陳 笑,周 策,孫雪慧,魏 健

(長春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，吉林長春130032)

寒蔥快繁體系的條件優(yōu)化

陳 笑,周 策,孫雪慧,魏 健

(長春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，吉林長春130032)

為了更加準(zhǔn)確地獲得寒蔥優(yōu)良快繁體系的組培條件，培育出更多的寒蔥幼苗，實(shí)現(xiàn)寒蔥的準(zhǔn)確快繁，提升質(zhì)量和產(chǎn)量,本實(shí)驗(yàn)以寒蔥的莖塊為試材，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，研究不同激素濃度對寒蔥培育的影響，為寒蔥快繁體系的優(yōu)化奠定理論基礎(chǔ)。

寒蔥；快速繁殖；激素濃度

寒蔥學(xué)名茗蔥，屬百合科，為多年生草本植物。它的根須較多，形狀近圓柱或圓錐形?；ㄐ虺手绷?，傘形花序,球狀[1]，數(shù)目多且分布較均勻；小花柄大多等長；花呈白色或淡紫色，外花被比較狹長且較短，內(nèi)花被比較寬且較長[1-3]。寒蔥質(zhì)軟且平滑，不耐高溫，但具有較強(qiáng)的抗寒能力，所以大多數(shù)寒蔥都生長在林下、陰濕的山坡、林間的草甸或溝邊[2]。寒蔥因生長在大寒蔥頂和小寒蔥頂，故得此名，主要分布于吉林省境內(nèi)的東豐縣境內(nèi)。寒蔥也抽薹開花，花薹和韭菜相似，生吃的味道也與韭菜相似，但多了幾分甘甜和蔥味。寒蔥還有許多優(yōu)良的品質(zhì)，如耐寒性[4]、抗病性、豐產(chǎn)性和耐貯存等。本實(shí)驗(yàn)以寒蔥的莖塊為試材[5]，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，研究不同激素濃度對寒蔥培育的影響，從而為寒蔥快繁體系的優(yōu)化奠定相關(guān)的理論依據(jù)與技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料

選擇生長在東豐縣寒蔥頂寒蔥的莖塊作為本次實(shí)驗(yàn)的外植體。

1.1.2 試劑

MS粉、蔗糖、瓊脂、升汞、肌醇、6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)、蔡乙酸(NAA)等均購自長春百金生物科技有限公司，為分析純。

1.1.3 器材

超凈工作臺(北京東聯(lián))、電子天平(Scout SE，江蘇奧豪斯)、微型離心機(jī)(Mini-7k，杭州奧盛)、超高速冷凍離心機(jī)(5424R，美國Thermo)、電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海一恒)、培養(yǎng)皿、刻度搪瓷杯、細(xì)菌過濾器、天平、牛角匙、pH試紙、漏斗、量筒、漏斗架、玻璃珠、三角瓶、手術(shù)刀、玻璃棒、鑷子、試管、吸管、防水紙、標(biāo)簽、棉花等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基配制

以MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，配置方法如下：

MS培養(yǎng)基：MS粉4.33 g，肌醇5 mL，蔗糖10 g，有機(jī)物質(zhì)(VB10.04 g，VB60.05 g，甘氨酸0.2 g，煙酸0.05 g，定容至500 mL)5 mL，加入適量去離子水，用HCl或NaOH調(diào)整pH在5.8～6.0之間，再加入7.5 g瓊脂粉，去離子水定容至1 L，高溫滅菌。

分化培養(yǎng)基：以MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，依次加入不同濃度的6-BA，觀察愈傷組織和叢生芽的生長的情況。

生根培養(yǎng)基：以MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，依次加入不同濃度的NAA，觀察寒蔥根生長情況。

1.2.2 外植體的消毒

去除寒蔥的葉片，剪取具有腋芽部位的莖塊。用含洗潔精的水溶液沖洗4～5次，后用自來水清洗15分鐘左右，清洗干凈后，把試驗(yàn)所用的莖塊片段放入70%的酒精中，浸泡30秒后放入配好的升汞溶液滅菌5～10分鐘后，使用無菌水反復(fù)將莖塊片段沖洗4～5次。最后，將其放置在無菌培養(yǎng)基中,切去莖塊最末端處1～2mm左右,再次使用無菌水沖洗5～6次，每次清洗的時(shí)間不少于2分鐘。

1.2.3 外植體的接種與培養(yǎng)

用滅菌后的鑷子把莖塊接種在經(jīng)過誘導(dǎo)分化后的培養(yǎng)基中，所有用到的器材都必須嚴(yán)格進(jìn)行滅菌。莖塊的接種需要在誘導(dǎo)分化后的培養(yǎng)基上的腋芽長至3～4cm左右高并成為新的植株時(shí)進(jìn)行，15天后進(jìn)行生根培養(yǎng)。初代培養(yǎng)基上培養(yǎng)4～5天時(shí)，在超凈工作臺中將莖塊取出，用無菌水清洗，確保莖塊上不留下任何培養(yǎng)基的殘液。再將其接種到已經(jīng)新加入培養(yǎng)基的器皿中，誘導(dǎo)愈傷的組織在同樣的條件下進(jìn)行再次培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需要半個(gè)月左右，之后小的愈傷組織會慢慢成長。愈傷的組織可培育出眾多的可繁殖性接種的材料，用于后續(xù)的生根培養(yǎng)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同濃度6-BA對寒蔥的愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生的影響

表1 不同濃度6-BA對寒蔥愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生的影響

由表1可以看出，6-BA的濃度較低或者較高的時(shí)候它都將會左右到寒蔥愈傷組織細(xì)胞的增殖，當(dāng)6-BA濃度在2.2mg/L時(shí)寒蔥的萌發(fā)率較高，也就是說細(xì)胞增殖也最快。

2.2 不同濃度6-BA對寒蔥芽增殖產(chǎn)生的影響

表2 不同濃度6-BA對寒蔥芽增殖產(chǎn)生的影響

由表2可以看出，隨6-BA濃度的升高，寒蔥芽增殖的數(shù)量也在不斷增多，但在生長調(diào)節(jié)劑濃度過高時(shí)，寒蔥就會出現(xiàn)發(fā)黃點(diǎn)，因此在芽增殖階段6-BA最適合的濃度是2.2mg/L。

2.3 不同濃度NAA對寒蔥生根的影響

表3 不同濃度NAA對寒蔥生根培養(yǎng)產(chǎn)生的影響

由表3可以看出，生長調(diào)節(jié)劑NAA濃度較低或較高時(shí)，都會遏制根部的成長，本試驗(yàn)結(jié)果顯示最合適根生長的NAA濃度為0.5 mg/L。

3 結(jié)論

寒蔥為多年生的草本植物，而寒蔥的快速繁殖技術(shù)在當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)村中進(jìn)行宣傳推廣和入土栽培都有較強(qiáng)的可行性[6-9]，當(dāng)?shù)剞r(nóng)民還可以利用林改之后的天然林進(jìn)行林下復(fù)合式的寒蔥經(jīng)營。以短養(yǎng)長，進(jìn)而取得最佳的經(jīng)濟(jì)效益。由于近些年來無節(jié)制的開采，使目前彌足珍貴的寒蔥正面臨絕種的威脅。對寒蔥快繁體系進(jìn)行條件優(yōu)化研究，不僅可以保護(hù)瀕危物種寒蔥的資源，而且對野生經(jīng)濟(jì)植物的家化培育具有一定的促進(jìn)作用和指導(dǎo)意義。

[1]戴旭,尹云.寒蔥人工栽培可行性分析[J].吉林農(nóng)業(yè),2011(8)：125.

[2]李寶山,祖麗娜.寒蔥的栽培與利用[J].中國林副熱產(chǎn),2010(2):75-76.

[3]周繇,朱俊義,于俊林.中國長白山食用植物彩色圖志[M].北京:科學(xué)出版社,2012.

[4]姬艷玲,武留剛.寒蔥栽培技術(shù)要點(diǎn)[J].河南農(nóng)業(yè),2013(5):39.

[5]劉桂萍,王建軍.淺談旱地毛蔥高產(chǎn)栽培技術(shù)[J].農(nóng)民致富之友,2015(3):40.

[6]侯穎,孫鳳發(fā),程世明.寒蔥栽培技術(shù)[J].人參研究,2007(4):39.

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[8]張德純,祁占東,王海軍,等.茖蔥資源保護(hù)和開發(fā)利用[J].中國蔬菜,2007(12):42-43.

[9]尹永芹.茖蔥的化學(xué)成分研究[D].哈爾濱：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2014.

Optimization of Rapid Propagation System ofAlliumVictorialis

CHEN Xiao,ZHOU Ce,SUN Xue-hui,WEI Jian

(College of Life Sciences,Changchun Normal University, Changchun Jilin 130032,China)

This experiment is to accurately abtain the excellent conditions of rapid propagation system forAlliumvictorialis, which can be produced more seedlings ofAlliumvictorialisand enhance their quality and production. In this experiment, stalks block was the experimental materials, and the plant tissue culture techniques was used to study the impact of different ratio of hormone concentration onAlliumvictorialis, and laid a theoretical foundation for the optimization of rapid propagation system ofAlliumvictorialis.

Alliumvictorialis;rapid propagation system；hormone concentration

2016-10-27

長春師范大學(xué)研究生創(chuàng)新計(jì)劃資助項(xiàng)目“寒蔥快繁體系的建立”(cscxy2015006)；長春市科技局項(xiàng)目“瀕危寒蔥快繁體系的建立及基地栽培模式示范”(2014198)。

陳 笑(1990- )，女，碩士研究生，從事植物生物技術(shù)研究。

魏 健(1980- )，男，副教授，博士，從事生物技術(shù)研究。

S567.23+9

A

2095-7602(2017)08-0077-03