奚廣生

(吉林農(nóng)業(yè)科技學院，吉林省·吉林市，132101)

王二歡 楊鶴

(吉林農(nóng)業(yè)大學)

人參莖葉總皂苷對小菜蛾取食、解毒酶及乙酰膽堿酯酶的影響1)

奚廣生

(吉林農(nóng)業(yè)科技學院，吉林省·吉林市，132101)

王二歡 楊鶴

(吉林農(nóng)業(yè)大學)

以人參(Panax ginsengC.A.Mey)莖葉總皂苷為試驗材料，以小菜蛾(Plutella xylostella (L.))為試驗昆蟲，測定小菜蛾取食、解毒酶及乙酰膽堿酯酶活性。結(jié)果表明：人參莖葉總皂苷對小菜蛾取食有明顯抑制作用；低質(zhì)量濃度人參莖葉總皂苷能夠激活小菜蛾體內(nèi)多功能氧化酶系(MFO)活性，而高質(zhì)量濃度人參莖葉總皂苷對小菜蛾體內(nèi)多功能氧化酶系(MFO)活性具有抑制作用；人參莖葉總皂苷，能夠抑制谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶及羧酸酯酶活性；低質(zhì)量濃度時人參莖葉總皂苷對小菜蛾體內(nèi)乙酰膽堿酯酶活性影響不大，中質(zhì)量濃度能夠抑制小菜蛾體內(nèi)乙酰膽堿酯酶活性，而高質(zhì)量濃度時抑制作用與中質(zhì)量濃度相比有所減弱。

人參；人參皂苷；小菜蛾

人參(PanaxginsengC.A.Mey)是我國極具有優(yōu)勢和特色的藥用作物，其用藥歷史悠久[1]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，人參皂苷是人參的主要藥效成分[2]，也是人參體內(nèi)主要的化感物質(zhì)，能夠在一定程度上闡述人參連作障礙產(chǎn)生的原因。為了合理利用藥用植物人參，早在上世紀70年代人們針對人參莖葉化學成分進行了一系列研究。2015年版《中國藥典》[3]將人參莖葉收載，由于其含有人參皂苷且生理活性明顯，是國內(nèi)外研究的熱點，目前人參莖葉總皂苷(GSLS)已成為應(yīng)用最為廣泛的人參提取物之一。野生人參壽命長，且生長環(huán)境惡劣，但其極少受到蟲害的影響。研究發(fā)現(xiàn)，人參總皂苷能夠延長粘蟲生育歷期；對苜蓿夜蛾幼蟲及粘蟲取食具有顯著性抑制作用，拒食效果隨濃度的升高而增大，且對其體內(nèi)蛋白質(zhì)含量、消化酶活性、保護酶活性具有較大影響[4-7]；能夠改善線蟲的生存狀態(tài)及延長其壽命，促進線蟲發(fā)育，增強其運動和抗熱激能力[8]。據(jù)此，本研究以田間常見昆蟲小菜蛾(PlutellaxylostellaL.)為試驗昆蟲，從小菜蛾趨避作用、解毒酶活性及神經(jīng)系統(tǒng)酶活性三方面對人參皂苷生物活性進行研究，探討人參莖葉總皂苷的生態(tài)學作用，旨在為研究人參皂苷在人參環(huán)境適應(yīng)中的作用及其機制提供參考。

1 材料與方法

人參莖葉總皂苷溶液的配制：人參莖葉總皂苷(純度80%)由吉林大學藥學院提供，使用時用0.1%曲拉通溶液分別配制成低質(zhì)量濃度(5 g/L)、中質(zhì)量濃度(10 g/L)和高質(zhì)量濃度(20 g/L)的質(zhì)量濃度梯度，現(xiàn)配現(xiàn)用。

供試昆蟲小菜蛾：2齡小菜蛾由中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所提供，帶回吉林農(nóng)業(yè)科技學院中藥學院實驗室，在溫度(27±1)℃、相對濕度40%、光照80%、光周期12 h/12 h(光/暗)的人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)，用新鮮無農(nóng)藥無病蟲害的油菜葉片詞養(yǎng)備用。

供試植物油菜葉片(未噴灑過農(nóng)藥)：采自吉林農(nóng)業(yè)科技學院中藥學院藥用植物種源圃。

趨避試驗：將新鮮油菜葉片以中脈為分界線，一邊為處理，一邊為對照；用毛筆沾取現(xiàn)配好的不同質(zhì)量濃度梯度的人參皂苷溶液均勻涂抹在葉片處理一側(cè)為處理組，涂抹蒸餾水組為對照組，自然晾干。將涂抹藥液晾干后的葉片放到襯有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，每皿1片；向處理一側(cè)接2齡小菜蛾10頭，用保鮮膜封住皿口，再用解剖針在保鮮膜上扎若干小孔，室溫飼養(yǎng)。0、12、24、36、48、60 h統(tǒng)計處理一側(cè)小菜蛾數(shù)目，并計算趨避率。趨避率=((對照組處理側(cè)小菜蛾數(shù)量-處理組處理側(cè)小菜蛾數(shù)量)/對照組處理側(cè)小菜蛾數(shù)量)×100%。

試蟲處理：釆用載毒葉碟法[9](略有改動)。挑選生長健康的2齡小菜蛾饑餓處理6 h；將新鮮油菜葉片在不同質(zhì)量濃度梯度的人參皂苷溶液中浸泡3 s，揮干表面水分，放入襯有濕濾紙的培養(yǎng)皿中；將經(jīng)過饑餓處理后的2齡小菜蛾放入培養(yǎng)皿中(30頭/皿)，保鮮膜封住皿口，并用解剖針在保鮮膜面扎若干小孔，室溫喂養(yǎng)；每個處理3個重復(fù)，同時用蒸餾水做空白對照組。在24、48 h時進行多功能氧化酶系(MFO)、羧酸酯酶酶活、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶酶活、乙酰膽堿酯酶酶活及蛋白質(zhì)含量測定。

酶源的制備：取試蟲10頭移入預(yù)冷的玻璃勻漿器中，加入1 mL濃度為0.1 mol/L、pH=7.4的PBS(每升含EDTA、DTT、PTU、PMSF各1 mmol，每升含甘油100 g)在冰浴中充分研磨勻漿，并補足體積到2 mL；勻漿液置于4 ℃、12 000 r/min離心15 min，上清液分裝于離心管中；-20 ℃冷凍，分別用于蛋白質(zhì)總含量和多功能氧化酶系(MFO)、羧酸酯酶、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶、乙酰膽堿酯酶酶活測定。

蛋白含量測定：以牛血清白蛋白做標準曲線；將酶液作為反應(yīng)液，用于蛋白質(zhì)含量的測定。加入考馬斯亮藍試劑，混勻，室內(nèi)放置5 min，用酶標儀595 nm處測定OD值，并計算蛋白質(zhì)含量[10]。

多功能氧化酶系(MFO)活性測定：根據(jù)Hansen et al.[11]方法。將室溫調(diào)至27 ℃，在96孔酶標板中，每孔依次加入100 μL濃度為2 mmol/L的P-NA，90 μL酶源，最后加入10 μL濃度為8 mmol/L的NADPH。立即放入酶標儀下，測定405 nm下的OD值，測定時間30 min，每1 min取值1次，以每分鐘OD405變化0.1為一個酶活單位U，酶活單位為U/(mg·min)。

谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性測定：根據(jù)Habig[12]方法，在離心管中依次加入1.2 mL濃度為66 mmol/L的pH=7.4的PBS(含EDTA 2 mmol/L)、0.15 mL濃度為50 mmol/L的還原型谷胱甘肽、0.05 mL濃度為0.03 mol/L的CDNB、0.1 mL酶液，以磷酸緩沖液為對照。搖勻立即放入酶標儀下，測定340 nm下的OD值，測定時間5 min，每1 min取值一次。以每分鐘OD340變化0.1為一個酶活單位U，酶活單位為U/(mg·min)。

羧酸酯酶活性測定：參照Van Aperen[13]方法，在離心管中依次加入1.43 mL濃度為0.3 mmol/L底物(濃度為0.04 mol/L、pH=7.0的PBS(含有體積比1%濃度為0.03 mol/L的α-醋酸萘酯、體積比1%濃度為0.1 mmol/L的毒扁豆堿))、285 μL酶液。放入搖床中30 ℃震蕩30 min，立即加入285 μL顯色液(質(zhì)量分數(shù)為1%的固蘭B鹽和質(zhì)量分數(shù)為5%的十二烷基硫酸鈉，使用前以V(固蘭B鹽)∶V(十二烷基硫酸鈉)=2∶5混合)。穩(wěn)定0.5 h后，吸取250 μL注入96孔酶標板中，測定600 nm下的OD值，以單位時間內(nèi)單位蛋白催化生成a-奈酚的量為酶活單位，即nmoL/(mg·min)。

乙酰膽堿酯酶活性測定：采用Ellman et al.[14]方法(有改動)，在離心管中依次加入測定液(測定管中為酶液，對照管中為酶提取液)1.3 mL，再加入50 μL底物顯色劑混合液[濃度為0.075 mol/L的碘化硫代乙酰膽堿和濃度為0.01 mol/L的二硫硝基苯甲酸液(含質(zhì)量分數(shù)為1.8%的碳酸氫鈉)，使用前以V(碘化硫代乙酰膽堿)∶V(二硫硝基苯甲酸液)=1∶2混合]。27 ℃震蕩15 min，加入250 μL反應(yīng)終止液(濃度為1 mmol/L的毒扁堿)；吸取250 μL注入96孔酶標板中，測定412 nm下的OD值。與對照管相比，以每分鐘OD412變化0.1為一個酶活單位U，酶活單位為U/(mg·min)。

數(shù)據(jù)處理：采用Gen5進行數(shù)據(jù)導(dǎo)出，運用office Excel 2010進行數(shù)據(jù)篩選及初步計算酶活降，DPS7.05對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。酶活降=24 h酶活力-48 h酶活力。

2 結(jié)果與分析

2.1 人參莖葉總皂苷對小菜蛾趨避作用的影響

由表1可見：人參莖葉總皂苷對小菜蛾取食存在趨避作用。趨避率隨人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度的增加而增大，隨處理時間的延長而降低。處理24 h時，人參莖葉總皂苷對小菜蛾拒食率達85%以上；處理48 h后，其拒食率有所下降，在40%～56%之間。

表1 人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度和處理時間不同時小菜蛾取食的趨避率(n=5)

人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度/g·L-1趨避率/%處理24h處理48h585.710±2.47441.270±1.3751091.670±1.44349.210±1.3742092.590±0.06455.160±2.090

注：表中趨避率的數(shù)據(jù)為“平均值±標準差”。

2.2 人參莖葉總皂苷對小菜蛾多功能氧化酶系(MFO)活性的影響

由表2可見：人參莖葉總皂苷低質(zhì)量濃度(5 g/L)能促進MFO活性，而中、高質(zhì)量濃度(10、20 g/L)抑制MFO活性，且隨質(zhì)量濃度的增加MFO酶活降低。隨處理時間的增加，MFO活性降低，且低質(zhì)量濃度酶活降高于對照組，中高質(zhì)量濃度組隨質(zhì)量濃度的增加酶活降降低，且低于對照組。

表2 人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度和處理時間不同時小菜蛾體內(nèi)MFO活性

人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度/g·L-1MFO活性/U·mg-1·min-1處理24h處理48hMFO酶活降/U·mg-1·min-1CK(2.770±0.688)ab(2.56±0.579)ab0.215(4.130±0.592)a(3.67±1.126)a0.4610(2.440±0.420)bc(1.90±0.274)bc0.5420(1.450±0.714)c(1.12±0.733)c0.33

注：表中MFO活性數(shù)據(jù)為“平均值±標準差”；同列數(shù)據(jù)后不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.3 人參莖葉總皂苷對小菜蛾谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性的影響

由表3可見：隨人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度的增加，谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性與對照組相比明顯降低，且呈現(xiàn)先降低后升高趨勢；隨處理時間的延長，其酶活性明顯降低，處理組酶活降明顯低于對照組，并隨人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度的增加呈先降低后增高趨勢。當人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度為10 g/L時，其酶活性及酶活降最低；處理時間延長至48 h時，高質(zhì)量濃度(20 g/L)人參莖葉總皂苷處理與對照組酶活性無差異。

表3 人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度和處理時間不同時小菜蛾體內(nèi)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性

人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度/g·L-1谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性/U·mg-1·min-1處理24h處理48h谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活降/U·mg-1·min-1CK(1742.680±70.589)a (1084.560±86.917)a658.115(1325.520±124.666)b(865.530±67.757)bc459.9910(907.090±66.000)c(774.240±61.018)c132.8520(1574.830±84.381)a(1001.190±96.023)ab573.64

注：表中谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性數(shù)據(jù)為“平均值±標準差”；同列數(shù)據(jù)后不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.4 人參莖葉總皂苷對小菜蛾羧酸酯酶活性的影響

由表4可見：人參莖葉總皂苷對小菜蛾羧酸酯酶活性有一定抑制作用。用質(zhì)量濃度5 g/L溶液處理24 h，其酶活性與對照相比無差異；隨處理液質(zhì)量濃度的增加，其酶活呈先降低后升高趨勢，質(zhì)量濃度在10 g/L時酶活性最低。處理組隨處理時間的增加，酶活性降低，且酶活降隨處理液質(zhì)量濃度的增加而減??；質(zhì)量濃度5 g/L人參莖葉總皂苷處理比對照組能明顯增加酶活降，而其余處理組與對照組相比酶活降減小。

2.5 人參莖葉總皂苷對小菜蛾神經(jīng)系統(tǒng)-乙酰膽堿酯酶活性的影響

由表5可見：人參莖葉總皂苷對小菜蛾體內(nèi)乙酰膽堿酯酶活性有一定影響。人參莖葉總皂苷處理24 h，與對照組相比，質(zhì)量濃度為5 g/L處理組對小菜蛾體內(nèi)乙酰膽堿酯酶活性無影響，但質(zhì)量濃度為10、20 g/L處理組與對照相比酶活顯著性降低，且質(zhì)量濃度為10 g/L處理組酶活性最低。人參莖葉總皂苷處理48 h，各組酶活性均有所降低，對照組酶活與處理組無差異，但質(zhì)量濃度為20 g/L處理，酶活性顯著性高于質(zhì)量濃度為5、10 g/L處理；與對照組相比，質(zhì)量濃度為5 g/L處理酶活降略有升高但差異不大，而質(zhì)量濃度為10、20 g/L處理酶活降顯著降低，且質(zhì)量濃度為20 g/L處理低于質(zhì)量濃度為10 g/L的處理。

表4 人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度和處理時間不同時小菜蛾羧酸酯酶活性

人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度/g·L-1羧酸酯酶活性/nmol·mg-1·min-1處理24h處理48h羧酸酯酶活性酶活降性/nmol·mg-1·min-1CK(1.370±0.082)a(1.070±0.070)a0.305(1.270±0.059)ab(0.750±0.070)b0.4610(0.850±0.061)c(0.450±0.040)c0.2820(1.080±0.046)b(0.920±0.048)a0.17

注：表中羧酸酯酶活性數(shù)據(jù)為“平均值±標準差”；同列數(shù)據(jù)后不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

表5 人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度和處理時間不同時小菜蛾乙酰膽堿酯酶活性

人參莖葉總皂苷質(zhì)量濃度/g·L-1乙酰膽堿酯酶活性/U·mg-1·min-1處理24h處理48h乙酰膽堿酯酶活降/U·mg-1·min-1CK(5.730±0.536)a(2.020±0.416)ab3.715(5.650±0.634)a(1.680±0.228)b3.9710(3.300±0.345)b(1.280±0.145)b2.1420(4.410±0.562)b(2.330±0.201)a1.97

注：表中羧酸酯酶活性數(shù)據(jù)為“平均值±標準差”；同列數(shù)據(jù)后不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

3 結(jié)論與討論

在植物的進化歷程中，植物次生代謝產(chǎn)物是植物響應(yīng)環(huán)境變化所產(chǎn)生的一類重要物質(zhì)，其能夠抵御病蟲草害，從而使植物在競爭中處于有利地位。

植物次生代謝產(chǎn)物對部分植食性昆蟲具有趨避、拒食和毒殺作用。已有研究發(fā)現(xiàn)，人參皂苷對苜蓿夜蛾幼蟲及粘蟲取食具有顯著性抑制作用；植物凝集素對甜菜夜蛾、馬鈴薯葉甲、蘿卜蚜、棉鈴蟲、煙葉甲等植食性昆蟲具有忌避、拒食活性[15]；華北白前提取物，對斜紋夜蛾3齡和5齡幼蟲均有較好的拒食活性[16]；垂序商陸全草、博落回、柚皮粗提物，抑制松梢螟幼蟲的取食[17-18]；馬桑倍半萜內(nèi)酯成分中的羥基馬桑毒素、馬桑亭、馬桑寧，對粘蟲都具有不同程度的觸殺作用，其中羥基馬桑毒素的觸殺作用最強[19]；蜈蚣草三氯甲烷萃取物，對萵苣指管蚜、斜紋夜蛾具有較高的殺蟲活性[20]。

本研究測定了人參莖葉總皂苷對小菜蛾取食的影響，結(jié)果表明：人參莖葉總皂苷對小菜蛾有明顯趨避作用，趨避率隨處理液質(zhì)量濃度的增加而增大，隨處理時間的延長而降低。原因：一是小菜蛾取食帶有人參莖葉總皂苷的油菜葉片后，其體內(nèi)產(chǎn)生了能夠降解或轉(zhuǎn)化人參莖葉總皂苷的酶；二是油菜表面具有吸收并轉(zhuǎn)化人參莖葉總皂苷酶類。因此，應(yīng)深入研究小菜蛾取食含有人參莖葉總皂苷的油菜葉片后其體內(nèi)化學物質(zhì)，及浸泡人參莖葉總皂苷后油菜葉片生理生化變化及化學成分變化。

多功能氧化酶系(MFO)、羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶，均是昆蟲體內(nèi)重要的解毒酶，其活力大小決定昆蟲解毒能力的強弱，是昆蟲產(chǎn)生抗藥性的重要機制。抑制其活性，能降低解毒能力，延長外源物質(zhì)在昆蟲體內(nèi)的作用時間，提高昆蟲死亡率。部分植物提取物，能有效抑制其活性，而且隨植物提取物濃度的增加抑制作用增強。這在生產(chǎn)上具有重要意義，說明植物源物質(zhì)與其它殺蟲劑復(fù)配發(fā)揮其增效作用是未來農(nóng)藥的發(fā)展方向。眾多研究表明，人參皂苷具有抗氧化作用。本研究結(jié)果顯示：低質(zhì)量濃度組能夠激發(fā)MFO活性，而中高質(zhì)量濃度組能夠抑制MFO活性，且隨質(zhì)量濃度的增高抑制效果增強，說明低質(zhì)量濃度人參莖葉總皂苷能激發(fā)小菜蛾體內(nèi)自身抗氧化能力；質(zhì)量濃度大于10 g/L后，隨質(zhì)量濃度的增加，人參莖葉總皂苷抑制小菜蛾體內(nèi)自身的抗氧化能力逐漸增強。人參莖葉總皂苷影響小菜蛾體內(nèi)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性，隨處理液質(zhì)量濃度的增加，其酶活與對照組相比明顯降低，且呈現(xiàn)先降低后升高趨勢；隨處理時間的延長，其酶活性明顯降低。人參莖葉總皂苷對小菜蛾羧酸酯酶活性有一定抑制作用，隨處理液質(zhì)量濃度的增加，其酶活呈先降低后升高趨勢，處理組隨處理時間的增加，酶活性降低，且酶活降隨處理液質(zhì)量濃度的增加而減小。初步表明，多功能氧化酶(MFO)、羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶，是人參莖葉總皂苷的作用靶標，其具體機制有待于進一步研究。

乙酰膽堿酯酶(AchE)是昆蟲體內(nèi)重要的神經(jīng)系統(tǒng)酶，在昆蟲化學傳遞中起著至關(guān)重要的作用。AchE能迅速分解乙酰膽堿，防止因乙酰膽堿積累造成的神經(jīng)傳遞阻斷。因此，抑制AchE活性勢必會影響神經(jīng)傳遞，造成昆蟲生理生化過程失調(diào)甚至破壞，導(dǎo)致昆蟲死亡。植物提取物(大戟科)能有效抑制AchE活性[21]，而雷公藤總生物堿對AchE活性無影響[22]。本研究測定了人參莖葉總皂苷對小菜蛾AchE活性的影響，結(jié)果表明：低質(zhì)量濃度時人參莖葉總皂苷對小菜蛾體內(nèi)AchE活性影響不大，中質(zhì)量濃度能抑制AchE活性，而高質(zhì)量濃度時抑制作用與中質(zhì)量濃度相比有所減弱。初步確定，乙酰膽堿酯酶(AchE)是人參莖葉總皂苷的靶標，應(yīng)進一步對乙酰膽堿、Na-K-ATP酶、Ca-Mg-ATP酶、谷氨酸、γ-氨基丁酸、谷-丙轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酸脫羧酶進行研究，以確定人參莖葉總皂苷作用的靶標。

[1] 周繇.中國長白山植物資源志[M].北京：中國林業(yè)出版社，2010.

[2] 胡華剛，肖璇，劉慧敏，等.人參莖葉總皂苷對幼年雄性大鼠生殖系統(tǒng)的影響及作用機制[J].食品科學，2014，35(3)：187-192.

[3] 國家藥典委員會.中國藥典：一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[4] 譚世強，張愛華，謝敬宇，等.人參總皂苷對苜蓿夜蛾幼蟲的拒食作用[J].中國中藥雜志，2013，38(1)：37-39.

[5] 譚世強，張連學，馬琳，等.人參總皂苷對粘蟲體內(nèi)保護酶活性的影響[J].中國中藥雜志，2014，39(22)：4283-4287.

[6] 譚世強，馬琳，許永華，等.人參總皂苷對4齡粘蟲的取食及生長發(fā)育的影響[J].中國中藥雜志，2015，40(14)：2787-2791.

[7] 譚世強，張愛華，許永華，等.人參總皂苷對粘蟲體內(nèi)蛋白質(zhì)含量及消化酶活性的影響[J].中國中藥雜志，2013，38(11)：1692-1696.

[8] 何瀟瀟.人參總皂苷中水溶性成分對于線蟲生命活動的影響[D].長春：吉林大學，2009.

[9] 周瓊，魏美才，歐曉明.環(huán)氧蒼耳素Ⅰ對菜青蟲中腸消化酶和羧酸酯酶活性的影響[J].昆蟲學報，2011，54(6)：729-733.

[10] BRADFORD M M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding[J]. Analytical Biochemistry，1976，72(1/2)：248-254.

[11] HANSEN L G， HODGSON E. Metabolism of naphthalene and 1-naphthol by enzyme preparations from the housefly，Muscadomestica[J]. Pesticide Biochemistry and Physiology，1971，1(3/4)：464-471.

[12] HABIG W H， JAKOBY W B. Assays for differentiation of glutathione S-transferases[J]. Methods in Enzymology，1981，77：398-405.

[13] VAN ASPEREN K. A study of housefly esterases by means of a sensitive colorimetric method[J]. Journal of Insect Physiology，1962，8(4)：401-416.

[14] GORUN V T， PROINOV I， BLTESCU V P， et al. Modified Ellman procedure for assay of cholinesterases in crude enzymatic preparations[J]. Analytical Biochemistry，1978，86(1)：324-326.

[15] VANDENBORRE G， SMAGGHE G， VAN DAMME E J， et al. Plant lectins as defense proteins against phytophagous insects[J]. Phytochemistry，2011，72(13)：1538-1550.

[16] 陳旭，王迎兒，王燕燕，等.白前提取物對斜紋夜蛾拒食活性的研究[J].中國生物防治，2009(增刊)：36-39.

[17] 周潔塵，閆瑞坤，王圣潔，等.三種植物乙醇粗提物對松梢螟幼蟲的生物活性研究[J].生物技術(shù)通報，2014(12)：121-127.

[18] 周潔塵，閆瑞坤，王圣潔，等.柚皮粗提物對松梢螟幼蟲生物活性影響研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學，2014，41(23)：70-73.

[19] 郭新榮.馬桑倍半萜內(nèi)酯對粘蟲毒理學研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2008.

[20] 廖鳳仙，王蘭英，駱焱平.蜈蚣草提取物殺蟲活性初步研究[J].中國植保導(dǎo)刊，2013，33(3)：12-15.

[21] 陳曉勤.植物提取物對蔬菜夜蛾的生物活性及機理研究[D].揚州：揚州大學，2006.

[22] 周琳.雷公藤總生物堿殺蟲作用研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2007.

EffectofGinsengStemandLeaveSaponinontheFeeding,DetoxificationEnzymeandAcetylCholinesteraseActivityofPlutella xylostellaL//

XiGuangsheng

(JilinAgriculturalScienceandTechnologyUniversity,Jilin132101,P.R.China);

WangErhuan,YangHe

(JilinAgriculturalUniversity)

//JournalofNortheastForestryUniversity，2017,45(8)：97-100.

Withtheginsengstemandleavesaponin(GSLS)ofPanax ginsengC.A.MeyforPlutella xylostella (L.),wedeterminedtheactivityoffeeding,detoxificationenzymeandacetylcholinesterase.GSLShassignificantinhibitionoffeeding.LowconcentrationsofGLSLcanbeactivatedtheactivityofMFO,whilehigh-concentrationhastheeffectofinhibition.GSLScaninhibittheactivityofglutathione-S-transferaseandcarboxylesterase.GSLShaslittleeffectofAchEwhichinP. xylostellavivowiththelow-concentration,andthemid-concentrationshasinhibition.HighconcentrationofGSLShaslessdepressionthanmid-concentration.

PanaxginsengC. A. Mey； Ginseng Saponin；Plutellaxylostella(L.)

1)國家自然科學基金項目(31470420)；公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項項目(201303111)；吉林農(nóng)業(yè)科技學院校內(nèi)種子基金項目；吉林省高等學校人參(種植)高端科技創(chuàng)新平臺項目。

奚廣生，男，1967年9月生，吉林農(nóng)業(yè)科技學院中藥學院，教授。E-mail：zyxyxgs@126.com。

2017年3月14日。

S567.5+1；Q969.42+5.2

責任編輯：張 玉。