李碧錦 李軍 凌凱南 季志強(qiáng)

1廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院泌尿外科 530021 南寧

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論 著

雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤復(fù)發(fā)情況及其與癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平的關(guān)系

李碧錦1李軍1凌凱南1季志強(qiáng)1

1廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院泌尿外科 530021 南寧

目的：探討雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危肌層浸潤(rùn)性膀胱腫瘤復(fù)發(fā)情況及其與癌組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、生存素(Survivin)表達(dá)水平的關(guān)系。方法：選取2012年9月～2016年9月收治的高齡高危肌層浸潤(rùn)性膀胱腫瘤患者100例，行雙極等離子切除術(shù)治療并隨訪至少半年。采用免疫組化法檢測(cè)患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平并統(tǒng)計(jì)患者隨訪期間膀胱腫瘤復(fù)發(fā)情況。比較復(fù)發(fā)和無復(fù)發(fā)患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平，分析其與癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平復(fù)發(fā)的關(guān)系及其對(duì)復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值。結(jié)果：100例高齡高危膀胱腫瘤患者隨訪期間復(fù)發(fā)率為16.00%。與無復(fù)發(fā)患者比較，復(fù)發(fā)患者癌組織VEGF、Survivin陽性表達(dá)率均較高(P<0.05)。Spearman無條件相關(guān)分析結(jié)果顯示，高齡高危膀胱腫瘤行雙極等離子切除術(shù)治療患者癌組織VEGF、Survivin陽性表達(dá)率與其復(fù)發(fā)率均呈正相關(guān)(r=0.844, 0.879,P<0.05)。進(jìn)一步診斷性試驗(yàn)分析結(jié)果顯示，高齡高危膀胱腫瘤行雙極等離子切除術(shù)治療患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值良好，其中以兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)的價(jià)值最優(yōu)。結(jié)論：雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤復(fù)發(fā)率較高，與其癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平密切相關(guān)，且與其癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平聯(lián)合預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值良好，因此，其癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平可能作為其復(fù)發(fā)評(píng)估的參考指標(biāo)。

雙極等離子切除術(shù)；高齡；高危；膀胱腫瘤；復(fù)發(fā)；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；生存素；關(guān)系

膀胱癌的臨床發(fā)生率較高，好發(fā)于高齡人群，可嚴(yán)重影響膀胱正常功能，嚴(yán)重者甚至引發(fā)死亡等不良預(yù)后情況[1]。因此，對(duì)膀胱癌進(jìn)行及時(shí)有效的治療十分重要。雙極等離子切除術(shù)是治療膀胱癌的重要方法，其在膀胱癌治療中的應(yīng)用效果已得到多個(gè)研究的肯定[2, 3]。然而膀胱癌術(shù)后極易發(fā)生復(fù)發(fā)，影響療效和預(yù)后[4]。對(duì)膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)進(jìn)行早期評(píng)估干預(yù)，減少復(fù)發(fā)及其相關(guān)不良影響的發(fā)生具有重要意義。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、生存素(Survivin)均是與癌癥密切相關(guān)的因子，且其與膀胱癌的關(guān)系已得到多個(gè)研究的認(rèn)可[5, 6]。VEGF、Survivin亦可能與膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)。因此，我們檢測(cè)了雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤的癌組織VEGF、Survivin表達(dá)情況，并分析了其與復(fù)發(fā)的關(guān)系及其預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)的價(jià)值，旨在通過癌組織VEGF、Survivin表達(dá)檢測(cè)，達(dá)到早期預(yù)知雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，及時(shí)采取干預(yù)措施減少復(fù)發(fā)的發(fā)生，改善療效和預(yù)后，具體研究方法和結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均出現(xiàn)血尿、尿頻、尿急、尿痛，經(jīng)術(shù)前B超、CT、膀胱鏡及診斷性電切病例檢查確診為乳頭狀尿路上皮膀胱腫瘤，腫瘤侵犯超過黏膜層，T2期以上腫瘤，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，年齡60歲以上，臨床評(píng)估手術(shù)耐受并同一手術(shù)治療；排除標(biāo)準(zhǔn)：排除合并嚴(yán)重心肺功能不全或肝腎功能障礙、凝血異常、其他泌尿系統(tǒng)疾病、腫瘤侵犯輸尿管口等患者。選取2012年9月～2016年9月收治的高齡高危膀胱腫瘤患者100例，患者均符合納入標(biāo)準(zhǔn)，其中男62例，女38例，年齡62～81歲，平均(68.58±6.25)歲。最大腫瘤直徑1.9～4.8 cm，平均(3.35±1.16)cm。腫瘤位于膀胱三角區(qū)31例，位于兩側(cè)壁66例，膀胱頸部3例。合并高血壓16例，合并糖尿病11例，合并冠心病6例。試驗(yàn)符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)本院倫理學(xué)委員會(huì)審核批準(zhǔn)，且患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 手術(shù)方法

患者均行雙極等離子切除術(shù)治療：術(shù)前常規(guī)進(jìn)行禁食禁水，取膀胱截石位，在全麻或硬膜外麻醉下完成手術(shù)。手術(shù)采用珠海司邁等離子雙極電切系統(tǒng)，手術(shù)采用膀胱截石位，內(nèi)鏡24號(hào)，外鞘27號(hào)，電切、電凝功率分別為140 W和80 W，以生理鹽水為工作介質(zhì)，經(jīng)尿道緩慢輕柔地插入電切鏡，監(jiān)控下將電切鏡推至膀胱，觀察膀胱情況、輸尿管口情況，確定腫瘤的具體位置、數(shù)目、大小等，對(duì)于較小的合并帶蒂腫瘤從根部橫斷切除，較大腫瘤由冠部向根部逐層切除直至根部，切除范圍均為腫瘤外膀胱組織2 cm，多發(fā)腫瘤的切除順序?yàn)橄刃『蟠?，沖洗器將組織碎片洗出并取出一部分送至本院病理科行病理檢查，電凝止血，觀察無出血后退出電切鏡，留置F20導(dǎo)尿管導(dǎo)尿5～7 d。治療后患者均接受門診隨訪，每3個(gè)月1次，主要觀察患者臨床癥狀和復(fù)發(fā)情況，隨訪截止日期為2017年1月15日，期間無患者失訪，隨訪率100%(100/100)。對(duì)于隨訪期間復(fù)發(fā)患者再次行雙極等離子切除術(shù)治療，操作同上。

1.3 觀察指標(biāo)和檢測(cè)方法

采用免疫組化法檢測(cè)患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平，將切除所得腫瘤組織進(jìn)行石蠟包埋處理，采用切片機(jī)制成4 μm后的連續(xù)切片并制成載玻片，常規(guī)進(jìn)行脫蠟及梯度酒精水化處理，并采用檸檬酸微波抗原熱修復(fù)、雙氧水去氧化酶活性，滴加相應(yīng)抗體后在20℃恒溫箱中孵育過夜，VEGF、Survivin相關(guān)抗體均由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供，以試劑公司提供的陽性切片為陽性對(duì)照；孵育后行DAB顯色，高倍顯微鏡下觀察顯色滿意后行流水沖洗、蘇木精復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片等待觀察。隨機(jī)選取3個(gè)高倍視野，觀察染色的范圍及著色程度，根據(jù)染色強(qiáng)度(無陽性著色、弱、中、強(qiáng)染色)及陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(0、1%～25%、26%～49%、50%～100%)分別計(jì)分為0、1、2和3分，兩項(xiàng)評(píng)分之和為最終結(jié)果，其中0～2分為陰性，3～6分為陽性[7]，VEGF染色定位于細(xì)胞質(zhì)中，Survivin染色定位于細(xì)胞質(zhì)、 細(xì)胞核中，以黃色或棕黃色染色為炎性。并統(tǒng)計(jì)患者隨訪期間膀胱腫瘤復(fù)發(fā)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件，計(jì)數(shù)資料以率的形式表示并采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，采用Spearman無條件相關(guān)分析法分析高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin陽性表達(dá)率與其復(fù)發(fā)率的關(guān)系，采用診斷性試驗(yàn)四格表分析高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤的手術(shù)情況和復(fù)發(fā)情況分析

雙極等離子切除術(shù)手術(shù)時(shí)間23～66 min，平均(36.62±13.55)min，術(shù)中、術(shù)后無明顯出血，所有患者均一次性順利完成手術(shù)切除，術(shù)后住院6～10 d，平均(7.26±1.55)d，術(shù)后無明顯并發(fā)癥發(fā)生。

100例患者隨訪期間出現(xiàn)復(fù)發(fā)患者16例，無復(fù)發(fā)患者84例，隨訪期間復(fù)發(fā)率為16.00%(16/100)。

2.2 復(fù)發(fā)和無復(fù)發(fā)患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平比較

與無復(fù)發(fā)患者比較，復(fù)發(fā)患者癌組織VEGF、Survivin陽性表達(dá)率均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，詳見表1、圖1和圖2。

2.3 高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平與其復(fù)發(fā)率的關(guān)系分析

Spearman無條件相關(guān)分析結(jié)果顯示，高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin陽性表達(dá)率與其復(fù)發(fā)率均呈正相關(guān)。(r=0.844，0.879，P<0.05)。

表1 復(fù)發(fā)和無復(fù)發(fā)患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平比較

是否復(fù)發(fā)例數(shù)VEGF/例(%)陽性陰性Survivin/例(%)陽性陰性有1615(93．75)1(6．25)14(87．50)2(12．50)無8425(29．76)59(70．24)20(23．81)64(76．19)χ2值-22．92924．296P值-<0．05<0．05

圖1 膀胱腫瘤組織VEGF表達(dá)(400×)

圖2 膀胱腫瘤組織Survivin表達(dá)(200×)

2.4 高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值

進(jìn)一步診斷性試驗(yàn)分析結(jié)果顯示，高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值良好，其中以兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)的價(jià)值最優(yōu)，詳見表2。

3 討論

近年來各類泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生不斷增加。膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見惡性腫瘤，多數(shù)為局限于黏膜和固有層的淺表性腫瘤，即非肌肉浸潤(rùn)性腫瘤，常行手術(shù)治療[8]。雙極等離子切除術(shù)是治療膀胱癌的重要方法，可快速有效切除病灶，緩解患者的臨床癥狀，且手術(shù)操作的創(chuàng)傷較小，術(shù)后恢復(fù)快，療效佳[9]。而膀胱腫瘤發(fā)生高齡患者可由于其自身身體機(jī)能減退，免疫力較差，術(shù)后恢復(fù)緩慢等療效欠佳[10]。且膀胱腫瘤切除術(shù)后復(fù)發(fā)較多，臨床復(fù)發(fā)率高，需再次進(jìn)行治療，增加患者痛楚和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，甚至引發(fā)死亡等的發(fā)生，嚴(yán)重影響患者健康狀況和預(yù)后情況[11,12]。本研究亦關(guān)注了高齡高危膀胱腫瘤雙極等離子切除術(shù)后復(fù)發(fā)情況，本研究結(jié)果顯示，其術(shù)后復(fù)發(fā)率高達(dá)16.00%，其復(fù)發(fā)率較高，對(duì)患者健康和生命安全威脅較大，急需改善。因此，對(duì)膀胱腫瘤雙極等離子切除術(shù)后復(fù)發(fā)進(jìn)行早期評(píng)估干預(yù)從而預(yù)防其發(fā)生，減少其帶來的不良影響對(duì)改善其患者的健康水平和預(yù)后均具有重要意義。

表2 高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值

腫瘤的發(fā)生發(fā)展涉及多個(gè)因子，其中VEGF是與腫瘤腫瘤血管形成密切相關(guān)的因子，是腫瘤血管形成刺激因子，可通過與其受體結(jié)合而誘導(dǎo)受體的磷酸化從而促進(jìn)腫瘤血管形成，而腫瘤血管的生成可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，加重癌癥病情，甚至影響預(yù)后[13,14]。因此，VEGF可能與高齡高危膀胱腫瘤雙極等離子切除術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)。生存素(Survivin)亦是與癌癥密切相關(guān)的因子，作為目前發(fā)現(xiàn)的作用最強(qiáng)的凋亡抑制基因，Survivin廣泛表達(dá)于各類腫瘤環(huán)境，可通過抑制終末效應(yīng)因子Caspace 7和Caspace 3及干擾Caspace 9活性達(dá)到抑制腫瘤凋亡的目的，與腫瘤的生物學(xué)行為、分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等均密切相關(guān)，甚至有研究證實(shí)其與腫瘤新生血管的生成相關(guān)，且其與膀胱癌的關(guān)系已得到多個(gè)研究的認(rèn)可[15,16]。因此，Survivin亦可能與膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)。然而目前關(guān)于VEGF、Survivin表達(dá)與高齡高危膀胱腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的具體關(guān)系尚不明確，需進(jìn)一步研究證實(shí)。

因此，本研究采用雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤，觀察了其治療后復(fù)發(fā)情況和癌組織VEGF、Survivin表達(dá)情況，并分析了癌組織VEGF、Survivin表達(dá)與復(fù)發(fā)的關(guān)系及其預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)的價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，高齡高危膀胱惡性腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin陽性表達(dá)率均較高，提示VEGF、Survivin可能與高齡高危膀胱癌相關(guān)。且本研究中雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤術(shù)后出現(xiàn)復(fù)發(fā)患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平明顯較高，提示其組織VEGF、Survivin表達(dá)與其術(shù)后復(fù)發(fā)可能相關(guān)。進(jìn)一步的Spearman無條件相關(guān)分析結(jié)果顯示，高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平與其復(fù)發(fā)率均呈正相關(guān)，高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平可反映去復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，可能用于其復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)。進(jìn)一步診斷性試驗(yàn)分析結(jié)果顯示，高齡高危膀胱腫瘤患者癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)的價(jià)值良好，其中以兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)的價(jià)值最優(yōu)。聯(lián)合檢測(cè)癌組織VEGF、Survivin表達(dá)可達(dá)到早期預(yù)知雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，而及時(shí)采取干預(yù)措施減少復(fù)發(fā)的發(fā)生有助于改善療效和預(yù)后，并減少復(fù)發(fā)后治療支出，研究成果應(yīng)用于臨床的經(jīng)濟(jì)效益亦較好，且癌組織VEGF、Survivin表達(dá)檢測(cè)操作簡(jiǎn)單，易于掌握，取材容易，可在各醫(yī)院推廣應(yīng)用，臨床應(yīng)用前景良好。

綜上所述，雙極等離子切除術(shù)治療高齡高危膀胱腫瘤復(fù)發(fā)率較高且與其癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平密切相關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)其癌組織VEGF、Survivin表達(dá)水平可預(yù)測(cè)其復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，指導(dǎo)臨床早期干預(yù)，以期改善療效和預(yù)后。

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Relationship between cancer tissue VEGF and Survivin expression with the recurrence of elderly patientswith myometrial Infiltrative bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection

LiBijin1LiJun1LingKainan1JiZhiqiang1

(1Department of Urology, the Guangxi Zhuang Autonomous Region Jiangbin Hospital, Nanning 530021, China)

Corresponding author: Li Bijin, 13907869384@139.com

Objective: To investigate the relationship between cancer tissue vascular endothelial growth factor (VEGF) and Survivin expression with the recurrence of elderly patients with myometrial Infiltrative bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection. Methods: 100 cases of elderly patients with myometrial Infiltrative bladder cancer in our hospital from September 2012 to September 2016 were treated with bipolar plasmakinetic resection and followed up for at least half of a year. Immunohistochemical method was applied to detect the VEGF and Survivin expression in cancer tissue of the patients and the recurrence of bladder tumor was observed. VEGF and Survivin expression in cancer tissues of patients with or without bladder tumor recurrence was compared, and relationship between VEGF and Survivin expression in cancer tissues with recurrence was analyzed. Results: The recurrence rate of 100 cases of elderly patients with high-risk bladder tumor was 16%. As compared with the patients without recurrence, VEGF and Survivin positive expression rate in cancer tissues of the patients with recurrent cancer was significantly increased (P<0.05). Spearman unconditional correlation analysis showed that cancer tissue VEGF and Survivin positive expression rate and the recurrence rate of patients with advanced bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection showed a positive correlation (r=0.844, 0.879,P<0.05). Further diagnostic test analysis showed that value of cancer tissue VEGF and Survivin positive expression rate predicting the recurrence of patients with advanced bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection was excellent, in which the value of combination of 2 factors predicting the recurrence was the best. Conclusions: Recurrence rate in patients with advanced bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection is high and related to the cancer tissue VEGF and Survivin expression, and the value of cancer tissue VEGF and Survivin expression in combination predicting the recurrence was excellent, therefore, the cancer tissue VEGF and Survivin expression may be reference index for the assessment of the cancer recurrence of the patients.

bipolar plasmakinetic resection; elderly; high risk; bladder neoplasms; recurrence; vascular endothelial growth factor; Survivin; relationship

李碧錦，13907869384@139.com

2017-04-07

R737.14

A

10.19558/j.cnki.10-1020/r.2017.04.010