李偉

1青海省棘球絳蟲(chóng)的種類、流行狀況及危害狀況

青海省內(nèi)棘球絳蟲(chóng)的種類有細(xì)粒棘球蚴、多房棘球蚴和石渠棘球絳蟲(chóng)三種，在生物群落中，并存有棘球絳蟲(chóng)和多房棘球絳蟲(chóng)的嚴(yán)重感染，實(shí)為國(guó)內(nèi)外罕見(jiàn)。

細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的終宿主是犬、狼和豺等食肉動(dòng)物；中間宿主是羊、牛、駱駝、豬和鹿等偶蹄類動(dòng)物，偶可感染馬、袋鼠、某些嚙齒類、靈長(zhǎng)類和人（見(jiàn)圖1）。多房棘球蚴常見(jiàn)的終宿主是狐，其次是狗、狼、獾和貓等，在寄生有多房棘球絳蟲(chóng)的終宿主體內(nèi)也可同時(shí)有細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)寄生。多房棘球蚴主要寄生在野生嚙齒類動(dòng)物如田鼠、麝鼠、旅鼠、倉(cāng)鼠、大沙鼠、小家鼠以及褐家鼠體內(nèi)。在我國(guó)常見(jiàn)于報(bào)道的有黃鼠、鼢鼠、長(zhǎng)爪沙鼠、小家鼠、鼠兔以及牦牛、綿羊等，寄生部位主要是肝。人因誤食蟲(chóng)卵而感染，由于人是多房棘球絳蟲(chóng)的非適宜中間宿主，人體感染時(shí)囊泡內(nèi)只含膠狀物而無(wú)原頭蚴。石渠棘球絳蟲(chóng)的終宿主是藏狐和高原鼠兔，到目前為止，還未在藏狐和高原鼠兔以外的動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)有石渠棘球絳蟲(chóng)的寄生。

青海棘球蚴?。òx(chóng)?。┦俏：?yán)重的人獸共患性寄生蟲(chóng)病。目前，在青海高原地區(qū)發(fā)現(xiàn)的是由細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵引起的單房性棘球蚴病和由多房棘球絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵引起的多房性棘球蚴病（泡球蚴?。蚱淞餍袕V泛，危害嚴(yán)重，故已引起全省醫(yī)療衛(wèi)生和獸醫(yī)工作者的普遍關(guān)注，并做了大量的調(diào)查統(tǒng)計(jì)和防治研究工作。

2青海省2010-2013年包蟲(chóng)病研究狀況

2.1流行病學(xué)研究

2.1.1人群包蟲(chóng)病感染調(diào)查筆者等人的實(shí)驗(yàn)室以血清學(xué)診斷方法結(jié)合醫(yī)學(xué)影像學(xué)診斷方法對(duì)人群包蟲(chóng)病進(jìn)行了診斷。在調(diào)查的752人中，用血清學(xué)檢測(cè)試劑盒共檢出50份陽(yáng)性血清，陽(yáng)性率為6.6%。檢出的50份陽(yáng)性血清患者，經(jīng)B超掃描檢查，21人確診為棘球蚴病患者，男性患病率為2.6%，女性患病率為3.0%。

2.1.2中間宿主羊、牦牛、高原鼠兔的感染調(diào)查在海晏縣、剛察縣、共和縣屠宰場(chǎng)、湖東種羊場(chǎng)、澤庫(kù)縣和貴南縣共檢查993只屠宰羊，其中570只羊感染棘球蚴（圖2），感染率為57.4%。在海晏縣、剛察縣、共和縣、祁連縣、達(dá)日縣和門(mén)源縣屠宰場(chǎng)，共檢查594頭屠宰牦牛，其中205頭牦牛感染棘球蚴（圖3），感染率為34.5%。在河卡羊場(chǎng)、湟源縣和稱多縣的草場(chǎng)采用捕鼠夾捕捉當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)高原鼠兔，共捕獲并剖檢高原鼠兔347只，其中17只高原鼠兔感染棘球蚴包囊，感染率為4.90%。

2.1.3終末宿主犬的感染調(diào)查①使用氫溴酸檳榔堿瀉下法調(diào)查175條藏犬，其中，16條感染棘球絳蟲(chóng)，平均感染率為9.1%，感染強(qiáng)度1～10，195條。②使用犬糞便包蟲(chóng)抗原檢測(cè)試劑條法調(diào)查藏犬611條，其中，128條藏犬試劑條反應(yīng)陽(yáng)性，平均陽(yáng)性率為21.0%。

2.1.4狐貍及藏犬棘球絳蟲(chóng)感染狀況2011-2013年，在試驗(yàn)地區(qū)進(jìn)行了部分犬、狐貍棘球絳蟲(chóng)感染率的調(diào)查，對(duì)收集到的狐貍在-70℃冰箱中進(jìn)行3周的處理后，進(jìn)行剖檢。對(duì)38條狐貍的調(diào)查結(jié)果顯示，6只狐貍感染各類棘球絳蟲(chóng)，感染率為15.8%，石渠棘球絳蟲(chóng)的感染強(qiáng)度為1827（247～4，400），多房絳蟲(chóng)的感染強(qiáng)度為865（116～1，640）。捕捉野犬1條，多房棘球絳蟲(chóng)感染強(qiáng)度高達(dá)10，000多條。

2.1.5野生狐貍分布調(diào)查及食性分析①使用探照燈計(jì)數(shù)方法，在河卡地區(qū)，夜晚8：00-12：00，選擇比較平坦較直的道路10 km，汽車以5～10km/h速度行駛，用探照燈照射公路一側(cè)約1km的區(qū)域，發(fā)現(xiàn)野生動(dòng)物用GPS定位，用測(cè)距儀測(cè)定觀察動(dòng)物的距離，用紅外望遠(yuǎn)鏡確定觀察動(dòng)物的種類，次日在發(fā)現(xiàn)野生動(dòng)物的區(qū)域附近收集糞便，進(jìn)行野生動(dòng)物棘球絳蟲(chóng)的感染調(diào)查及食性分析。調(diào)查5次共發(fā)現(xiàn)野生狐貍5只，野兔3只，按此計(jì)算，河卡地區(qū)約10 km2分布有野生狐貍1只左右。②使用紅外線自動(dòng)感應(yīng)相機(jī)調(diào)查方法，在河卡地區(qū)選擇離河卡種羊場(chǎng)5、10和50 km的地方，放置紅外線自動(dòng)感應(yīng)相機(jī)6臺(tái)，每個(gè)地點(diǎn)放置2臺(tái)，2臺(tái)照相機(jī)中間放置羊頭（用鐵釘固定），調(diào)節(jié)照相機(jī)使其鏡頭對(duì)準(zhǔn)中間放置的羊頭，對(duì)進(jìn)入照相機(jī)紅外線感應(yīng)范圍內(nèi)的動(dòng)物進(jìn)行拍照調(diào)查。6臺(tái)照相機(jī)均放置3d，拍到野生狐貍1次，鷹1次，旱獺1次，高原鼠兔若干次。③使用野生動(dòng)物糞便收集及檢測(cè)方法，于2010年7月—2012年8月在河卡地區(qū)野外草地上，通過(guò)對(duì)路邊、草場(chǎng)的隨機(jī)調(diào)查，共撿到疑似狐貍糞便104份。對(duì)收集的糞便清洗表面，提取宿主DNA，經(jīng)PCR擴(kuò)增測(cè)序后確定動(dòng)物種類。對(duì)采集到的104份疑似狐貍糞便，經(jīng)DNA檢查，確定狐貍糞便45份。檢查結(jié)果表明：河卡地區(qū)生活著紅狐和藏狐兩種野生狐貍，分布區(qū)域相互交叉，但河卡山和河卡山以西的高海拔地區(qū)，藏狐的分布較多。同時(shí)對(duì)收集的糞便，用糞抗原檢測(cè)試劑條進(jìn)行包蟲(chóng)抗原檢測(cè)，結(jié)果顯示：1份糞便呈陽(yáng)性，蟲(chóng)卵檢查也檢測(cè)到多房棘球絳蟲(chóng)卵。這種方法也可以檢測(cè)野生動(dòng)物糞便對(duì)環(huán)境的污染，為野生動(dòng)物包蟲(chóng)病的防控提供了依據(jù)。

2.1.6狐貍種類和食性比較

①紅狐：紅狐（Vulpes vulpes）隸屬于食肉目（Carnivora），犬科（Canidae），狐屬（Vulpes），也稱赤狐、火狐，是體型最大的狐貍，體色通常是紅棕色，腿細(xì)長(zhǎng)，背紅棕色居多，肩部和體側(cè)通常是黃色，耳背是黑色或棕色，腹部白色，被毛顏色隨季節(jié)由黃色到棕色變化，尾巴的長(zhǎng)度是體長(zhǎng)的60%～70%，尾尖呈白色。尾巴上部20 mm的狐腺散發(fā)出“狐貍”的味道。

此外，紅狐中還有不少體色的變異類型，但不同的色型并不代表不同的亞種，不管是什么色型，尾巴的尖端均為白色。紅狐分布在亞洲和歐洲，國(guó)內(nèi)大部分地區(qū)都有。紅狐可生活在沙漠、森林、都市地區(qū)，喜歡灌木叢生的棲息地，在半沙漠地區(qū)、高山、森林以及農(nóng)田里均可發(fā)現(xiàn)紅狐。食物主要是小的穴居哺乳動(dòng)物，如各種兔類，除此之外紅狐還捕食青蛙、蛇、昆蟲(chóng)、蝴蝶以及蔬菜等；喜歡夜間活動(dòng)并且善于儲(chǔ)存食物，一天的活動(dòng)范圍達(dá)10 km，冬天較夏天活動(dòng)性強(qiáng)。每年的12月底到次年的3月底進(jìn)行交配。筆者等在2014年對(duì)我國(guó)青藏高原的紅狐食性進(jìn)行了調(diào)查，和同一地區(qū)的藏狐相比，食物中高原鼠兔和哺乳類的比例低，而昆蟲(chóng)和植物的比例高，說(shuō)明青藏高原的紅狐是雜食性的，大多數(shù)通過(guò)捕食寄生多房棘球蚴的高原鼠兔和其他小型嚙齒類動(dòng)物，使紅狐感染多房棘球絳蟲(chóng)。在每天近10 km的活動(dòng)范圍內(nèi)，紅狐通過(guò)糞便排出蟲(chóng)卵，成為該病的傳播者。據(jù)相關(guān)學(xué)者報(bào)道，青藏高原狐貍棘球絳蟲(chóng)的感染率為24.8%（37/149）。筆者等在青海省境內(nèi)海晏、剛察、貴南和玉樹(shù)地區(qū)共剖檢狐貍38只，用哺乳動(dòng)物線粒體D-loop區(qū)通用引物（prL5-CACCATTAGCACCCAAAGCT-3和prH5-CCTGAAGTAGGAACCAGATG-3），對(duì)采集動(dòng)物的肌肉或肝臟所提取的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增后的產(chǎn)物測(cè)序，測(cè)序結(jié)果用BLAST進(jìn)行相似性比對(duì)，確定狐貍種類。經(jīng)鑒定其中27只為紅狐，11只為藏狐。發(fā)現(xiàn)1只紅狐小腸內(nèi)寄生疑似多房棘球絳蟲(chóng)。用蘇木素對(duì)收集到的棘球絳蟲(chóng)進(jìn)行染色，長(zhǎng)約1.5～3.7mm，體節(jié)3～4個(gè)，包括幼節(jié)、成節(jié)、孕節(jié)，生殖孔在體節(jié)中部偏前，從形態(tài)學(xué)上初步判定為多房棘球絳蟲(chóng)。從蟲(chóng)體中提取DNA帯endprint

，用科絳蟲(chóng)通用的引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增后的產(chǎn)物測(cè)序，經(jīng)DNA鑒定為多房棘球絳蟲(chóng)。

②藏狐：藏狐（Vulpes ferrilata）隸屬于食肉目（Carnivora），犬科（Canidae），狐屬（Vulpes），毛被厚而致密、柔軟，尾毛蓬松，背部淺灰色或淺紅棕色，腹部白色，尾尖白色。體形較赤狐略小，但明顯大于沙狐。藏狐在我國(guó)主要棲息于高原草原或高山草甸，主要分布在青藏高原，目前已知的省份（自治區(qū)）有西藏自治區(qū)、青海、四川、甘肅和云南等省，在國(guó)外見(jiàn)于尼泊爾和印度北部地區(qū)。藏狐主要選擇草原和草甸作為生活環(huán)境，偶爾在灌叢和草地的交錯(cuò)地帶出現(xiàn)。2010-2013年，筆者等對(duì)生活在青海省海南州河卡地區(qū)草甸草原上的藏狐進(jìn)行了食性分析。結(jié)果表明：高原鼠兔和其他小型嚙齒類動(dòng)物及大型哺乳類動(dòng)物的殘骸是它們的主要食物組成，除此之外還有一些昆蟲(chóng)、蚯蚓和植物等。糞中的牧草幾乎未被消化，很容易鑒定。由此看來(lái)，藏狐的晝間活動(dòng)與其獵物（高原鼠兔）的晝行性生活習(xí)性有關(guān)，藏狐的全天活動(dòng)主要是用來(lái)捕食。經(jīng)青海省林業(yè)局批準(zhǔn)，筆者等剖檢了捕獲狐貍和意外死亡的野生狐貍38只，其中11只為藏狐。在5只藏狐的小腸發(fā)現(xiàn)寄生疑似棘球絳蟲(chóng)，感染率為45.5%。用蘇木素對(duì)收集到的棘球絳蟲(chóng)進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)約1.2～1.8mm，2個(gè)體節(jié)，無(wú)成節(jié)，從形態(tài)學(xué)上初步判定為石渠棘球絳蟲(chóng)。從蟲(chóng)體中提取DNA帯，用科絳蟲(chóng)通用的引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增后的產(chǎn)物測(cè)序，經(jīng)DNA鑒定為石渠棘球絳蟲(chóng)。

③沙狐：沙狐（Vulpes corsac）身體比赤狐小，為我國(guó)狐屬中最小者，體長(zhǎng)50～60 cm，體重約2～3 kg，尾長(zhǎng)25～35 cm，四肢和耳朵比紅狐略小。背部呈淺棕灰色或淺紅褐色，腹部呈淡白色或淡黃色。毛色呈淺沙褐色到暗棕色，頭上頰部較暗，耳殼背面和四肢外側(cè)灰棕色，腹下和四肢內(nèi)側(cè)為白色，尾基部半段毛色與背部相似，末端半段呈灰黑色。夏季毛色近于淡紅色。沙狐上門(mén)齒側(cè)邊的小尖幾乎不存在，外緣門(mén)齒與其他門(mén)齒略有間隙，并稍靠后。沙狐主要分布在新疆、青海、甘肅、寧夏、內(nèi)蒙古、西藏，主要棲息于干草原、荒漠和半荒漠地帶，遠(yuǎn)離農(nóng)田、森林和灌木叢。沙狐白天非常活躍，也有夜間活動(dòng)的報(bào)道，聽(tīng)覺(jué)、視覺(jué)、嗅覺(jué)皆靈敏，四處流浪，無(wú)固定居住區(qū)域。相比其他狐屬，沙狐更具群居性，甚至多只共住同一洞穴。在冬季，沙狐結(jié)成小型覓食群體，其中有配偶和成年子女。它們住在類似“沙狐城”的相鄰洞穴，這些洞穴經(jīng)常接管自其他動(dòng)物，如旱獺等，沙狐挖洞通常簡(jiǎn)而不深。沙狐食物生態(tài)位寬度隨季節(jié)不同有所變化，春、夏兩季節(jié)間的食物組成無(wú)顯著差異。肉食性，齒細(xì)小，以嚙齒類動(dòng)物為主要食物，鳥(niǎo)類和昆蟲(chóng)次之，達(dá)烏爾黃鼠、黑線倉(cāng)鼠和布氏田鼠在沙狐食物組成中超過(guò)50%；其他嚙齒類動(dòng)物，如草原旱獺、褐家鼠和跳鼠科等所占比例小于25%；鳥(niǎo)類主要為百靈科，昆蟲(chóng)以蝗科為主，還包括紅蝽科、步甲科、虎甲科、水龜甲科等。沙狐捕捉嚙齒動(dòng)物很有一套辦法，先躍入空中，再撲向獵物，獵物很少有機(jī)會(huì)逃脫，借助一雙寬大的耳朵，它們能準(zhǔn)確定位獵物的跑動(dòng)方向。通過(guò)對(duì)狐貍棘球絳蟲(chóng)感染狀況的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)藏狐感染石渠棘球絳蟲(chóng)，未發(fā)現(xiàn)感染多房棘球絳蟲(chóng)和細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)。紅狐感染多房棘球絳蟲(chóng)，未發(fā)現(xiàn)感染石渠棘球絳蟲(chóng)和細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)。沙狐體上未發(fā)現(xiàn)石渠棘球絳蟲(chóng)、多房棘球絳蟲(chóng)和細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)。藏犬上發(fā)現(xiàn)了多房棘球絳蟲(chóng)和細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、未發(fā)現(xiàn)石渠棘球絳蟲(chóng)。

2.2棘球絳蟲(chóng)形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)研究

2.2.1細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)掃描電鏡形態(tài)學(xué)觀察在日本宮崎大學(xué)完成棘球絳蟲(chóng)掃描電鏡的觀察。先后用70%的酒精、2.5%的戊二醛液、1%鋨酸溶液（3小時(shí)）固定，取出蟲(chóng)體，用不同濃度的酒精進(jìn)行脫水、臨界點(diǎn)干燥、表面噴金后，掃描電鏡觀察。

2.2.2棘球絳蟲(chóng)mtDNA基因多態(tài)性研究對(duì)收集到的蟲(chóng)體提取總DNA，設(shè)計(jì)和合成引物，對(duì)目的片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，純化回收PCR產(chǎn)物，克隆和測(cè)序目的基因，構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)及同源性分析。青海省感染藏犬和野生狐貍的21個(gè)棘球絳蟲(chóng)分離株（16株來(lái)自藏犬，5株來(lái)自野生狐貍）COI基因片段和NDI基因片段聚類分析進(jìn)化樹(shù)和同源性比較均發(fā)現(xiàn)，11株分離株為E.g1型，占52.4%，6株分離株為E.m，占28.6%，4株分離株為E.s，占19.0%；堿基的變化為轉(zhuǎn)換和顛換，且轉(zhuǎn)換明顯比顛換多。在BLAST網(wǎng)站上，與已登錄的COI基因序列進(jìn)行多重比較，序列同源性88.8%～100%；與已登錄的NDI基因序列進(jìn)行多重比較，序列同源性為83.6%～100%。

2.3藏犬包蟲(chóng)病的防治

2.3.1藏犬驅(qū)蟲(chóng)藥物的篩選及效果考核

①方法：在青海省剛察縣、海晏縣、共和縣和湖東羊場(chǎng)4個(gè)地區(qū)各選放牧犬45條共180條。將這些犬分為三組，每組60條，第一組投喂氫溴酸檳榔堿，第二組投喂愛(ài)普銳克（吡喹酮咀嚼片），第三組投喂用糌粑包裹的吡喹酮片。用藥后45 d，用包蟲(chóng)快速診斷試劑條檢查驅(qū)蟲(chóng)效果。

②結(jié)果：氫溴酸檳榔堿驅(qū)蟲(chóng)方法費(fèi)時(shí)、費(fèi)工，且對(duì)檢查人員的危險(xiǎn)性也較大；愛(ài)普銳克咀嚼片，專門(mén)為食肉動(dòng)物研制的驅(qū)蟲(chóng)藥，藏犬采食率高，驅(qū)蟲(chóng)效果好。

2.3.2藏犬藥物防治及效果

①藥物防治試驗(yàn)：在青海河卡種羊場(chǎng)和稱多縣珍秦鄉(xiāng)用愛(ài)普銳克咀嚼片按20 kg體重服用1片，進(jìn)行藏犬棘球絳蟲(chóng)病防治試驗(yàn)。其中，在河卡種羊場(chǎng)，每隔45 d左右投藥一次；稱多縣珍秦鄉(xiāng)，每年4月和10月各投藥一次。同時(shí)對(duì)2個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)每年4月和10月，用犬糞便檢測(cè)金標(biāo)試劑條檢查驅(qū)蟲(chóng)效果。

②大面積藥物防治：2010-2013年，在河卡種羊場(chǎng)，海晏縣三角城鎮(zhèn)和七四牧場(chǎng)，稱多縣珍秦鄉(xiāng)用愛(ài)普銳克咀嚼片進(jìn)行藏犬棘球絳蟲(chóng)病防治。

③效果考核：4個(gè)防治點(diǎn)于2013年4月和7月，用犬糞便檢測(cè)金標(biāo)試劑條檢查驅(qū)蟲(chóng)效果。

2.4小結(jié)

1）經(jīng)調(diào)查，青海省人、牛、羊等包蟲(chóng)中間宿主的感染率分別為6.6%、34.5%和57.4%。終末宿主藏犬棘球絳蟲(chóng)的平均感染率為21.0%，野生狐貍也檢出多房和石渠棘球絳蟲(chóng)，對(duì)防治工作帶來(lái)難度。endprint

2）經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)，青海省存在細(xì)粒、多房和石渠3種棘球絳蟲(chóng)，并且存在基因多態(tài)性的變異。

3）藏犬的驅(qū)蟲(chóng)以愛(ài)普銳克咀嚼片為首選藥物。通過(guò)對(duì)環(huán)湖地區(qū)和玉樹(shù)地區(qū)間隔45 d和半年驅(qū)蟲(chóng)，都取得了良好的效果。

4）通過(guò)對(duì)海晏和河卡地區(qū)的比較，發(fā)現(xiàn)牧民群眾對(duì)包蟲(chóng)病的認(rèn)識(shí)程度直接影響到該地區(qū)的防治效果。說(shuō)明了在包蟲(chóng)病的防治工作中，培訓(xùn)和宣傳工作的重要性。

3青海省2013年-2015年初包蟲(chóng)病防治研究狀況

3.1青海省玉樹(shù)州稱多和海北州海晏地區(qū)藏犬棘球絳蟲(chóng)感染調(diào)查

3.1.1調(diào)查時(shí)間和地區(qū)從2010年開(kāi)始，對(duì)稱多縣珍秦鄉(xiāng)地區(qū)208只犬糞便進(jìn)行了棘球絳蟲(chóng)感染調(diào)查，結(jié)果顯示藏犬棘球絳蟲(chóng)的感染率達(dá)38.60%。通過(guò)3年的防控，于2013年用以上同樣方法檢查了96條藏犬。在海晏地區(qū)以剖檢法在具有代表性的甘子河鄉(xiāng)、青海湖鄉(xiāng)和三角城鎮(zhèn)共剖檢調(diào)查藏犬15條。

3.1.2調(diào)查方法

①犬用包蟲(chóng)快速診斷試劑條：犬用包蟲(chóng)快速診斷試劑條由日本宮崎大學(xué)寄生蟲(chóng)教研室提供，批號(hào)：8201。采集牧犬的新鮮糞檢測(cè)。打開(kāi)犬糞便檢測(cè)試劑盒，取出過(guò)濾液管，從鋁箔袋中取出檢測(cè)試劑條，在其上標(biāo)記犬號(hào)、日期、時(shí)間。取出糞便收集棍插入糞便中轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)次，取出，旋進(jìn)過(guò)濾液管中充分振蕩。擠壓過(guò)濾管棄去前二滴，然后滴三滴到試劑條檢測(cè)區(qū)內(nèi)，放置30 min，判斷結(jié)果。

②剖檢法：剖檢人員進(jìn)行嚴(yán)格的防護(hù)措施后，對(duì)犬進(jìn)行剖檢，應(yīng)用沉淀法對(duì)小腸中的內(nèi)容物進(jìn)行檢查，收集被檢犬感染的棘球絳蟲(chóng)，用70%的酒精進(jìn)行固定逐條計(jì)數(shù)、登記。

3.1.3檢測(cè)結(jié)果采用犬棘球絳蟲(chóng)快速診斷試劑條對(duì)青海省玉樹(shù)稱多縣珍秦鄉(xiāng)的96條犬進(jìn)行了檢查，陽(yáng)性7條，陽(yáng)性率7.3%，可疑3只。剖檢法檢查，在具有代表性的甘子河鄉(xiāng)，青海湖鄉(xiāng)，三角城鎮(zhèn)共調(diào)查犬15條，其中感染細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)3條，感染率20%。泡狀帶絳蟲(chóng)3條，感染率20%。

3.2青海省玉樹(shù)州稱多珍秦鄉(xiāng)和海北州海晏甘子河鄉(xiāng)藏犬棘球絳蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)推廣試驗(yàn)

3.2.1調(diào)查時(shí)間和地區(qū)2013-2014年底，對(duì)稱多縣珍秦鄉(xiāng)的11個(gè)自然村3，250戶牧戶的約9，750條藏犬進(jìn)行了每隔45 d一次的驅(qū)蟲(chóng)推廣試驗(yàn)，一年投藥8次，兩年共16次，共投藥156，000條次。從2013-2014年底，對(duì)海晏甘子河鄉(xiāng)和青海湖鄉(xiāng)的8個(gè)自然村510戶牧戶的約1，530條藏犬進(jìn)行了每隔45d一次的驅(qū)蟲(chóng)推廣試驗(yàn)，兩年共16次，共投藥24，480條次。

3.2.2藥物及試驗(yàn)方法愛(ài)普銳克咀嚼片，10 kg體重服用1片投喂。防疫員負(fù)責(zé)各村藏犬的藥物投喂，鄉(xiāng)獸醫(yī)站課題協(xié)作人員進(jìn)行督促和檢查，課題組成員每3個(gè)月進(jìn)行一次實(shí)地推廣指導(dǎo)。

3.2.3驅(qū)蟲(chóng)效果2個(gè)防治點(diǎn)于2013年4月-2014年12月，收集防治后犬糞便，應(yīng)用ELISA試驗(yàn)法檢查驅(qū)蟲(chóng)效果。在稱多地區(qū)先后采集藏犬防治后糞便318份，在-80℃冰箱進(jìn)行蟲(chóng)卵滅活處理，于12月份進(jìn)行ELISA試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。ELISA試驗(yàn)結(jié)果：318份犬中11份ELISA檢測(cè)呈陽(yáng)性，陽(yáng)性率為3.5%。通過(guò)ELISA試驗(yàn)檢測(cè)，結(jié)果顯示陽(yáng)性率從2013年的7.3%下降到3.5%，防控效果明顯，驅(qū)蟲(chóng)后糞便無(wú)害化處理。在海晏地區(qū)先后采集藏犬糞便183份，經(jīng)-70℃冰箱處理后，于12月份進(jìn)行ELISA試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。ELISA試驗(yàn)結(jié)果：183份犬中6份ELISA檢測(cè)呈陽(yáng)性，陽(yáng)性率為3.28%。通過(guò)ELISA試驗(yàn)檢測(cè)，從2013年的20%下降到3.28%，防控效果非常明顯，驅(qū)蟲(chóng)后糞便無(wú)害化處理。愛(ài)普銳克咀嚼片驅(qū)蟲(chóng)效果高，同時(shí)對(duì)檢查人員也是很安全的。愛(ài)普銳克咀嚼片為犬的棘球絳蟲(chóng)最佳驅(qū)蟲(chóng)藥物。

3.3中間宿主藏羊棘球蚴感染狀況調(diào)查

通過(guò)對(duì)青海省兩個(gè)地區(qū)羊感染棘球蚴病的調(diào)查和對(duì)犬棘球絳蟲(chóng)的防治，從防治前的最高感染率44.4%下降到28%。但是羊感染棘球蚴病仍然較為嚴(yán)重，最低的的感染率仍然達(dá)28%。從調(diào)查數(shù)據(jù)上看出，在同一地區(qū)，實(shí)施包蟲(chóng)病的綜合防控措施后，中間宿主上的包蟲(chóng)病的感染率會(huì)逐漸降低，減少了對(duì)人和家畜的危害。

3.4中間宿主牦牛的調(diào)查研究

通過(guò)對(duì)青海省兩個(gè)地區(qū)牦牛感染棘球蚴病的調(diào)查，從防治前的58.9%下降到28.3%，效果顯著。但是青海省的這些地區(qū)牦牛感染棘球蚴病仍然較為嚴(yán)重，最低的的感染率達(dá)28.3%之多。

3.5高原鼠兔棘球蚴的調(diào)查研究

在玉樹(shù)州稱多縣和達(dá)日縣的草場(chǎng)采取鼠夾方法捕捉當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)嚙齒類動(dòng)物高原鼠兔，捕捉到高原鼠兔和田鼠后，立刻進(jìn)行剖檢，對(duì)感染棘球蚴陽(yáng)性的高原鼠兔和田鼠，進(jìn)行感染部位拍照，進(jìn)行詳細(xì)記錄，標(biāo)本用75%的酒精固定。將病變臟器帶回實(shí)驗(yàn)室剖檢并記錄囊腫的大小、數(shù)量、部位及性質(zhì)等。

捕捉高原鼠兔和田鼠共計(jì)425只，其中感染多房棘球蚴的18只，感染率7.24%，感染強(qiáng)度1～3，其中感染石渠棘球蚴種9只，感染率2.12%.

在青藏高原區(qū)域高原鼠兔和田鼠分布廣、數(shù)量多，危害極大，它們既是牧區(qū)大量無(wú)主犬的捕食對(duì)象，也是野生食肉動(dòng)物（狐貍、狼等）的捕食對(duì)象，導(dǎo)致該地域棘球蚴病傳播和流行。

3.6野外狐貍糞便檢查

2年共采集疑似狐貍糞便112份，經(jīng)DNA檢查，確定為狐貍糞便的48份。多數(shù)糞便因?yàn)闀r(shí)間太久未能提出和擴(kuò)增宿主DNA。檢查結(jié)果表明：青海地區(qū)生息著紅狐和藏狐兩種野生狐貍，分布區(qū)域相互交叉。

用離心漂浮法進(jìn)行蟲(chóng)卵檢查，蔗糖溶液比重1.27 g/mL。取糞便1 g，用蔗糖漂浮離心法檢查蟲(chóng)卵，將觀察到的蟲(chóng)卵進(jìn)行計(jì)數(shù)、收集。

經(jīng)DNA檢查，確定的48份狐貍糞便中，有5份中檢查出棘球絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵，最多每克糞便中蟲(chóng)卵數(shù)達(dá)401個(gè)，狐貍棘球絳蟲(chóng)的感染率達(dá)到10.4%。這就充分說(shuō)明了，該地區(qū)野生狐貍攜帶棘球絳蟲(chóng)的嚴(yán)重程度，這種傳播源的存在，對(duì)人類健康及畜牧業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的危害。

3.7科普宣傳

通過(guò)舉辦培訓(xùn)班及科技人員的現(xiàn)場(chǎng)講解和示范，使參加培訓(xùn)的基層專業(yè)技術(shù)人員、項(xiàng)目示范戶和牧民群眾成為當(dāng)?shù)匕x(chóng)病防治的帶頭人和其他牧民群眾的老師，帶動(dòng)當(dāng)?shù)氐陌x(chóng)病防治工作，實(shí)現(xiàn)以戶代村、以村代鄉(xiāng)、以鄉(xiāng)帶縣的模式，帶動(dòng)廣大牧民進(jìn)行包蟲(chóng)病的綜合防控措施，提高對(duì)犬驅(qū)蟲(chóng)的防治密度，根除野犬的存在，加強(qiáng)疫情監(jiān)測(cè)和疫點(diǎn)調(diào)查，有效控制包蟲(chóng)病疫情，防止疫情蔓延。在人群健康教育中開(kāi)展包蟲(chóng)病防治知識(shí)的宣傳，增強(qiáng)群眾自我保護(hù)意識(shí)，養(yǎng)成良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣，減少手口接觸傳播方式。

舉辦包蟲(chóng)防治培訓(xùn)班及包蟲(chóng)防治科普宣傳。為了提高基層牧民群眾的自防意識(shí)，在地方組織當(dāng)?shù)孛耖g獸醫(yī)和牧民，舉辦包蟲(chóng)危害及其防治培訓(xùn)；在村發(fā)放包蟲(chóng)危害預(yù)防科普手冊(cè)，手冊(cè)為藏漢雙語(yǔ)，圖文并茂，讓廣大牧民能了解包蟲(chóng)病，重視包蟲(chóng)病，以達(dá)到對(duì)包蟲(chóng)病預(yù)防為主的目的。

4今后的研究目標(biāo)

1）明確不同種類狐貍對(duì)三種棘球絳蟲(chóng)的感染率、中間宿主鼠類與狐貍和犬之間的循環(huán)感染關(guān)系。研究不同種類狐貍的部分行為習(xí)性、不同種類狐貍對(duì)三種棘球絳蟲(chóng)的感染率及中間宿主鼠類與終末宿主狐貍間的感染關(guān)系。

2）摸清狐貍及犬包蟲(chóng)病病原—蟲(chóng)卵對(duì)環(huán)境污染的程度與鼠類作為儲(chǔ)存棘球絳蟲(chóng)病原的相關(guān)因素。

3）根據(jù)狐貍行為習(xí)性研究結(jié)果表明，以洞穴為藥物驅(qū)蟲(chóng)誘餌投放點(diǎn)，進(jìn)行野生狐貍的藥物驅(qū)蟲(chóng)，控制狐貍棘球絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵病原對(duì)環(huán)境的污染，以達(dá)到降低蟲(chóng)卵病原對(duì)人類和家畜的危害。

4）通過(guò)對(duì)藏區(qū)城鎮(zhèn)犬只感染棘球絳蟲(chóng)的流行病學(xué)研究及犬只行為學(xué)研究，分析出犬只行為對(duì)于棘球絳蟲(chóng)傳播的影響及相關(guān)性。

5）根據(jù)不同區(qū)域?qū)茵B(yǎng)犬進(jìn)行45 d或半年一次的驅(qū)蟲(chóng)，降低犬對(duì)棘球絳蟲(chóng)的感染率，減少環(huán)境的污染。

6）探索驅(qū)除野犬棘球絳蟲(chóng)的控制方法。endprint