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·實驗研究·

鼻康片對變應性鼻炎患者外周血T細胞亞群及細胞因子的影響

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目的探討鼻康片對變應性鼻炎患者外周血T細胞亞群及細胞因子的影響。方法前瞻性收集我院收治的變應性鼻炎患者100例，根據(jù)完全隨機數(shù)字表原則，將患者分為觀察組和對照組，每組各50例。觀察組給予鼻康片聯(lián)合氯雷他定片治療，對照組僅給予氯雷他定片治療。觀察兩組患者治療前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg細胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、過敏性鼻結(jié)膜炎生活質(zhì)量(RQLQ)。結(jié)果兩組患者治療前Th1、Th17、Treg、IL-2和RQLQ等差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。與對照組比較，觀察組患者治療后Th1顯著升高 (14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000)；Th17顯著降低 (1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000)；Treg顯著升高(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000)；IL-2顯著升高(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000)；RQLQ評分顯著降低(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019)。兩組患者治療前后Th2、IL-4和IFN-γ均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。結(jié)論鼻康片有助于糾正變應性鼻炎患者外周血T細胞亞群失衡，改善患者生存質(zhì)量。

變應性鼻炎；T細胞亞群；細胞因子；鼻康片

變應性鼻炎是一種慢性炎癥性疾病，主要由Ⅰ型變態(tài)反應介導，與免疫球蛋白E水平升高有關(guān)[1，2]。隨著研究的進展，目前越來越多的研究證實多種免疫細胞參與了變應性鼻炎的發(fā)病過程。2014年我國學者研究顯示變應性鼻炎模型小鼠Th1、Th2平衡功能失調(diào)[3]。隨著研究的進一步深入，學者進一步發(fā)現(xiàn)變應性鼻炎患者外周血中Th17/Treg細胞一樣存在功能失調(diào)[4，5]。目前研究已肯定Th1、Th2、Th17和Treg在變應性鼻炎患者中的作用。鼻康片具有清熱解毒、疏風消腫和利咽通竅等功能，適用于各種急慢性鼻炎、鼻竇炎、變應性鼻炎等。2013年我國學者黃水仙在變應性鼻炎模型小鼠中發(fā)現(xiàn)鼻康片有助于糾正小鼠Th1、Th2平衡失調(diào)，進而改善小鼠癥狀[6]。然而，目前關(guān)于鼻康片對變應性鼻炎患者外周血Th1、Th2、Th17和Treg細胞的影響和臨床療效尚不清楚，因此有必要進行進一步研究。

資料與方法

1 一般資料

自2014年1月～2016年6月，收集我院收治的變應性鼻炎患者，納入標準：①變應性鼻炎“根據(jù)2004年中華醫(yī)學會耳鼻咽喉科分會蘭州會議制定的變應性鼻炎的診治原則和推薦方案”[7]：①具有鼻癢、噴嚏、鼻分泌物和鼻塞4項癥狀中至少3項；②鼻腔黏膜蒼白、水腫、充血、腫脹等，發(fā)作時鼻分泌物涂片或結(jié)膜刮片嗜酸性粒細胞檢查陽性或變應性皮膚試驗陽性，變應原點刺液由丹麥ALK公司提供，包括粉塵螨、屋塵螨、熱帶螨、貓毛、狗毛、花粉(雞足草、酥油草、梯牧草、毒麥、牧場草、懸鈴樹、白楊、柳樹、榆樹)、德國小蠊、艾草、豚草、真菌、牛奶、花生、蘋果和蝦。所有患者均接受上述檢查；②年齡在18～65歲之間；③同意參與本研究。排除標準：①系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫系統(tǒng)性疾??；②肺部疾病；③肝腎等臟器功能不全；④既往心肌梗死等重大心血管疾??；⑤甲狀腺功能不全；⑥免疫抑制；⑦半年內(nèi)曾使用免疫調(diào)節(jié)劑；⑧惡性腫瘤；⑨其他重大疾病。研究期間，根據(jù)納入標準和排除標準，共納入變應性鼻炎患者100例，根據(jù)完全隨機數(shù)字表原則，將患者按1∶1隨機分為觀察組和對照組，每組各50例。觀察組男性23例，女性27例，年齡范圍為18～64歲，平均為42.57±9.92歲，身體體重指數(shù)范圍為19.8～32.8kg/m2，平均身體體重指數(shù)為24.84±3.27kg/ m2，病程范圍為3～28月，平均為15.49±4.39月；對照組男性21例，女性29例，年齡范圍為19～65歲，平均為42.88±10.28歲，身體體重指數(shù)范圍為19.4～ 32.9kg/m2，平均身體體重指數(shù)為25.07±3.48kg/m2，病程范圍為4～31月，平均為15.88±4.41月；兩組患者就診時性別、年齡、身體體重指數(shù)和病程等差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究中所有患者均知情同意并簽署知情同意書，本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準。

2 治療方法

觀察組給予鼻康片（貴州安康制藥有限公司，批號：Z20027541，0.35g/片，4片/次，3次/日，療程為2周）聯(lián)合氯雷他定(開瑞坦，上海先靈葆雅制藥有限公司，批號：國藥準字：H10970410，10mg/次，1次/日，總療程為2周)治療。對照組僅給予氯雷他定治療，方法同觀察組。脫落標準：①研究期間上呼吸道感染；②研究期間失訪、不配合治療、放棄治療或轉(zhuǎn)院；③因其他疾病需要合并用藥。研究期間，無患者脫落，無合并用藥。

3 觀察指標

包括兩組患者治療前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg細胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、過敏性鼻結(jié)膜炎生活質(zhì)量(RQLQ)。①外周血Th1、Th2、Th17和Treg細胞檢測：使用美國Beckman coulter公司生產(chǎn)的Epics XL型流式細胞儀檢測患者靜脈血中Th1、Th2、Th17和Treg細胞，簡要步驟：清晨空腹條件下，抽取肘靜脈血5ml，3000r/min離心后取上層血清加入乙二胺四乙酸二鈉試管中，抽取100μl血清與相對應的鼠抗人單克隆抗體混勻，避光反應30min后即刻進行流式細胞儀檢測。②IL-2、IL-4、IFN-γ檢測：使用江蘇菲亞生物科技有限公司提供的Elisa試劑盒檢測患者血清中IL-2、IL-4、IFN-γ；③RQLQ檢測：根據(jù)RQLQ評分[8]，由同一醫(yī)師對患者進行評分。

4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析，P＜0.05表示差異均有統(tǒng)計學意義。兩組患者Th1等計量資料之間的差異采用獨立樣本t檢驗進行統(tǒng)計分析；兩組患者性別等計數(shù)資料之間的差異采用卡方檢驗進行統(tǒng)計分析。

結(jié)果

1 兩組患者Th1和Th2細胞水平比較

兩組患者治療前Th1差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。與對照組比較，觀察組患者治療后Th1顯著升高（14.38±1.89 vs 11.48±1.44%，P=0.000)。兩組患者治療前后Th2差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者Th1和Th2細胞水平比較

2 兩組患者Th17和Treg細胞水平比較

兩組患者治療前Th17和Treg差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。與對照組比較，治療后Th17顯著降低(1.34±0.28 vs.1.61±0.29%，P=0.000)；Treg顯著升高（3.48±0.75 vs.2.72±0.52%，P=0.000)，見表2。

表2 兩組患者Th17和Treg細胞水平比較

3 兩組患者IL-2、IL-4、IFN-γ水平比較

兩組患者治療前后IL-4和IFN-γ差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。兩組患者治療前IL-2差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。與對照組比較，治療后IL-2顯著升高（45.38±9.83 vs.34.38±10.83pg/ml，P=0.000），見表3。

表3 兩組患者IL-2、IL-4、IFN-γ水平比較

4 兩組患者RQLQ比較

兩組患者治療前RQLQ評分差異無統(tǒng)計學意義(25.82±8.49 vs.24.26±7.51，P=0.333)。與對照組比較，治療后RQLQ評分顯著降低（17.38±5.84 vs.20.32±6.48，P=0.019)，見圖1。

圖1 兩組患者RQLQ比較

討論

變應性鼻炎是一種變態(tài)反應性疾病，目前已經(jīng)公認Th1、Th2、Th17和Treg細胞及其細胞因子在變應性鼻炎的發(fā)生和發(fā)展中起到關(guān)鍵作用[9]。鼻康片具有清熱解毒、疏風消腫和利咽通竅等功能，在動物研究中顯示鼻康片可以調(diào)節(jié)變應性鼻炎動物模型小鼠Th1和Th2，促進其恢復正常[6]。然而目前缺乏臨床研究，因此我們設計了本研究觀察鼻康片對變應性鼻炎患者RQLQ評分的影響，并分析其對外周血T細胞亞群和細胞因子的影響，為鼻康片對變應性鼻炎患者臨床療效和具體機制進行探討。本研究顯示鼻康片可以顯著提高患者Th1、Treg和IL-2水平，降低Th17和RQLQ評分(P＜0.05)。RQLQ是專門針對變應性鼻炎的評分，其得分越低，表明患者臨床癥狀改善越明顯，生活質(zhì)量越高，有Juniper[8]1997年提出。結(jié)合本研究表明鼻康片有助于改善變應性鼻炎患者生存質(zhì)量。目前，研究已證實變應性鼻炎患者Th1/Th2降低，主要原因是Th1水平明顯下降，而Th2水平無明顯變化，進而表現(xiàn)為Th2占優(yōu)勢[10]。Th2可分泌IL-4等細胞因子，是變應性鼻炎患者中關(guān)鍵炎性因子之一[11，12]。另外，IL-4可以促進IgE的增加，而目前研究同樣已證實IgE增加在變應性鼻炎中的作用[13，14]。結(jié)合本研究可表明鼻康片可以提高Th1水平，使Th1和Th2細胞免疫向Th1漂移，進而減少IL-4和IgE的生成，最終改善患者生活質(zhì)量。然而本研究中IL-4水平經(jīng)治療后均明顯下降，但兩組差異并無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具體原因尚不清楚。而Th17分泌的IL-17可以通過激活促炎因子、增強Th2細胞功能[15]。另外IL-17還可以通過促進中性粒細胞的增殖和增強樹突狀細胞的功能，從而介導變應性鼻炎的發(fā)生，在兒童變應性鼻炎的患者中，可以發(fā)現(xiàn)Th17水平升高明顯[16]。結(jié)合本研究表明鼻康片可以通過降低變應性鼻炎患者Th17水平，從而達到改善患者臨床癥狀的目的。而Treg細胞是一種負調(diào)節(jié)性T細胞，可以通過分泌IL-10等介導機體的免疫耐受和抑制，IL-10可以抑制IgE等炎性因子的產(chǎn)生，是炎性細胞和炎性因子的抑制劑[17-19]。結(jié)合本研究表明鼻康片可以通過提高變應性鼻炎患者Treg細胞，進而抑制局部變態(tài)反應。鼻康片改善變應性鼻炎患者免疫功能，降低局部變態(tài)性反應的機制尚不清楚。但2014年沈琴等[20]在干燥性鼻炎患者中同樣表明鼻康片可以較好地改善患者臨床癥狀。

綜上所述，鼻康片有助于糾正變應性鼻炎患者外周血T細胞亞群失衡，改善患者生存質(zhì)量。

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（收稿:2017-05-04 修回：2017-05-24）

The effect of Bikang tablets on T lymphocyte subsets and cytokines in peripheral blood of patients with allergic rhinitis

ZHANG Tian,YU Guodong,XING Yang,REN Shaoda
Department of Otolaryngology,Affiliated Hospital of Guizhou Medical University,Guiyang,Guizhou, 550002,China

ObjectiveTo investigate the effect of Bikang tablets on T lymphocyte subsets and cytokines in peripheral blood of patients with allergic rhinitis.Methods100 cases of patients with allergic rhinitis admitted to our hospital were prospectively collected in this study.According to the principle of complete random number table,the patients were divided into the observation group and the control group with 50 cases in each group.The observation group were given Bikang tablets combined with Loratadin, while the control group only

the treatment of Loratadine.Th1,Th2,Th17 and Treg,IL-2,IL-4,IFN-γ in peripheral bloodand Rhinoconjunctivitis quality of life questionnaire (RQLQ)of both group before and after the treatment were observed.ResultsThere were no significant differences between the two groups in Th1,Th17,Treg,IL-2 and RQLQ before the treatment between the two groups(P＞0.05).However,when compared with the control group,patients in the observation group got a significantly higher level of Th1 after the treatment(14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000);a lower level of Th17 (1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000);an elevated level of Treg(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000);an increase in IL-2(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000);and a decrease in RQLQ(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019).There were no statistical differences between the two groups in Th2,IL-4 and IFN-γ before and after the treatment(P＞0.05).ConclusionBikang tablets is helpful to correct the imbalance of T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with allergic rhinitis,and to improve the quality of life.

allergic rhinitis;T cell subsets;cytokines;Bikang tablets

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2017.03.006

1 貴州醫(yī)科大學附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科（貴陽，550002）

2 山東省聊城市人民醫(yī)院普通外科

張?zhí)铮敝魅吾t(yī)師.Email:zhangtian061210@163.com