汪楊++沈佳特++何開勇++王嫣

摘要：依據(jù)GB 4789.2-2010《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》以及相關(guān)統(tǒng)計學方法，評價了10份不同奶粉樣品中菌落總數(shù)不確定度。結(jié)果表明，可用指數(shù)法對樣品的菌落總數(shù)檢測結(jié)果的不確定度做出較好的評估。

關(guān)鍵詞：奶粉；菌落總數(shù)；不確定度

中圖分類號：TS252.51；TS201.3 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2017）13-2521-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.13.031

Uncertainty Evaluation of Aerobic Plate Count in Milk Powder

WANG Yang， SHEN Jia-te， HE Kai-yong， WANG Yan

（Testing Centre for Biosafety， Hubei Institute for Food and Drug Control， Wuhan 430064， China）

Abstract： According to JJF 1059.1-2012 Evaluation and Expression of Uncertainty in Measurement and GB 4789.2-2010 Food Microbiological Examination：Aerobic Plate Count and related statistical methods， uncertainty of aerobic plate count in 10 different milk powder samples were evaluated. The results showed that， the index method could well evaluated uncertainty of aerobic plate count in samples， which was suitable for the uncertainty evaluation of aerobic plate count in the daily work.

Key words： milk powder； aerobic plate count； uncertainty

菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)[1]。菌落總數(shù)的檢測結(jié)果用數(shù)值表示，一定程度反映了食品被細菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量，是評價食品微生物質(zhì)量的重要指標。在CNAS-CL07：2011《測量不確定度的要求》[2]中指出，檢測實驗室應有能力對每一項有數(shù)值要求的測量結(jié)果進行不確定度評估，對于不同的檢測項目和檢測對象，可以采用不同的評估方法。由于微生物在樣品中分布不均勻，菌落總數(shù)檢測誤差的問題更為突出，因此對食品中菌落總數(shù)進行測量不確定度評價，是實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制的一部分，對提供準確可靠的數(shù)據(jù)具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

奶粉10份；平板計數(shù)瓊脂為北京陸橋技術(shù)有限責任公司生產(chǎn)。

1.2 檢驗方法

按《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》（GB 4789.2-2010）規(guī)定，無菌取樣25 g，加入225 mL滅菌生理鹽水中制成1∶10的樣品稀釋液，再用1 mL滅菌吸管吸取1∶10的樣品稀釋液1 mL，沿管壁緩慢注于盛有9 mL滅菌生理鹽水的無菌試管中，振搖試管使其混合均勻，制成 1∶100的樣品勻液，以此類推，制備10倍系列稀釋樣品勻液。選取2～3個適宜的稀釋級，吸取各稀釋度的稀釋樣品勻液1 mL于無菌培養(yǎng)皿中，每個稀釋度接種2個平皿，同時分別取1 mL滅菌生理鹽水做空白對照。將約15 mL冷卻至46 ℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36 ℃培養(yǎng)48 h。培養(yǎng)結(jié)束后，計算并報告菌落總數(shù)。

3 討論

不確定度的評定有測量不確定度的A類評定和測量不確定度的B類評定。測量不確定度的A類評定，指對在規(guī)定測量條件下測得的量值，用統(tǒng)計分析的方法進行的測量不確定度分量的評定。測量不確定度的B類評定，指用不同于測量不確定度A類評定的方法進行的測量不確定度分量的評定[4]。測量不確定度評定要全面考慮不確定度的來源，力求合理評定各個分量的數(shù)值，避免不適當?shù)母吖阑虻凸?，保持測量體系的穩(wěn)定。

建立正確的數(shù)學模型是開展測量不確定度評定的基礎(chǔ)。由于菌落總數(shù)檢測結(jié)果發(fā)散性大、非正態(tài)分布，不適用于直接計算其標準差，因而采用指數(shù)法來統(tǒng)計分析這類分散性大的菌落總數(shù)數(shù)據(jù)。本次評定充分考慮人員操作變動性、菌落不均勻分布的影響，對樣品進行重復測定，引入重復性影響因子；同時考慮加樣稀釋和取樣引入的不確定度。

菌落總數(shù)是食品微生物檢驗的常規(guī)項目之一，其限量標準根據(jù)產(chǎn)品類型的不同，可能低至10 CFU/g，也可高達數(shù)萬CFU/g。當結(jié)果處于臨界值時，其取值區(qū)間就尤為重要[5]。本次評定可適用于本實驗室的任何一次試驗，為奶粉中菌落總數(shù)檢驗結(jié)果判定奠定了基礎(chǔ)。通過本次評定可看出，菌落總數(shù)不確定度以由重復測定引入的A類不確定度為主要來源。由此可見，提高操作人員的技能，制定嚴格的操作規(guī)程，對降低菌落總數(shù)測定中的不確定度有著重要的作用。

參考文獻：

[1] GB 4789.2-2010，食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定[S].

[2] CNAS-CL07：2011，測量不確定度的要求[S].

[3] 袁 平，吳春敏，林 仲，等.食品中菌落總數(shù)測定不確定度評定數(shù)學模型的建立[J].預防醫(yī)學論壇，2016，22（7）：540-545.

[4] 鄭 萍，丁 珵，武利平，等.化妝品菌落總數(shù)指標測量不確定度的評定[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2015，25（22）：3866-3874.

[5] 陳彩彥，陳丹萍，鄧建娣.食品中菌落總數(shù)測定的不確定度分析[J].食品安全導刊，2016（21）：54.