127

[8]胡順珍,許梅,賈樂(lè).白靈菇產(chǎn)胞外多糖液體培養(yǎng)條件優(yōu)化[J].食品工業(yè)科技,2007(7)：76-78,81

[9]梁艷麗,李榮春,張?zhí)?白靈菇在貯藏過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分的動(dòng)態(tài)變化[J].中國(guó)食用菌,2005(2)：54-56

[10]Venturella Giuseppe,Zervakis Georgios I,Polemis Elias,et al.Taxonomic Identity,Geographic Distribution,and Commercial Exploitation of the Culinary-Medicinal Mushroom Pleurotus nebrodensis(Basidiomycetes).[J].International journal of medicinal mushrooms,2016,18(1)：114-119

[11]Yuan Xianghe,Tian Guoting,Zhao Yongchang,et al.Degradation of dyes using crude extract and a thermostable and pH-stable laccase isolated from Pleurotus nebrodensis[J].Bioscience reports,2016,36(4)：453-458

[12]Changlu Wang,Haiyan Cui,Yurong Wang,et al.Bidirectional Immunomodulatory Activities of Polysaccharides Purified From Pleurotus nebrodensis[J].Inflammation,2014,37(1)：34-37

[13]Lv Hui,Kong Yang,Yao Qing,et al.Nebrodeolysin,a novel hemolytic protein from mushroom Pleurotus nebrodensis with apoptosis-inducing and anti-HIV-1 effects.[J].Phytomedicine,2008,16(2)：69-74

[14]崔建梅,蘇曉云,王昕,等.自愿轉(zhuǎn)輪運(yùn)動(dòng)對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)、腦組織神經(jīng)Y肽及中央杏仁核一氧化氮合酶表達(dá)的影響[J].體育科學(xué),2014(5)：15-22

[15]羅先欽,徐曉玉,黃崇剛,等.決明子總蒽醌對(duì)酒精性脂肪肝大鼠肝組織脂質(zhì)過(guò)氧化與PPAR-γ表達(dá)的影響[J].中國(guó)中藥雜志,2011(12)：1654-1659

[16]楊欽河,謝芳,王鳳珍,等.不同治法方藥對(duì)脂肪肝大鼠肝組織NF-κBp65及Kupffer細(xì)胞p38MAPK蛋白表達(dá)的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009(2)：141-147

Effects of Pleurotus nebrodensis Polysaccharides on Exhausting Exercise Rats Anti-fatigue and Antioxidant

QIU Juan
（The Institute of Physical Education of Shaanxi University of Science and Technology，Hanzhong 723000，Shaanxi，China）

To study the effects of Pleurotus nebrodensis polysaccharide on the exercise capacity and anti-fatigue of rats and the recovery of body movement after 12 hours of exhaustive exercise in rats.100 male Wistar rats were divided into five groups：control group （A），exhaustive group （B），exhaustive resting group（C），Pleurotus nebrodensis polysaccharide exhausted group （D），white Pleurotus nebrodensis polysaccharide exhaustion resting group （E）.According to the test requirements，5 groups of rats were subjected to 30 days of treadmill exercise.D and E were given Pleurotus nebrodensis polysaccharide every day.After the last exercise，the rats in group A were sacrificed and the related indexes were detected.The rats in group C and group E were sacrificed 12 hours after the operation，and the rats were sacrificed.The results showed that：GSH-Px activity，SOD activity and-SH content were significantly increased and the content of MDA decreased significantly after administration of Pleurotus nebrodensis polysaccharide.Indicating that Pleurotus nebrodensis polysaccharidecan enhance the body's antioxidant capacity.After 12 h of rest，NOS and NO content were consistent with the pre-exercise indexes,which indicated that the polysaccharides of Pleurotus nebrodensis could enhance the recovery ability of the body and enhance the anti-fatigue ability.Pleurotus nebrodensis polysaccharide can strengthen the anti-fatigue and anti-oxidant function of rats，enhance the athletic ability and improve the recovery ability after exercise fatigue.

Pleurotus nebrodensis polysaccharide；anti-fatigue；anti-oxidation

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.17.040

2016-11-16

邱娟（1976—），女（漢），講師，研究生，研究方向：體育教育訓(xùn)練。