郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 （上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 201201）

鐵皮石斛組培苗生根技術(shù)研究

郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 （上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 201201）

為加快鐵皮石斛的繁殖速度、降低其生產(chǎn)成本、實(shí)現(xiàn)鐵皮石斛的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，通過設(shè)計(jì)不同生根培養(yǎng)基配方和不同培養(yǎng)條件，進(jìn)行了其生根試驗(yàn)研究。結(jié)果表明，生根培養(yǎng)基配方對(duì)鐵皮石斛組培苗出根率的影響最大，其次為光照強(qiáng)度，但光照時(shí)間對(duì)出根率的影響不顯著。鐵皮石斛組培苗生根的最佳實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件為光照強(qiáng)度為2 000 Lx，培養(yǎng)室溫度調(diào)控在（20±2）℃，最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 mg/ L。

鐵皮石斛；生根培養(yǎng)；光照強(qiáng)度；光照時(shí)間；生根培養(yǎng)基；出根率

鐵皮石斛為蘭科多年生附生草本植物，屬國(guó)家二級(jí)保護(hù)的貴重瀕危藥材。由于受品種特性的影響，鐵皮石斛對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境條件的要求非?？量?，且野生鐵皮石斛的自然繁殖能力極弱、生長(zhǎng)緩慢，目前已禁止采摘。而通過植物組培技術(shù)，可有效加快鐵皮石斛的繁殖速度、降低生產(chǎn)成本、實(shí)現(xiàn)鐵皮石斛的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，其中提高鐵皮石斛組培苗的生根效率是實(shí)現(xiàn)其產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的重點(diǎn)和難點(diǎn)。筆者以鐵皮石斛組培苗為試驗(yàn)材料，通過設(shè)計(jì)不同生根培養(yǎng)基配方和不同培養(yǎng)條件進(jìn)行其生根試驗(yàn)研究，以期為鐵皮石斛產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供幫助。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料為增殖所得的鐵皮石斛組培苗。

1.2 生根試驗(yàn)

在超凈工作臺(tái)上將鐵皮石斛組培苗進(jìn)行切割，切去種苗殘葉、老葉和基部褐化老化組織，按照2葉1心的標(biāo)準(zhǔn)，把鐵皮石斛組培苗切割分離成高度為1.5 cm左右的單株，接入不同生根培養(yǎng)基中，每瓶接種1株，重復(fù)10次，放入培養(yǎng)室中在不同環(huán)境條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后45 d進(jìn)行出根率觀察比較。

培養(yǎng)環(huán)境條件中，光照強(qiáng)度設(shè)計(jì)了1 000、2 000、4 000 Lx 3個(gè)梯度；光照時(shí)間設(shè)計(jì)了6、12、18 h/d 3個(gè)梯度；培養(yǎng)室溫度均調(diào)控在（20±2）℃；培養(yǎng)基配方為：（1）MS、（2）MS+NAA 0.1 mg/L、（3）MS+NAA 0.5 mg/L、（4）MS+NAA1.0 mg/L、（5）1/2MS、（6）1/2 MS+NAA 0.1 mg/L、（7）1/2 MS+NAA 0.5 mg/L、（8）1/2 MS+NAA 1.0 mg/L，各培養(yǎng)基中均添加香蕉汁100 mg/L、蔗糖3%和瓊脂0.6%，pH 5.6～5.8。合計(jì)216個(gè)處理。

2 結(jié)果與分析

經(jīng)過45 d的生根培養(yǎng)，每個(gè)處理中隨機(jī)選取3瓶進(jìn)行生根率的統(tǒng)計(jì)分析（因數(shù)據(jù)較多，僅羅列各因素的平均出根率），將統(tǒng)計(jì)所得的數(shù)據(jù)用SPSS17軟件進(jìn)行多因素方差分析。

由表1、表3和表4可看出，在其他試驗(yàn)條件不變的情況下，培養(yǎng)基配方（6）的鐵皮石斛組培苗平均出根率最高，達(dá)78%，顯著高于其他培養(yǎng)基配方；平均出根率位居第2的是培養(yǎng)基配方（2），平均出根率為33%；其次是培養(yǎng)基配方（3）、（7），平均出根率分別為30%、26%；其余培養(yǎng)基配方的平均出根率均低于20%，生根效果較差。在其他試驗(yàn)條件不變的情況下，當(dāng)光照強(qiáng)度為2 000 Lx時(shí)，鐵皮石斛組培苗的平均出根率最高，達(dá)44%，顯著高于光照強(qiáng)度為1 000、4 000 Lx。光照時(shí)間對(duì)鐵皮石斛組培苗的出根率影響不大，在光照時(shí)間為6、12、18 h/d時(shí)，平均出根率分別為29%、28%、22%。

表1 鐵皮石斛組培苗在不同因素下的平均出根率分析

表2 誤差方差等同性的 Levene 檢驗(yàn)分析

檢驗(yàn)零假設(shè)，即在所有組中因變量的誤差方差均相等。表2中Sig.值小于5%，說明試驗(yàn)數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表3 光照強(qiáng)度對(duì)平均出根率影響的顯著性分析

為研究不同環(huán)境條件因素對(duì)出根率的影響，用SPSS17進(jìn)行主體間效應(yīng)檢驗(yàn)。由表5可知，光照強(qiáng)度和培養(yǎng)基配方的Sig.值均小于5%，說明出根率的變化由光照強(qiáng)度和培養(yǎng)基配方所決定，不同強(qiáng)度的光照和不同的生根培養(yǎng)基配方對(duì)鐵皮石斛組培苗的出根率影響顯著；而光照時(shí)間的Sig.值為0.495，大于5%，說明不同光照時(shí)間對(duì)鐵皮石斛組培苗出根率的影響作用不顯著。

表4 不同培養(yǎng)基配方對(duì)平均出根率影響的顯著性分析

表5 主體間效應(yīng)的檢驗(yàn)分析

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)鐵皮石斛組培苗出根率影響最大的因素是生根培養(yǎng)基配方，光照強(qiáng)度對(duì)出根率也有一定影響，而光照時(shí)間對(duì)出根率的影響較小。因此，綜合上述試驗(yàn)結(jié)果考慮，促使鐵皮石斛組培苗生根的最佳實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件：光照強(qiáng)度為2 000 Lx、培養(yǎng)室溫度調(diào)控在（20±2）℃，最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 mg/L。

2016-12-07