胡曉華，馮 玉，陳 影，王婭麗，李艷青

(河南省中醫(yī)院，鄭州 450002)

【方藥研究】

育胎靈煎劑對脾腎虧虛型習慣性流產(chǎn)患者細胞因子的影響

胡曉華，馮 玉，陳 影，王婭麗，李艷青△

(河南省中醫(yī)院，鄭州 450002)

目的：探討育胎靈煎劑對脾腎虧虛型習慣性流產(chǎn)患者免疫功能的調(diào)節(jié)作用。方法：將符合納入標準的60例患者按隨機數(shù)字表法分為治療組30例給予育胎靈煎劑，對照組30例給予孕康口服液，于治療前后采用酶聯(lián)免疫分析法檢測血清中白細胞介素-2(IL-2)、 白細胞介素-4(IL-4)、 白細胞介素-12(I L-12)、白細胞介素-10(IL-10)水平。結(jié)果：治療組及對照組各自與治療前比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性；治療組與對照組治療后比較治療組優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)論：育胎靈煎劑具有調(diào)節(jié)母體免疫功能、提高母胎免疫耐受，從而起到維持妊娠的作用。

習慣性流產(chǎn)； 育胎靈煎劑； 細胞因子； 中醫(yī)藥療法

習慣性流產(chǎn)(habitual abortion,HA)屬于中醫(yī)“滑胎”范疇，占妊娠總數(shù)的10%～15%，其中早期流產(chǎn)占80%以上[1]。其病因較為復雜，嚴重影響婦女的身心健康，故對本病的研究已成為當今醫(yī)學界的熱門課題，對其防治也具有非常重要的現(xiàn)實意義。本研究選擇60例HA患者，以檢測治療組和對照組治療前后細胞因子IL-2、IL-4、IL-12、IL-10水平為指標，探討育胎靈煎劑治療HA的作用機理和優(yōu)化治療方案，讓更多的患者減少痛苦。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年3月至2014年3月門診就診HA患者60例，按隨機數(shù)字表法分為治療組和對照組。治療組30例中年齡最小23歲，最大35歲，平均年齡(29.57±2.98)歲；對照組30例中年齡最小24歲，最大35歲，平均年齡(29.07±3.2)歲；治療組流產(chǎn)胎次最多6次，對照組流產(chǎn)胎次最多5次；2組在年齡構(gòu)成、流產(chǎn)次數(shù)及治療前血清中IL-2和IL-4含量、IL-12、IL-10含量等方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，且治療期間2組用藥時間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標準

1.2.1 西醫(yī)診斷標準 依據(jù)《最新國內(nèi)外疾病診療標準》及高等院校全國規(guī)劃教材《婦產(chǎn)科學》[1]擬定診斷標準：育齡期婦女，3次或3次以上自然流產(chǎn)史發(fā)生在妊娠12周以內(nèi)者；有停經(jīng)史，尿妊娠試驗陽性，B超檢查孕囊或胚胎發(fā)育與孕周相符；排除遺傳、感染因素及生殖器官解剖異常。

1.2.2 中醫(yī)辨證標準 參照《中醫(yī)病證診斷療效標準》[2]及《中醫(yī)婦科學》[3]修訂，符合脾腎虧虛辨證標準。主癥：曾有滑胎病史，孕后腰痛腹墜，舌淡苔白、脈沉而少力；兼癥：陰道下血或畏寒或四末欠溫或頭暈耳鳴或小便頻數(shù)。以上證候主癥必備，另應(yīng)具備次癥1項或以上即可診斷。

1.3 納入標準

符合上述西醫(yī)診斷及中醫(yī)脾腎虧虛辨證標準者；年齡在23～35歲；孕周≤12周；患者知情同意且易于隨訪。

1.4 排除標準

有遺傳、內(nèi)分泌、感染、生殖器官解剖異常等；有呼吸、消化、神經(jīng)、心血管等系統(tǒng)的慢性疾患者；不符合納入標準者。

1.5 治療方法

治療組育胎靈煎劑組成：菟絲子、桑寄生、黨參、黃芪、白術(shù)、山藥、杜仲、黃芩、砂仁、蘇梗、旱蓮草、仙鶴草、炙甘草，由河南省中醫(yī)院制劑室制備，每袋200 ml，每次1袋，每日2次。對照組孕康口服液由浙江亞東制藥有限公司生產(chǎn)(批號國藥準字Z10970068)，每日3次，每次2支，服藥時間均自妊娠第6周確診為宮內(nèi)孕開始至妊娠12周結(jié)束。

1.6 療效判斷標準

根據(jù)《中藥新藥臨床研究指導原則》[4]制定。痊愈：妊娠超過12周，陰道出血停止，小腹疼痛及腰酸脹痛等癥狀消失，B超檢查子宮大小、胚胎發(fā)育與孕周相符，各項檢查證實為正常妊娠；有效：妊娠超過12周，陰道出血、小腹疼痛及腰酸脹痛等癥狀均改善，B超檢查子宮大小、胚胎發(fā)育與孕周相符，各項檢查證實為正常妊娠；無效：陰道出血或陰道出血增多，小腹疼痛及腰酸脹痛等癥狀無減輕或加重，B超檢查子宮大小與孕周基本相符或小于孕周，胚胎發(fā)育不良或停止發(fā)育，再次流產(chǎn)。

1.7 觀察指標

用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測用藥前后2組患者血清中細胞因子IL-2和IL-4、IL-12及IL-10水平的變化。實驗設(shè)備使用帝肯InfiniteF50酶標儀，試劑由上海裕臣生物科技有限公司提供,測定過程均嚴格按照設(shè)備及試劑盒使用說明書操作。

1.8 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 2組病例治療后臨床療效比較

表1顯示，治療組療效優(yōu)于對照組，經(jīng)檢驗，U=2.558，P=0.01<0.05，差異有統(tǒng)計學意義。

表1 2組病例臨床療效比較[例(%)]

注：2組病例治療后臨床療效采用Ridit檢驗

2.2 2組治療前后血清IL-2和IL-4含量比較

表2顯示，治療組與對照組治療前IL-2與IL-4在比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。治療后IL-2水平均小于治療前(P<0.05)，治療組下降水平優(yōu)于對照組P<0.05。用藥后IL-4水平相對于治療前均有所增高且具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，與對照組治療后血清中IL-4含量相比較，治療組增高IL-4含量水平高于對照組P<0.05。

組 別例數(shù)IL-2(ng/l)IL-4(ng/l)治療前治療后治療前治療后治療組30123.30±15.5753.90±3.02★△38.63±11.7383.27±10.96★△對照組30120.63±18.2860.80±9.88★35.03±11.9470.20±18.41★

注：與治療前比較：★P<0.05，與對照組比較：△P<0.05

2.3 2組治療前后血清IL-12和IL-10比較

表3顯示，IL-12與IL-10在治療前治療組與對照組2組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。治療后IL-12水平均小于治療前(P<0.05)，治療組下降水平優(yōu)于對照組(P<0.05)。用藥后IL-10水平相對于治療前均有所增高，且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，與對照組治療后血清中IL-10含量比較，治療組IL-10含量水平高于對照組(P<0.05)。

組 別例數(shù)IL-12(ng/l)IL-10(ng/l)治療前治療后治療前治療后治療組30113.29±42.7157.27±15.32▲*115.23±48.64195.77±50.33▲*對照組30111.93±44.9692.37±19.66▲123.13±47.30145.77±31.55▲

注：與治療前比較：▲P<0.05，與對照組比較：*P<0.05

3 討論

隨著現(xiàn)代醫(yī)學的迅速發(fā)展，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，HA發(fā)病與免疫因素有著較為密切的關(guān)系。正常妊娠時母體的免疫系統(tǒng)通過復雜而精細的免疫機制調(diào)節(jié)而常常處于免疫耐受狀態(tài)，胚胎才會被保護而不至于被母體的免疫系統(tǒng)所排斥。假若孕婦對胚胎半同種抗原識別能力和反應(yīng)性降低，母體將無法產(chǎn)生適當?shù)姆忾]抗體以及保護性抗體，則將會使胚胎遭受免疫攻擊而流產(chǎn)。有學者[5]通過比較正常妊娠與HA孕婦發(fā)現(xiàn)，輔助性T細胞1型/2型(TH1/TH2型)細胞因子失衡決定妊娠結(jié)局。TH1細胞主要分泌IL-2、IL-12、干擾素7(IFN-7)、腫瘤壞死因子α、β (TNF-α、TNF-β)等，主要介導細胞免疫，表現(xiàn)為免疫殺傷作用，對滋養(yǎng)層細胞產(chǎn)生排斥反應(yīng)引起流產(chǎn)；TH2細胞主要分泌IL-4、IL-10等，主要介導體液免疫并抑制細胞免疫，幫助同種異體胎兒不受母體排斥，表現(xiàn)為免疫保護作用。而IL-2和IL-4、IL-12和IL-10分別在介導TH1和TH2的分化中起主要作用。

目前眾多研究表明，補腎健脾中藥能調(diào)節(jié)內(nèi)分泌免疫等多個系統(tǒng)功能，臨床療效較好，且對子代發(fā)育、智力、遺傳無不良影響。但眾多文獻報道多為臨床療效總結(jié)[6-8]，較少從細胞分子生物學水平研究補腎健脾方藥治療本病的機制。筆者通過多年臨床經(jīng)驗認為，本病的病因與正氣虛弱有關(guān)，尤其與腎脾的關(guān)系最為密切，提出脾腎虧虛是本病的主要機理。腎氣盛、脾氣旺則胞宮有所養(yǎng)，沖任有所主；腎氣衰、脾氣虛則胎元不固。故安胎重在補腎以固胎元，是以固攝之法使之行使其封藏之功；健脾使氣血化生充足，得以充養(yǎng)先天腎氣，腎氣足則沖任固，沖任固則胎兒無隕墜之虞。故治療以補腎健脾立法以達到安胎的目的，總結(jié)出經(jīng)驗方育胎靈煎劑，以菟絲子、桑寄生作為君藥，以達補腎安胎之功；以黨參、白術(shù)、黃芪、山藥、杜仲作為臣藥，以奏健脾補腎之效；黃芩、砂仁、蘇梗配合旱蓮草、仙鶴草共為佐藥，以清熱和胃、滋陰止血、理氣安胎；甘草清熱解毒，調(diào)和諸藥為使藥。諸藥合用，使腎氣充則胎有所固，脾氣健則胎有所養(yǎng)。經(jīng)臨床療效比較，治療組療效優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學意義。

本研究通過比較治療前后患者細胞因子水平的變化，發(fā)現(xiàn)HA患者經(jīng)育胎靈煎劑治療后，IL-2、IL-12含量明顯下降，治療組下降水平優(yōu)于對照組；而IL-4、IL-10含量明顯上升，治療組高于對照組。表明育胎靈煎劑通過補腎健脾、清熱安胎達到調(diào)節(jié)母體免疫功能，抑制TH1型分化，同時誘導TH2型分化，促使TH1/TH2型細胞因子的平衡向TH2轉(zhuǎn)換，增強母體對胚胎的免疫保護能力，提高母胎免疫耐受，從而起到維持妊娠的作用。該研究為中醫(yī)藥治療習慣性流產(chǎn)的有效性提供了科學的理論依據(jù)，進一步驗證和充實了中醫(yī)婦科“腎主生殖”理論。

[1] 樂杰.婦產(chǎn)科學[M].7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:83.

[2] 國家中醫(yī)藥管理局.中醫(yī)病證診斷療效標準[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2012:243.

[3] 張玉珍.中醫(yī)婦科學[M].2版.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007:218.

[4] 鄭筱萸.中藥新藥臨床研究指導原則[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2002：253.

[5] M MAKHSEED,R RAGHUPATHY. Fazizih.Th1 and Th2cytokine profiles in ecurrent'aborters with successful pregnancy with subsequent abortions[J].Human Reproduetion,2001,16(10):2219-2226.

[6] 吳昕，周艷艷，申小靜，等.小劑量阿司匹林聯(lián)合固腎健脾法治療不明原因習慣性流產(chǎn)[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志，2009,15(9)：715.

[7] 謝京紅，李海玉，張瑤，等.蔡連香治療復發(fā)性流產(chǎn)的思路和經(jīng)驗[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志，2014,20(12)：1647-1648.

[8] 文樂兮，尤昭玲.尤昭玲中醫(yī)安胎思路的構(gòu)想與實踐[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志，2015,21(4)：398-399.

The Effects of Cytokines in Patients with Habitual Abortion on Deficiency of Spleen and Kidney by Taken Yu-Tai-Ling Decoction

HU Xiao-hua, FENG Yu, CHEN Ying, WANG Ya-li, LI Yan-qing△

(HenanprovincialhospitalofTCM,Zhengzhou450002,China)

objective: Inquiry into the Yu-Tai-Ling decoction on immune function of spleen and kidney deficiency type patients with habitual abortion regulation. Method: Patients met the inclusion criteria of 60 cases, randomly divided into two groups of 30 cases of Yu-Tai-Ling decoction, 30 cases in the control group given pregnancy Kang oral liquid, before and after treatment with enzyme-linked immunosorbent assay method for detection of serum in the white cell between interleukin-2 (IL-2), and white cell between interleukin-4 (IL-4), and white cell between interleukin-12 (IL-12), and white cell between interleukin-10 (IL-10) level. Results: The treatment group and the control group compared with before treatment, no significant differences in comparability of treatment group compared with the control group after the treatment, treatment group than the control group, with significant differences. Conclusion: Yu-Tai-Ling decoction in regulating the mother, fetal immune function, improving maternal-fetal immuno-tolerance, which play a role in maintaining the pregnancy.

Recurrent abortion; Yu-Tai-Ling decoction; Cytokines; traditional Chinese medicine therapy

河南省科技廳科技攻關(guān)項目(112102310315 )

胡曉華(1956-)，女，河南范縣人，主任醫(yī)師，醫(yī)學學士，從事生殖醫(yī)學研究。

△通訊作者：李艷青(1973-)，女，河南南陽人，副主任醫(yī)師，醫(yī)學碩士，從事生殖內(nèi)分泌研究，Tel:0371-60908737,E-mail:lyq3849@163.com。

R714.21

B

1006-3250(2017)04-0674-02

2016-08-24