周露　馬蓉

摘 要：目的：對藕粉中菌落總數檢驗結果進行不確定度評定。方法：根據GB 4789.2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》和JJF 1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》，對藕粉樣品中菌落總數進行了測定和對測定過程中引入的不確定度分量進行評定。結果：合成不確定度為0.0475，擴展不確定度為0.095。結論：研究建立的方法適合于類似檢測條件下菌落總數不確定度的評定。

關鍵詞：藕粉；菌落總數；不確定度評定

中圖分類號 TS207.4 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）15-0132-3

Abstract：[Objective]Evaluate the uncertainty of the aerobic plate count in lotus root starch.[Method]According to the method of GB 4789.2-2016 national food safety standard microbiological examination in food，aerobic plate count and the method of JJF 1059.1-2012 evaluation and expression of uncertainty in measurements to measure the aerobic plate count in lotus root starch and determine the uncertainty components introduced in the experiment. [Result]The combined uncertainty was 0.0475，the expanded uncertainty was 0.095.[Conclusion]This method established in this study can be used in the uncertainty evaluation of aerobic plate count under similar circumstances.

Key words：Lotus root starch；Aerobic plate count；Uncertainty evaluation

1 引言

GB 4789.2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》中規(guī)定菌落總數是指食品檢樣經過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數[1]。菌落總數測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛(wèi)生質量，它反映食品在生產過程中是否符合衛(wèi)生要求，以便對被檢樣品做出適當的衛(wèi)生學評價。菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛(wèi)生質量的優(yōu)劣。

測量不確定度是與測量結果關聯(lián)的一個參數，用于表征合理賦予被測量的值的分散性。國認實〔2016〕33號文最新發(fā)布的《檢驗檢測機構資質認定評審準則》中4.5.21當不確定度與檢測結果的有效性或應用有關，或客戶的指令中有要求，或當對測量結果依據規(guī)范的限制進行符合性判定時，需要提供有關不確定度的信息[2]。本文依據GB 4789.2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》和JJF 1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》對藕粉樣品中菌落總數進行了測定和對測定過程中引入的不確定度分量進行評定。

1 實驗部分

1.1 檢驗依據 GB 4789-2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》。

1.2 儀器和試劑 儀器：電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海精宏實驗設備有限公司）；高壓滅菌鍋（日本RAYAMAHI）；電子天平（上海舜宇恒平科學儀器有限公司）；均質器（天津市恒奧科技發(fā)展有限公司）；超純水機（美國Millipore）；數顯恒溫水浴鍋（金壇市榮華儀器制造有限公司）；1mL移液管；10mL移液管。試劑：平板計數瓊脂（廣州環(huán)凱微生物科技有限公司）；氯化鈉（國藥集團化學試劑有限公司）。

1.3 樣品 藕粉樣品：在江蘇省寶應縣內藕粉生產企業(yè)的藕粉樣品。

1.4 檢測過程 準確稱取25g藕粉樣品于225mL生理鹽水中勻質制成成1[∶]10樣品勻液，用1mL無菌吸管吸取1[∶]10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注入盛有9mL生理鹽水的無菌試管中，混勻，制成1[∶]100的樣品勻液。根據對樣品污染情況，選擇2個適宜稀釋度的樣品勻液，在進行10倍遞增稀釋時，吸取1mL樣品勻液于2個無菌平皿內。同時做空白試驗。及時將冷卻至46℃的平板計數瓊脂傾注平皿，搖勻，翻轉，36℃培養(yǎng)48h。選取30～300CFU之間的平板菌落數計數。

1.5 檢測結果 詳見表1。

2 不確定度

2.1 不確定度來源 菌落總數測定實驗過程中結果的不確定度主要來源：（1）由隨機誤差導入的不確定度：包括樣品重復性測定，涉及取樣、樣品稀釋、菌落分布和人員操作引入的不確定度；（2）由系統(tǒng)誤差導入的不確定度：包括培養(yǎng)基、培養(yǎng)時間、培養(yǎng)溫度等引入的不確定度和計量器具（吸管、天平、量筒）等引入的不確定度[3]。本方法研究稀釋過程中引入的不確定度、加樣體積引入的不確定度和測量重復性引起的不確定度。

2.2 數學模型 計算公式如下：

3 結果

通過以上分析得到藕粉的結果取值區(qū)間為（3.7063±0.095），取反對數取值區(qū)間為（4086，6328）。

4 討論

本方法研究的是稀釋過程中引入的不確定度、加樣體積引入的不確定度和測量重復性引起的不確定度。因為微生物檢測過程是一個動態(tài)的過程，樣品中菌落總數檢測結果存在較大的分散性，如果直接用標準偏差公式進行計算，所得到的不確定度結果并不是適合每個項目的不確定度評定，因此采用取對數的方法進行不確定度評定更適合菌落總數檢測不確定度的評定[5]。

在計算不確定度時，應該根據需要改進數學模型的建立方式，數學計算模型應能反映出不同變量之間的邏輯關系，如果數學模型過于簡單，就不能很好的反映出各種影響不確定度的因素之間的關系，如果沒有充分認識到稀釋倍數和加樣體積的重要作用，就會影響到不確定度計算的可靠性[6]。

此方法能夠有效的分析不確定度，提升實際檢測結果的可靠性，同時適用類似檢測條件下的不確定度評定，為食品中菌落總數的檢測保駕護航。

參考文獻

[1]GB 4789.2-2016食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定[S].

[2]檢驗檢測機構資質認定評審準則[S].中國國家認證認可監(jiān)督管理委員會，2016.

[3]袁平，吳春敏，林仲，等.牛食品中菌落總數測定不確定度評定數學模型的建立[J].預防醫(yī)學論壇，2016，22（7）：540-545.

[4]JJG 196-2006常用玻璃量器檢定規(guī)程[S].

[5]張秀豐，翟碩莉，王雪蓮，等.速凍草莓菌落總數檢驗中不確定度的評定[J].食品安全質量檢測學報，2014，5（6）：1831-1833.

[6]彭永艷.食品檢驗中菌落總數的不確定度評定[J].現(xiàn)代食品，2017，28（8）：81-83.

（責編：張宏民）