陳珍珍，曹振強(qiáng)，周廣宇，李 娜，王 茜*

(1．吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎病內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春130033；2．吉林大學(xué)第二醫(yī)院 超聲科，吉林 長(zhǎng)春130041)

東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態(tài)性與2型糖尿病相關(guān)性研究

陳珍珍1，曹振強(qiáng)2，周廣宇1，李 娜1，王 茜1*

(1．吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎病內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春130033；2．吉林大學(xué)第二醫(yī)院 超聲科，吉林 長(zhǎng)春130041)

目的 探討東北漢族抵抗素基因rs1862513(G/C)位點(diǎn)與2型糖尿病發(fā)病及臨床表型相關(guān)性。方法 應(yīng)用連接酶反應(yīng)分型法檢測(cè)79例2型糖尿病患者及79例正常對(duì)照者rs1862513(G/C)多態(tài)性。結(jié)果 2型糖尿病組和對(duì)照組抵抗素rs1862513(G/C)位點(diǎn)基因型分布分別為GG49.5%、GC44.3%、CC6.2%和GG40.2%、GC47.4%、CC12.4%；等位基因頻率分別為G型71.6%、C 28.4%和G型63.9%、C型36.1%，該位點(diǎn)的基因型分布和等位基因頻率在兩組間分布均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均>0.05)。病例組CC基因型患者空腹血糖明顯低于GG基因型患者(P值<0.05)，體重指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰島素以及胰島素敏感指數(shù)等臨床檢測(cè)指標(biāo)在rs1862513(G/C)三種基因型患者之間沒(méi)有顯著差異(P值均>0.05)。結(jié)論 東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態(tài)性與2型糖尿病發(fā)病無(wú)顯著相關(guān)性，但與患者空腹血糖值相關(guān)。

抵抗素;基因多態(tài)性;2型糖尿病

(ChinJLabDiagn,2017,21:1185)

我國(guó)糖尿病發(fā)病率逐漸升高，并呈年輕化趨勢(shì)。隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃完成，以及遺傳學(xué)理論與技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，糖尿病發(fā)病遺傳學(xué)因素成為闡述糖尿病發(fā)病機(jī)理及治療重要依據(jù)，特別是糖尿病發(fā)生易感性基因研究成為熱點(diǎn)[1，2]。

人抵抗素來(lái)源于單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，為炎性因子參與機(jī)體內(nèi)多種病理過(guò)程[3]。小鼠糖尿病模型研究認(rèn)為抵抗素與糖尿病發(fā)病過(guò)程中胰島素抵抗有關(guān)[4]，而人類(lèi)抵抗素是否通過(guò)誘發(fā)胰島素抵抗引發(fā)2型糖尿病的發(fā)生還存在爭(zhēng)論[5，6]。近幾年發(fā)現(xiàn)抵抗素基因的單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)可能影響血清中抵抗素的含量，并與2型糖尿病有密切關(guān)系。對(duì)rs1862513(G/C)位點(diǎn)研究較多[7-9]。研究結(jié)果表明抵抗素基因rs1862513(G/C)位點(diǎn)與我國(guó)2型糖尿病發(fā)病沒(méi)有相關(guān)性[10-12]。對(duì)我國(guó)南方人群基因多態(tài)性與疾病相關(guān)性研究結(jié)果和種族以及地區(qū)不同具有一定相關(guān)性[13，14]。本研究以我國(guó)東北地區(qū)人群為研究對(duì)象，探討抵抗素基因rs1862513(G/C)位點(diǎn)與本地區(qū)糖尿病發(fā)病相關(guān)性及臨床表型相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象

97例2型糖尿病患者均為吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院內(nèi)分泌科明確診斷者。資料包括年齡、性別、體重指數(shù)、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素、糖化血紅蛋白、胰島素抵抗指數(shù)等。正常對(duì)照組97例為吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院體檢中心體檢健康者。2型糖尿病患者平均年齡47.34±7.04(歲)，正常對(duì)照組平均年齡49.25±8.80(歲)，兩組間沒(méi)有顯著性差異(P值=0.097)。2型糖尿病患者男49名，女48名，正常對(duì)照組男57名，女40名，組間男女分布沒(méi)有顯著性差異(P值=0.325)。

1.2 DNA提取

抗凝靜脈血，2 000 g離心10 min，取血漿，血細(xì)胞用于DNA提取(試劑盒北京天根生物公司)。DNA用紫外分光光度計(jì)DNA含量與OD260/OD280比值，DNA分裝置-80℃保存。

1.3 基因分型

97例糖尿病患者與97例對(duì)照組DNA樣本用連接酶檢測(cè)反應(yīng)分型法抵抗素基因rs1862513(G/C)位點(diǎn)基因型檢測(cè)。由上海捷瑞生物技術(shù)有限公司完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

抵抗素基因rs1862513位點(diǎn)在人群基因型、等位基因頻率分布及各組Hardy-Weinberg equilibrium統(tǒng)計(jì)應(yīng)用Shesis軟件(http://analysis.bio-x.cn/SHEsisMain.htm)進(jìn)行分析；rs1862513位點(diǎn)與糖尿病相關(guān)性模型(包括codominant model、dominant model、recessive model)統(tǒng)計(jì)應(yīng)用SPSS13.0 軟件二分值Logit 回歸進(jìn)行分析； 抵抗素基因的rs1862513位點(diǎn)基因型間臨床相關(guān)指標(biāo)包括體重指數(shù)、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、糖化血紅蛋白、空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù)和胰島素敏感指數(shù)等的差異分析應(yīng)用SPSS13.0 軟件方差分析方法進(jìn)行分析。P值<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抵抗素基因rs1862513(G/C)基因型與等位基因人群分布頻率

Hardy-Weinberg遺傳平衡分析結(jié)果顯示rs1862513基因型在兩組人群中分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律。見(jiàn)表1。rs1862513基因型頻率分布在T2DM組與正常組人群差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.220),見(jiàn)表1。rs1862513等位基因頻率在T2DM組與正常組人群分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.103),見(jiàn)表2。

表1 rs1862513基因型在正常組與糖尿病組分布頻率

#基因型在各組分布差異性比較，*各組Hardy-Weinberg遺傳平衡檢測(cè)P值

表2 rs1862513等位基因在正常組與糖尿病組分布頻率

2.2 rs1862513位點(diǎn)與糖尿病相關(guān)性分析

通過(guò)分析rs1862513位點(diǎn)3種遺傳模式與糖尿病相關(guān)分析結(jié)果顯示：rs1862513位點(diǎn)3種遺傳模式與糖尿病沒(méi)有相關(guān)性，見(jiàn)表3。

表3 rs1862513位點(diǎn)與糖尿病相關(guān)性分析結(jié)果

*Codominant:GG vs.GC vs.CC;Dominant:CC+GC vs.GG;Recessive：CC vs.GC+GG

2.3 2型糖尿病患者rs1862513基因型與臨床生化指標(biāo)相關(guān)性分析

病例組CC基因型患者空腹血糖明顯低于GG基因型患者(P值<0.05)，患者其他臨床生化指標(biāo)在病例組中rs1862513 3種基因型患者間沒(méi)有顯著差異(P值均>0.05)，見(jiàn)表4。

3 討論

rs1862513(G/C)位點(diǎn)位于抵抗素基因啟動(dòng)子區(qū)域-420位置，該位點(diǎn)基因型與血清抵抗素濃度高低相關(guān)，說(shuō)明該基因型影響抵抗素基因啟動(dòng)子的活性[7,15]。本研究檢測(cè)東北漢族人群97例2型糖尿病患者，97例正常對(duì)照者rs1862513(G/C)多態(tài)性。結(jié)果顯示rs1862513(G/C)基因型在人群中分布以GG型為主，等位基因CC為少數(shù)型，與其他幾個(gè)研究位點(diǎn)基因分布不同，上述人群rs1862513(G/C)位點(diǎn)分布GG為少數(shù)型[8，16-18]。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)rs1862513(G/C)基因型與等位基因頻率在人群中分布無(wú)差異性，而與2型糖尿病相關(guān)性分析結(jié)果rs1862513(G/C)位點(diǎn)與2型糖尿病無(wú)相關(guān)性，這與國(guó)內(nèi)研究結(jié)果相同[10，11]。

表4 rs1862513位點(diǎn)基因型間2型糖尿病患者相關(guān)生化指標(biāo)的差異分析結(jié)果±SD)

*與GG相比P<0.05

通過(guò)分析臨床患者相關(guān)生化指標(biāo)在rs1862513(G/C)基因型之間差異，發(fā)現(xiàn)糖尿病患者CC基因型空腹血糖(7.615±1.387 μmol/L)明顯低于GG基因型患者(9.656±2.296 μmol/L)(P值<0.05)。Makino H等在日本人群研究羅格列酮治療糖尿病有效性相關(guān)分子機(jī)制過(guò)程中發(fā)現(xiàn)rs1862513(G/C)不同基因型人群的空腹血糖沒(méi)有差異，給予羅格列酮后，通過(guò)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)rs1862513(G/C)GG型與羅格列酮降糖效果密切相關(guān)[19]。病例組樣本體重指數(shù)、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、糖化血紅蛋白、胰島素敏感指數(shù)在rs1862513(G/C)中三種基因型間沒(méi)有顯著性差異(P值均>0.05)。

上述研究結(jié)果表明東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態(tài)性與2型糖尿病無(wú)顯著相關(guān)性，但rs1862513(G/C)基因型與血糖的水平有關(guān)，說(shuō)明該基因多態(tài)性可能通過(guò)調(diào)節(jié)抵抗素表達(dá)影響血糖代謝，具體分子機(jī)制需要進(jìn)一步研究。

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The correlation of resistin gene rs1862513(G/C)polymorphism with type 2 diabetes in northeast Chinese Han population

CHENZhen-zhen,CAOZhen-qiang,ZHOUGuang-yu,etal.

(Nephrology,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To explore the correlation of resistin gene rs1862513 (G/C) polymorphism with type 2 diabetes and its clinical phenotype in northeast Chinese Han population.Methods Seventy-nine type 2 diabetic patients and 79 normal controls were enrolled.The polymorphism of rs1862513 (G/C) was detected by ligase detection reaction.Results The genotype frequencies of rs1862513(G/C) in type 2 diabetes group and normal control group are GG 49.5%,GC44.3%,CC6.2% and GG 40.2%,GC 47.4%,CC 12.4% respectively.Allele frequency is G 63.9%,C 36.1% and G 71.6%,C 28.4% respectively.There was no difference of resistin gene polymorphism in disease group and normal control group (P>0.05).The level of fasting blood glucose in patients with genetype CC were significantly lower than that in patients with genetype GG (P<0.05).There was no difference in body mass index,total cholesterol ,triglyceride,sglycated hemoglobin,high density lipoprotein cholesterol,low density lipoprotein cholesterol,insulin and insulin sensitive index(P>0.05)between the two patient groups.Conclusion There is no significant correlation between resistin gene rs1862513(G/C) and type 2 diabetes in northeast Han population，but there is significant correlation with level of blood glucose.

Resistin gene;Polymorphism;Type2 diabetes

吉林省科技廳項(xiàng)目(編號(hào)：20150204065SF)

1007-4287(2017)07-1185-04

R587.1

A

2016-11-30)

*通訊作者