李大鵬，孫黨輝，張春茹，魏 林，那世敬

(1．哈爾濱市第一醫(yī)院 a．心內(nèi)科重癥監(jiān)護室;b．心內(nèi)一科;c．心內(nèi)四科，黑龍江 哈爾濱 150010;2．哈爾濱醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心內(nèi)五科，黑龍江 哈爾濱 150010)

通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機制影響研究

李大鵬1a，孫黨輝2，張春茹1b，魏 林1b，那世敬1c△

(1．哈爾濱市第一醫(yī)院 a．心內(nèi)科重癥監(jiān)護室;b．心內(nèi)一科;c．心內(nèi)四科，黑龍江 哈爾濱 150010;2．哈爾濱醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心內(nèi)五科，黑龍江 哈爾濱 150010)

目的 探討通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機制的影響。方法自發(fā)性高血壓大鼠50只，分為模型組、陽性對照組、通心絡(luò)低劑量組、通心絡(luò)中劑量組、通心絡(luò)高劑量組各10只。模型組大鼠給予等劑量生理鹽水灌胃，每日1次;陽性對照組給予替米沙坦50 mg/(kg·d)，每日1次;通心絡(luò)低、中、高劑量組分別給予通心絡(luò)0.5、1.0、2.0 mg/(kg·d)，每日1次。各組大鼠均連續(xù)灌胃12周。觀察給藥8周末各組血管內(nèi)皮功能指標、炎癥指標及血壓變化。結(jié)果陽性對照組和通心絡(luò)各劑量組內(nèi)皮素(ET)、白介素－6(IL-6)、腫瘤壞死因子－α(TNF-α)、C反應(yīng)蛋白(CRP)及收縮壓水平低于模型組，NO水平高于模型組;通心絡(luò)中劑量組和高劑量組ET、IL-6、TNF-α、CRP及收縮壓低于陽性對照組和通心絡(luò)低劑量組，NO水平高于陽性對照組及通心絡(luò)低劑量組;且高劑量組ET、IL-6、TNF-α、CRP及收縮壓低于中劑量組，NO水平高于中劑量組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結(jié)論通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠降壓效果明顯，其作用機制可能與改善血管內(nèi)皮功能、炎癥因子相關(guān)。

通心絡(luò)膠囊;自發(fā)性高血壓;血管內(nèi)皮功能;炎癥因子

高血壓是常見的一種疾病，主要以動脈血壓持續(xù)上升為主要表現(xiàn)的慢性疾病，且其發(fā)病率呈不斷上升趨勢，常會引起腎、腦、心等重要器官的病變且出現(xiàn)嚴重的后果［1～3］。通心絡(luò)膠囊是按照中醫(yī)理論研制的一種中藥復(fù)方制劑，具有益氣活血通絡(luò)功效，可改善內(nèi)皮功能、抗動脈粥樣硬化等作用［4，5］。本研究旨在探討通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機制的影響，旨在能夠為臨床和基礎(chǔ)研究提供一定參考價值。

1 材料與方法

1.1 實驗動物2014年1月至2016年1月，自發(fā)性高血壓大鼠50只，購于上海斯萊克實驗動物有限責任公司，動物許可證號:SCXK(滬)2007-0005，清潔級，雌雄各半，體質(zhì)量(200.48±20.18)g，，自由飲食、飲水，維持室溫為23～25℃，相對濕度70%，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。分為模型組、陽性對照組、通心絡(luò)低劑量組、通心絡(luò)中劑量組及通心絡(luò)高劑量組各10只。

1.2 主要試劑和儀器內(nèi)皮素(ET)和一氧化氮(NO)試劑盒(購于上海酶聯(lián)生物技術(shù)有限公司)，白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C 反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒(購于武漢博士德生物工程有限公司)。通心絡(luò)膠囊(石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格:每粒裝0.26 g);替米沙坦片(宜昌長江藥業(yè)有限公司，規(guī)格:40 mg)。BSA6202 S精密電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)，7180型全自動生化分析儀(日本日立公司)，ST-40型低溫冷凍離心機(美國Thermo公司)。

1.3 方法模型組大鼠給予等劑量生理鹽水灌胃，每日1次;陽性對照組給予替米沙坦50 mg/(kg·d)，每日1次;通心絡(luò)低、中、高劑量組分別給予通心絡(luò) 0.5、1.0、2.0 mg/(kg·d)，每日 1 次。連續(xù)給藥8周。血清標本采集于給藥8周末:采用烏拉坦麻醉，腹主動脈取血6 ml置入 EP管中，低溫以3000 r/min離心10 min，分離血清，于－20℃保存待測。

1.4 觀察指標①血管內(nèi)皮功能指標:取上述血清標本，采用放射免疫法測定ET含量，采用硝酸還原酶比色法檢測大鼠血清中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量來間接反映NO含量;②炎癥因子:采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA 法)測定 IL-6、TNF-α、CRP 含量;③采用智能無創(chuàng)血壓測量大鼠尾動脈血壓，以3次測量的平均值為血壓值。

1.5 統(tǒng)計學方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標準差表示;兩兩比較采用t檢驗;計數(shù)資料的比較采用卡方檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血管內(nèi)皮功能指標水平比較陽性對照組和通心絡(luò)各劑量組 ET、IL-6、TNF-α、CRP水平低于模型組，NO水平高于模型組;通心絡(luò)中劑量組和高劑量組 ET、IL-6、TNF-α、CRP低于陽性對照組和通心絡(luò)低劑量組，NO水平高于陽性對照組及通心絡(luò)低劑量組;且高劑量組 ET、IL-6、TNF-α、CRP低于中劑量組，NO水平高于中劑量組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 各組大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥因子指標水平比較

2.2 各組大鼠收縮壓比較通心絡(luò)低劑量組和陽性對照組收縮壓比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);陽性對照組和通心絡(luò)各劑量組收縮壓低于模型組;中劑量組和高劑量組收縮壓低于陽性對照組和低劑量組;且高劑量組收縮壓低于中劑量組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表3。

表4 各組大鼠收縮壓比較

3 討論

通心絡(luò)膠囊是一種中成藥，其組成主要為水蛭、全蝎、蟬蛻、蜈蚣、赤芍、人參、冰片以及土鱉蟲等，具有擴張血管、抗凝、降脂、維護血管通暢等作用。通心絡(luò)膠囊能夠在一定程度上抑制自發(fā)性高血壓大鼠血壓，延緩高血壓的發(fā)病進程，其作用可能與以下幾方面相關(guān)［6，7］:血管內(nèi)皮功能異常在高血壓發(fā)病中具有重要作用，自發(fā)性高血壓大鼠因多種病理因素致使血管內(nèi)皮細胞損傷，NO分泌減少，ET分泌增加，促進且加重高血壓的發(fā)生，現(xiàn)代藥理研究表明［8］，通心絡(luò)膠囊可改善血管內(nèi)皮功能、改善血液流變學及緩解血管痙攣等;②腎素-血管緊張素系統(tǒng)異常是高血壓發(fā)生、發(fā)展獨立影響因素，研究表明通心絡(luò)膠囊可調(diào)節(jié)血管中血管活性物質(zhì)［9］。目前，臨床上尚無有關(guān)通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠研究報道，本研究旨在初步探討通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠可能作用機制，為通心絡(luò)膠囊藥理作用提供一定參考意義。

血管內(nèi)皮是血管壁和血液間的屏障，能夠維持血管通暢和血管壁的光滑，介導(dǎo)免疫反應(yīng)和炎癥，調(diào)節(jié)血管平滑肌的細胞。血管內(nèi)皮功能障礙被認為是高血壓的病因，并且其功能混亂是高血壓病早期表現(xiàn)和始動環(huán)節(jié)的重要特征。臨床大量研究顯示，高血壓患者幾乎均伴血管內(nèi)皮功能減退。血管內(nèi)皮對高血壓影響通過分泌多種血管活性物質(zhì)，從而達到調(diào)節(jié)血管壁的舒縮和平滑肌細胞的增殖等，這些活性物質(zhì)主要包括ET、NO、Ang II。其中NO是內(nèi)皮細胞釋放的一種主要舒血管物質(zhì)，可維持調(diào)節(jié)血壓的穩(wěn)定和維持血管張力的恒定;ET是由血管內(nèi)皮分泌的縮血管多肽，當血管內(nèi)皮損傷時，血管內(nèi)皮ET水平增加;Ang II血管內(nèi)皮細胞分泌細胞因子，能夠促使血管平滑肌發(fā)生劇烈收縮，從而引起血管動脈壓上升及外周阻力增加［10］。本研究結(jié)果表明，通心絡(luò)膠囊可通過降低ET水平和增加NO，改善血管內(nèi)皮功能。

炎癥反應(yīng)在原發(fā)性高血壓發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，且致使原發(fā)性高血壓的血管損傷和靶器官損害［11］。臨床研究表明，高血壓與炎性因子IL-6、TNF-α、CRP 相關(guān)，持續(xù)高水平的 IL-6、TNF-α、CRP可能是高血壓的病理生理基礎(chǔ)［12］。本研究結(jié)果表明，通心絡(luò)膠囊可降低血清IL-6、TNF-α、CRP水平，減輕炎癥反應(yīng)。

綜上所述，通心絡(luò)膠囊對自發(fā)性高血壓大鼠降壓效果明顯，其作用機制可能與改善血管內(nèi)皮功能、炎癥因子水平相關(guān)。

［1］Miller EM，Pomerleau F，Huettl P，et al．Aberrant glutamate signaling in the prefrontal cortex and striatum of the spontaneously hypertensive rat model of attention-deficit/hyperactivity disorder［J］．Psychopharmacology，2014，231(15):3019-3029．

［2］Suwanmanon K，Hsieh PC．Effect of γ-aminobutyric acid and nattokinase-enriched fermented beans on the blood pressure of spontaneously hypertensive and normotensive Wistar-Kyoto rats［J］．Journal of Food＆ Drug Analysis，2014，22(4):485-491．

［3］Clifford L，Dampney BW，Carrive P．Spontaneously hypertensive rats have more orexin neurons in their medial hypothalamus than normotensive rats［J］．Experimental Physiology，2015，100(4):388-398．

［4］鄭雯，李樹青．通心絡(luò)對自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能的影響［J］．中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2009，7(2):179-180．

［5］楊章麗，賈曉云，羅茜元．貝那普利聯(lián)合通心絡(luò)膠囊治療高血壓合并冠心病的療效觀察［J］．安徽醫(yī)藥，2014，18(3):556-558．

［6］饒惠平．通心絡(luò)膠囊治療原發(fā)性高血壓臨床療效及其對血液流變學的影響［J］．中國中醫(yī)藥信息雜志，2009，16(12):15-17．

［7］劉巍，褚福永，袁蓉，等．通心絡(luò)膠囊治療高血壓病療效及安全性系統(tǒng)評價［J］．北京中醫(yī)藥，2015，12(3):196-201．

［8］張曉東．通心絡(luò)膠囊合并替米沙坦對高血壓患者血管內(nèi)皮功能和氧化應(yīng)激的影響［J］．中國循證心血管醫(yī)學雜志，2016，8(3):364-366．

［9］萬艷，韓立燕，王旭輝，等．通心絡(luò)膠囊聯(lián)合厄貝沙坦對高血壓血清超敏C反應(yīng)蛋白及血脂水平的影響［J］．國際中醫(yī)中藥雜志，2014，36(1):33-35．

［10］栗源，可燕，蔣嘉燁，等．天麻鉤藤飲對自發(fā)性高血壓大鼠血管功能及腎臟蛋白表達的影響［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，19(4):481-487．

［11］張志偉，岳桂華，張愛珍．黃連解毒湯對自發(fā)性高血壓大鼠血壓和炎癥因子的影響［J］．中華中醫(yī)藥雜志，2011，19(7):1627-1629．

［12］程功，呂曉莉，任健康，等．阿托伐他汀對血脂正常自發(fā)性高血壓大鼠血壓、血脂和炎癥因子的影響［J］．陜西醫(yī)學雜志，2011，40(11):1450-1451．

Effect of Tong Xin Luo Capsule on the vascular endothelial function and inflammatory factor mechanism of spontaneously hypertensive rats

LI Da-peng，SUN Dang-hui，ZHANG Chun-ru，WEI Lin，NA Shi-jing

R544.1;R332

B

1672-6170(2017)04-0241-03

2016-09-26;

2017-03-16)

△通訊作者