馬維思,楊 斌，嚴(yán)世武，王 馨，董志淵，李林玉，張新華，楊麗英*

(1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所，云南 昆明 650205；2.大理州農(nóng)業(yè)科學(xué)推廣研究院，云南 大理 671005)

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滇重樓莖稈軟腐病病原鑒定

馬維思1,楊 斌1，嚴(yán)世武1，王 馨1，董志淵1，李林玉1，張新華2，楊麗英1*

(1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所，云南 昆明 650205；2.大理州農(nóng)業(yè)科學(xué)推廣研究院，云南 大理 671005)

【目的】明確滇重樓莖稈軟腐病的病原，以期為該病的防治提供依據(jù)。【方法】通過(guò)田間調(diào)查采樣，初步掌握滇重樓莖稈軟腐病的發(fā)生規(guī)律，通過(guò)稀釋分離、柯赫氏法則驗(yàn)證獲得病原菌，基于形態(tài)特征和16S rDNA、gyrB、rpoB基因序列特征對(duì)病原菌進(jìn)行鑒定?！窘Y(jié)果】從發(fā)病植株上分離出1株細(xì)菌，經(jīng)柯赫氏法則驗(yàn)證為滇重樓莖稈軟腐病病原菌，基于形態(tài)和分子生物學(xué)特征將其鑒定為胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種Pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum?！窘Y(jié)論】胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種P.carotovorumsubsp.carotovorum是滇重樓莖稈軟腐病的病原菌。

滇重樓；莖稈軟腐??；病原鑒定；胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種

【研究意義】滇重樓ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz是百合科重樓屬多年生草本植物，主要分布在中國(guó)的云南、四川、貴州以及緬甸北部等地[1]，是2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的2種重樓基源植物之一，主要用于疔瘡癰腫，咽喉腫痛，蛇蟲(chóng)咬傷，跌撲傷痛，驚風(fēng)抽搐[2]，是“云南白藥”、“宮血寧”、“季德勝蛇藥”等藥品的主要成分之一[3]。【前人研究進(jìn)展】由于野生資源稀缺，近年來(lái)以云南省為主開(kāi)展了大量有關(guān)滇重樓人工栽培技術(shù)的研究推廣，據(jù)李恒等2015年報(bào)道，云南境內(nèi)人工種植的滇重樓面積已達(dá)1333.33 hm2[4]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前，一種未見(jiàn)報(bào)道的莖稈軟腐病在云南麗江、大理、楚雄、昆明、紅河等滇重樓主要產(chǎn)區(qū)出現(xiàn)，局部地塊發(fā)病嚴(yán)重，造成生育期的滇重樓植株莖稈腐爛、植株倒伏，由于對(duì)該病還缺乏了解，尚無(wú)有效的防治方法，該病已對(duì)滇重樓種植形成較大威脅?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究對(duì)滇重樓莖稈軟腐病的發(fā)生特點(diǎn)進(jìn)行調(diào)查，并對(duì)病原菌進(jìn)行分離鑒定，以期為該病的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

滇重樓莖稈軟腐病病株于2014年7月采自云南大理云龍，經(jīng)云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所楊斌副研究員鑒定為滇重樓ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz。

肉汁凍培養(yǎng)基：牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，葡萄糖10 g，瓊脂粉17 g，水1000 mL[5]。

主要試劑：Omega D3350細(xì)菌DNA小量提取試劑盒購(gòu)自廣州飛揚(yáng)生物工程有限公司；2 X PCR Master(Taq，染料)即用PCR擴(kuò)增試劑盒購(gòu)自生工生物工程(上海)股份有限公司；引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成，分別是細(xì)菌16S rDNA通用引物27F(5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)、1492R(5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′)[6]，rpoB基因引物rpoBup(5′-GACATCGACCACYTSGGCAACC-3′)、rpoBlow(5′-ACGGCCTGACGYWKCATGTTCG-3′)，革蘭氏陰性菌gyrB基因通用引物Up-1G-(5′-YGCSGGCGGYAAGTTCGA-3′)、UP-2G-(5′-CCRTCGACGTCVGCRTCGGT-3′)[7]。

1.2 方法

1.2.1 田間病害調(diào)查 2013-2015年，對(duì)云南西部、西北部、中部、東南部等多個(gè)滇重樓種植基地進(jìn)行調(diào)查，了解滇重樓莖稈軟腐病的發(fā)生情況和發(fā)病特點(diǎn)。

1.2.2 病原菌分離 采集剛發(fā)生軟腐病的新鮮滇重樓莖稈，自來(lái)水沖洗去除表面泥土，75 %酒精擦拭表面，接種針挑取少量?jī)?nèi)部軟腐組織于1.5 mL滅菌離心管中，加1 mL無(wú)菌水混勻獲得病菌母液，用無(wú)菌水梯度稀釋5次，每次稀釋10倍，分別取每個(gè)濃度梯度的菌液50 μl，涂布于肉汁凍培養(yǎng)皿上，25 ℃培養(yǎng)，待長(zhǎng)出單個(gè)菌落后，劃線轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)皿中。

1.2.3 致病性測(cè)定 2015年5月滇重樓出苗期，取16株長(zhǎng)勢(shì)一致的7年生滇重樓，自來(lái)水沖洗去除表面泥土，在每株的莖稈和根狀莖的結(jié)合處用解剖針刺10次，深度約3 mm，取其中8株浸泡在分離到的細(xì)菌菌液中，15 min后取出種植于花盆中、澆透水(每盆2株，栽培土為經(jīng)121 ℃濕熱滅菌30 min的紅壤土)，另外8株作為對(duì)照用無(wú)菌水浸泡15 min，其他操作同細(xì)菌接種組。將栽好的全部植株置于蔭棚中，觀察發(fā)病情況。

1.2.4 病原菌鑒定 經(jīng)致病性測(cè)定確認(rèn)病原細(xì)菌后，掃描電鏡觀察菌體特征。

利用肉汁凍培養(yǎng)液(不加瓊脂粉的肉汁凍培養(yǎng)基)，25 ℃、140 r/min搖床培養(yǎng)病原菌48 h，10 000 r/min離心10 min，取沉淀，根據(jù)Omega D3350細(xì)菌DNA小量提取試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行DNA提取。用2 X PCR Master(Taq，染料)即用PCR擴(kuò)增試劑盒，對(duì)病原菌的16S rDNA、gyrB和rpoB基因進(jìn)行擴(kuò)增。16S rDNA引物為27F、1492R，PCR擴(kuò)增程序：94 ℃預(yù)變性3 min，94 ℃變性45 s，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min，30個(gè)循環(huán)，72 ℃補(bǔ)平7 min，4 ℃終止反應(yīng)[6]。除退火溫度不同外，gyrB、rpoB基因的PCR擴(kuò)增程序同16S rDNA，gyrB基因引物為Up-1G-、UP-2G-，退火溫度為60 ℃，rpoB基因引物為rpoBup、rpoBlow，退火溫度為62 ℃[7]。PCR產(chǎn)物經(jīng)1 %瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后送生工生物工程(上海)股份有限公司進(jìn)行雙向測(cè)序。

測(cè)序結(jié)果在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)，選擇部分與待鑒定菌株序列同源性較高的序列，經(jīng)過(guò)CLASTALX 1.83序列比對(duì)，利用MEGA6.06軟件，采用NJ (鄰接法 )法分別構(gòu)建16S rDNA、gyrB基因和rpoB基因的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，系統(tǒng)樹(shù)各分支的置信度用bootstrap test (自舉檢驗(yàn)法)檢驗(yàn)，共進(jìn)行1000次循環(huán)，根據(jù)Kimura-2參數(shù)計(jì)算各株遺傳距離值，基于系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)對(duì)病原菌進(jìn)行鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 滇重樓莖稈軟腐病的特點(diǎn)及危害

滇重樓為草本宿根植物，一年出苗一次長(zhǎng)出地上莖稈，發(fā)生莖稈軟腐病的都為5年生以上能開(kāi)花繁殖的植株，發(fā)病時(shí)間為植株出苗至葉展平時(shí)期，即每年的4-7月(不同區(qū)域的滇重樓由于氣候差異導(dǎo)致出苗時(shí)間不同，即使同一地塊中的不同植株出苗時(shí)間也會(huì)有較大差異)，當(dāng)葉展平、莖稈停止長(zhǎng)高后發(fā)病很少。發(fā)病起始位置為近地面莖稈基部與根狀莖的結(jié)合處，首先在莖稈基部形成水浸狀病斑，后軟化，莖內(nèi)部開(kāi)始腐爛，產(chǎn)生刺激性臭味，發(fā)病部位沿著維管束向上蔓延造成整個(gè)莖稈稀軟腐爛，葉片萎蔫、植株倒伏(圖1)。

滇重樓出苗時(shí)莖稈肉質(zhì)，含水量高、木質(zhì)化程度低，部分植株出苗時(shí)由于生長(zhǎng)過(guò)快、吸水過(guò)多會(huì)導(dǎo)致莖基部脹裂，利于病原菌的侵入，所以田間發(fā)生軟腐病的多是莖稈較粗、生長(zhǎng)旺盛的植株。該病通常不造成滇重樓地下根狀莖的完全壞死，但植株發(fā)病會(huì)使地上部分腐爛死亡，存活的根狀莖至少要1年后才能出苗，對(duì)植株生長(zhǎng)造成較大影響。

經(jīng)過(guò)調(diào)查，在云南西部的大理云龍縣、西北部的麗江玉龍縣、中部的昆明嵩明縣、楚雄武定縣以及東南部的紅河元陽(yáng)縣、文山馬關(guān)縣等地的多個(gè)滇重樓種植基地，都有莖稈軟腐病的發(fā)生，發(fā)病較重的地塊發(fā)病率可達(dá)10 %，同一塊地連續(xù)種植滇重樓的時(shí)間越長(zhǎng)，發(fā)病越趨嚴(yán)重。目前滇重樓種子價(jià)格昂貴、供不應(yīng)求，滇重樓植株一旦發(fā)生莖稈軟腐病，地上部分完全壞死，造成當(dāng)年種子絕收，后續(xù)幾年種子產(chǎn)量下降，直接影響種植收益。

左：田間發(fā)病癥狀；右：室內(nèi)人工接種致病癥狀Left: Plant naturally infected in field; Right: Plant infected by artificial inoculation圖1 滇重樓莖稈軟腐病癥狀Fig.1 Typical stem soft rot symptoms of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis

2.2 病原菌形態(tài)特征與致病性測(cè)定

發(fā)生軟腐病的滇重樓莖稈稀軟腐爛，具刺激性臭味，顯微鏡下觀察可見(jiàn)大量桿狀、快速運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌。經(jīng)稀釋分離獲得一種編號(hào)為yunlong-xj的細(xì)菌，該菌在肉汁凍培養(yǎng)基上菌落圓形、光滑、乳白色、半透明，菌落邊緣光滑或呈波狀，菌落中央有略帶乳黃色的瘤狀突起，使整個(gè)菌落呈荷包蛋狀(圖2左)。掃描電鏡下觀察，菌體桿狀，大小1.37～2.02(平均1.68±0.23)μm×0.46～0.54(平均0.49±0.03)μm(圖2右)。

7年生滇重樓植株接種yunlong-xj后，第2天開(kāi)始出現(xiàn)典型的軟腐病癥狀(圖1右)，從病組織中再次分離獲得菌落形態(tài)與yunlong-xj一致的細(xì)菌。而無(wú)菌水接種的對(duì)照組植株能夠正常生長(zhǎng)，說(shuō)明yunlong-xj為滇重樓軟腐病的病原菌。

2.3 病原菌分子鑒定

2.3.1 基于16S rDNA的病原菌鑒定 16S rDNA編碼原核生物核糖體小亞基 rRNA(16S rRNA)，是細(xì)菌分類學(xué)研究中最常用、最有用的“分子鐘”，幾乎可以對(duì)所有的細(xì)菌進(jìn)行屬水平上的鑒定[8]，一般來(lái)講，在種分類等級(jí)上，如果兩個(gè)分類單位間的 16S rDNA 序列同源性大于97.5 %，可視為與模式菌株同種[9]。

菌株yunlong-xj經(jīng)PCR擴(kuò)增、測(cè)序獲得748 bp16S rDNA片段，將其在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)，比對(duì)出的同源序列均屬胡蘿卜軟腐果膠桿菌(Pectobacteriumcarotovorum)，同源性全部高達(dá)99 %以上，大部分同源菌株為胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種(P.carotovorumsubsp.carotovorum)。將菌株yunlong-xj與從GenBank中獲取的同源性較高的部分序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，結(jié)果如圖3，菌株yunlong-xj屬于P.carotovorumsubsp.carotovorum分支，與胡蘿卜軟腐果膠桿菌其他亞種以及Pectobacterium屬的其他種明顯區(qū)分，說(shuō)明滇重樓軟腐病病原細(xì)菌yunlong-xj最可能是P.carotovorumsubsp.carotovorum。

左：肉汁凍培養(yǎng)基上的菌落特征；右：掃描電鏡下的菌體特征Left: Conlony characteristic of the pathogen in Nutrient Agar medium; Right: Morphological characteristics of the pathogenic bacteria under scanning electron microscope圖2 滇重樓軟腐病病原細(xì)菌形態(tài)特征Fig.2 Morphological characteristics of bacterium that causing stem soft rot of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis

圖3 基于16S rDNA序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.3 Neigbor-joining dendrogram depicting the estimated phylogenetic relationships based on 16S rDNA sequences

2.3.2 基于gyrB基因的病原菌鑒定gyrB基因是編碼細(xì)菌DNA解旋酶β亞單位的基因，進(jìn)化速度比16S rRNA基因快，在區(qū)分和鑒定細(xì)菌近緣種方面，比非蛋白編碼基因16S rRNA 具有更高的分辨率，適用于近緣菌株的區(qū)別和鑒定[10]。

經(jīng)PCR擴(kuò)增、測(cè)序獲得yunlong-xj 1034 bp的gyrB基因片段，經(jīng)BLAST比對(duì)，同源性大于90 %的菌株全部為Pectobacterium屬，同源性最高的菌株序列編號(hào)為KJ818399(P.carotovorumsubsp.carotovorum)，同源性為99.8 %?；趃yrB基因序列，將菌株yunlong-xj與從GenBank中獲取的同源性較高的部分序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，結(jié)果如圖4，菌株yunlong-xj屬于P.carotovorumsubsp.carotovorum分支，能與P.carotovorum的其他亞種以及Pectobacterium屬的其他種區(qū)分，說(shuō)明滇重樓軟腐病病原細(xì)菌yunlong-xj應(yīng)為P.carotovorumsubsp.carotovorum，與基于16S rDNA的鑒定結(jié)果一致。

圖4 基于細(xì)菌gyrB序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.4 Neigbor-joining dendrogram depicting the estimated phylogenetic relationships based on gyrB gene sequences

圖5 基于細(xì)菌rpoB序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.5 Neigbor-joining dendrogram depicting the estimated phylogenetic relationships based on rpoB gene sequences

2.3.3 基于rpoB基因的病原菌鑒定rpoB基因是細(xì)菌RNA聚合酶β亞基的編碼基因，存在于所有細(xì)菌中，比16S rRNA基因的區(qū)分能力更強(qiáng)，因此常被用來(lái)進(jìn)行細(xì)菌的系統(tǒng)進(jìn)化分析與分類鑒定研究[11]。

經(jīng)PCR擴(kuò)增、測(cè)序獲得yunlong-xj 666 bp的rpoB基因片段序列，將其在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì)，同源性大于95 %的序列全部為Pectobacterium屬，同源性最高的菌株序列編號(hào)為KJ818447(P.carotovorumsubsp.carotovorum)，與yunlong-xj僅有1 bp的差異。將菌株yunlong-xj與從GenBank中獲取的同源性較高的rpoB基因序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，結(jié)果如圖5，菌株yunlong-xj屬于胡蘿卜軟腐果膠桿菌P.carotovorumsubsp.carotovorum分支，能與P.carotovorum的其他亞種以及Pectobacterium屬的其他種區(qū)分，該結(jié)果與基于16S rDNA、gyrB基因的鑒定結(jié)果一致。

根據(jù)病原菌的形態(tài)特征、16S rDNA、gyrB基因、rpoB基因序列，將滇重樓莖稈軟腐病的病原菌鑒定為胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種P.carotovorumsubsp.carotovorum。

3 討 論

胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種(Pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum)原名胡蘿卜軟腐歐文氏菌胡蘿卜亞種(Erwiniacarotovorumsubsp.carotovorum)[12]，是一種寄主廣泛的植物病原細(xì)菌，能造成胡蘿卜、土豆、大白菜、洋蔥、魔芋、人參等[13]多種作物的軟腐病，在世界范圍內(nèi)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失[14-17]。該菌可以在植物表面附生或在土壤、水體里腐生，病原菌從植物的自然裂口、傷口等侵入后，通常潛伏在寄主植物的維管組織、薄壁組織及細(xì)胞間隙間，當(dāng)環(huán)境條件適宜時(shí)大量繁殖，分泌果膠酶等胞外酶使寄主植物細(xì)胞壁和細(xì)胞間的連接分解，造成組織解體形成軟腐[14,18]。

滇重樓的人工種植主要集中在云南，開(kāi)展規(guī)?；耘鄡H有10多年的時(shí)間，經(jīng)調(diào)查，莖稈軟腐病已經(jīng)在云南主要的滇重樓種植區(qū)域出現(xiàn)，尚無(wú)有效的防治方法，其危害才初步顯現(xiàn)。田間觀察發(fā)現(xiàn)，部分生長(zhǎng)過(guò)快的滇重樓植株莖稈基部常出現(xiàn)脹裂，植株容易倒伏，而發(fā)生莖稈軟腐的滇重樓植株通常莖稈較粗、生長(zhǎng)較快，通常從莖稈基部開(kāi)始腐爛，說(shuō)明人工種植條件下，水肥過(guò)足造成的滇重樓生長(zhǎng)過(guò)快，是誘發(fā)滇重樓莖稈軟腐病的重要原因，因此生產(chǎn)上要均衡施肥，適當(dāng)控制氮肥的用量，培育壯苗。軟腐病很難依靠使用化學(xué)藥劑來(lái)防治，幾乎只能依靠田間衛(wèi)生管理和其他農(nóng)業(yè)防治方法來(lái)實(shí)現(xiàn)[19]，生產(chǎn)實(shí)踐中，應(yīng)杜絕從軟腐病發(fā)生嚴(yán)重的基地調(diào)運(yùn)種苗，加強(qiáng)田間衛(wèi)生管理，避免積水，發(fā)現(xiàn)病株應(yīng)及時(shí)清除銷毀，并用生石灰對(duì)苗穴進(jìn)行消毒，冬天植株倒苗后應(yīng)移除遮陽(yáng)網(wǎng)，利用陽(yáng)光進(jìn)行田間消毒。一些滇重樓采種圃，開(kāi)始的幾年沒(méi)有軟腐病發(fā)生，經(jīng)過(guò)多年連作后軟腐病發(fā)生日趨嚴(yán)重，因此進(jìn)行適當(dāng)?shù)妮喿饕约胺N源更新對(duì)預(yù)防滇重樓莖稈軟腐病是必要的。由于P.carotovorumsubsp.carotovorum寄主廣泛，除了攜帶病原的滇重樓作為傳染源外，病原菌還可能來(lái)源于當(dāng)?shù)胤N植的其他作物，因此要避免選擇發(fā)生過(guò)軟腐病的地塊種植滇重樓，栽種前要對(duì)種苗、土壤進(jìn)行消毒。

4 結(jié) 論

本文首次報(bào)道滇重樓莖稈軟腐病，該病已在云南主要的滇重樓產(chǎn)區(qū)出現(xiàn)，局部地塊造成嚴(yán)重危害，其病原菌是胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種(P.carotovorumsubsp.carotovorum)，該菌引起的大白菜、土豆等多種作物軟腐病已在世界范圍內(nèi)發(fā)生且難以防治，滇重樓是一種馴化時(shí)間較短的藥用植物，具有重要的藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，隨著種植面積的不斷增加，各種病害問(wèn)題日漸凸顯，應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)研究。

致 謝：本研究在試驗(yàn)過(guò)程中得到云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所季鵬章博士的幫助，在此表示感謝！

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(責(zé)任編輯 王家銀)

Pathogen Identification ofParispolyphyllaSmith var.yunnanensisStem Soft Rot

MA Wei-si1, YANG Bin1, YAN Shi-wu1, WANG Xin1, DONG Zhi-yuan1, LI Lin-yu1,ZHANG Xin-hua2, YANG Li-ying1*

(1.Institute of Medicinal Plants, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Yunnan Kunming 650205, China; 2.Dali Institute of Agricultural Sciences and Extension, Yunnan Dali 671005, China)

【Objective】The objective of this study is to identify the pathogen of stem soft rot ofParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz, and to know how the disease occurred as well. 【Method】The pathogen was isolated from tissues of soft rot stem ofP.polyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz, tested and verified with Koch's postulates, and identified based on morphological and 16S rDNA,gyrB,rpoBgenes sequence. 【Result】the pathogen was identified asPectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum. 【Conclusion】P.carotovorumsubsp.carotovorumis the pathogen of stem soft rot ofP.polyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.

ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz; Stem soft rot; Pathogen Iidentification;Pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum

1001-4829(2017)7-1582-06

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.020

2015-08-05

云南省科技創(chuàng)新強(qiáng)省計(jì)劃項(xiàng)目“高山藥材優(yōu)良種源繁育、選育及野生藥材引種馴化集成創(chuàng)新研究與示范基地建設(shè)”(2014AE015)；云南省科技創(chuàng)新人才計(jì)劃(2015HB102)；云南省科技惠民計(jì)劃“濕熱區(qū)林下藥材生態(tài)復(fù)合種植及種子種苗繁育關(guān)鍵技術(shù)研究與示范”(2016RA057)

馬維思(1986-)，回族，男，云南文山人，助理研究員，碩士，主要從事藥用植物栽培與保護(hù)研究，E-mail：masilaoq@aliyun.com，Tel：0871-65033441，*為通訊作者：楊麗英，E-mail:daliyangly@163.com。

S567.239

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